不同血清标志物在儿童白血病合并感染患者早期诊断中的价值

陈慎，田文芳，易素芳，郑水华，郑曼娜

［珠海市中西医结合医院（珠海市第二人民医院） 检验科，广东 珠海 519000］

化疗是治疗白血病的主要方法，对延长患者生存时间和改善生活质量有重要意义，但部分白血病患者存在全血白细胞、粒细胞和骨髓中造血干细胞急剧降低等粒细胞缺乏症状[1]。此外，儿童白血病患者自身免疫力相对较低，感染率升高且容易扩散。因此，对儿童白血病合并感染患者进行早期识别和诊断，加强治疗和监护具有重要的临床意义。

相关研究[2]显示普通感染患者降钙素原（procalcitonin, PCT）、C-反应蛋白（C-reactive protein, CRP）、超敏C反应蛋白（high sensitivity C reactive protein, hs-CRP）及中性粒细胞百分比（neutrophil percentage, NEU%）等血清生物学指标对感染预测均具有重要价值，急性白血病化疗后粒细胞缺乏期粒细胞往往呈现增高状态，但急性白血病化疗后粒细胞缺乏期患者其体内粒细胞往往急剧降低。万岁桂[3]的研究发现常规情况下中性粒细胞（neutrophil, NEU）表面的CD64表达水平较低，感染早期CD6在中性粒细胞表面大量表达。故此，本研究探讨外周血中性粒细胞表面CD64表达指数、PCT、CRP、hs-CRP及NEU%在儿童白血病合并细菌感染诊断中的价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年1月‐2017年3月本院治疗的白血病儿童87例，其中合并细菌感染51例（感染组），无细菌感染36例（非感染组），纳入标准[4]：①急性白血病；②年龄＜12岁；③均为初次确诊，既往未接受过治疗；④患儿家属知情同意。排除标准：①合并有严重心、肝等脏器功能障碍；② 合并有颅内或其他部位大出血；③有免疫功能既往史。同时选取健康儿童50例作为对照组，各组受试者一般资料比较差异无统计学意义（P ＞0.05），具有可比性。见表1。

表1 各组一般资料比较

1.2 实验方法

全自动细菌鉴定VITEK 2 Compact 30（法国生物梅里埃公司）进行细菌检验；BDFACS Aria二代流式细胞仪（美国BD公司生产）检测CD64；免疫比浊法检测CRP、hs-CRP和PCT，使用FACS Calibur流式细胞仪（美国BD公司生产）、日立7180型全自动生化分析仪、罗氏ES2012检测；中性粒细胞百分比（NEU%）使用电阻抗法检测。

1.3 统计学方法

统计分析采用SPSS 19.0软件，符合正态分布计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较使用方差分析，两两比较采用LSD-t检验；非正态分布计量资料采用M（Q25，Q75）表示，组间比较采用秩和检验；计数资料以百分比（%）表示，计数资料比较使用χ2检验；采用受试者工作特征曲线（ROC曲线）分析各指标预测白血病合并感染的诊断价值。P ＜0.05为差异具有统计学意 义。

2 结果

2.1 感染组患者病原学分布

51例患者中，共有43例患者培养出病原菌，共计51株病原菌，其中革兰阳性菌31株，革兰阴性菌20株，病原菌分布见表2。

表2 感染组患者病原菌分布

2.2 各组外周血CD64表达指数、PCT及CRP等比较

感染组CD64表达指数、PCT、CRP、hs-CRP和NEU%明显高于非感染组和对照组（P＜0.05）；非感染组CD64表达指数、PCT、hs-CRP和NEU%明显高于对照组（P ＜0.05）。见表3。

表3 各组外周血CD64表达指数、PCT及CRP等比较

2.3 各指标判断白血病合并感染的价值

各指标判断白血病合并感染ROC曲线参数见表4和图1，可见CD64表达指数判断白血病合并感染的诊断价值较好，其ROC曲线下面积为0.901（P ＜0.05），截断值为58.50时，其诊断灵敏度和特异度分别为82.40%和91.67%。

表4 各指标判断白血病合并感染的ROC曲线参数

图1 各指标判断白血病合并感染的ROC曲线图

3 讨论

儿童白血病患者因自身免疫功能较弱，化疗后对骨髓造血功能产生抑制而出现粒细胞缺乏等白细胞低下情况，继而导致感染诱发的系统性炎症反应，造成多器官功能障碍[5]。细菌感染是造成白血病患者死亡的重要原因，儿童白血病合并感染患者的早期诊断对改善患者预后、延长生命时间具有重要意义。现阶段临床常通过血常规、PCT及CRP等指标诊断细菌感染，但在特异度和灵敏度等方面均存在一定局限性；虽然血培养诊断感染价值较高，但因耗时较长、花费较高等问题，临床应用存在限制[6-7]。故而，探寻儿童白血病合并感染的早期诊断准确疗法意义重大。

感染组患者病原学结果显示共计培养分离病原菌51株，其中革兰阳性菌31株，革兰阴性菌20株，革兰阳性菌和革兰阴性菌分别以金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌为主。该结果提示儿童白血病合并感染患者常伴有金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌。

白血病患者的免疫系统分为特异性免疫和非特异性免疫，T、B和NK细胞及补体等组成了特异性免疫系统，其中T淋巴细胞最为重要，而CD4/CD8是反映机体免疫功能的重要指标[8]。CD64在淋巴细胞的表达量较为恒定，较少受到病理状态的影响，故可以作为与CD+/CD8+相关度指标[9]。本研究发现感染组CD64表达指数、PCT、CRP、hs-CRP和NEU%均明显高于非感染组和对照组（P ＜0.05）。本研究结果提示CD64表达指数、PCT、CRP、hs-CRP和NEU%均可作为儿童白血病合并感染诊断的血清学指标。

ROC曲线分析显示：CD64表达指数判断白血病合并感染的诊断价值较好，其ROC曲线下面积为0.901（P ＜0.05），截断值为58.50时，其诊断灵敏度和特异度分别为82.40%和91.67%。本研究的CD64表达指数灵敏度均高于其他指标，而特异度与PCT基本持平，说明外周血中性粒细胞表面CD64表达指数在儿童白血病合并感染早期诊断中有较好的价值，值得临床应用。CRP是目前临床上诊断感染的常用指标之一，属于急性非特异性反应炎性蛋白，但因创伤、结缔组织疾病、心肌梗死及肿瘤中均可能出现CRP升高，故该指标特异性较差[10]。PCT为降钙素的前肽，体内稳定性良好，半衰期可达30 h左右，普通人群内的PCT浓度较低，但出现细菌感染时在炎症因子和内毒素的作用下，患者PCT水平可迅速升高[11]。农贤刚[12]的研究认为NEU%敏感度高于PCT及CRP，但NEU%在运动、妊娠等生理情况及创伤、急性出血时也会快速升高，导致特异性相对较低。

CD64是免疫球蛋白G的Fc片段，属于免疫球蛋白家族，多种细胞因子可调节其表达。CD64在免疫复合物的吞噬、清除、抗原呈递及炎症介质释放中发挥重要作用，亦是连接体液免疫和细胞免疫的纽带[13]。常规条件下，中性粒细胞表面CD64的表达水平较低，但当中性粒细胞接触细胞因子和微生物细胞壁成分时，表达水平可出现上调[14]。机体出现细菌感染，CD64不仅表达升高，还可与其配体结合，启动和放大抗体依赖细胞介导的细胞毒作用、细胞因子的释放及吞噬作用等免疫反应[15]。另外，Rogina[16]的研究发现CD64具备信号传导作用，可把细胞外的信号转化至细胞内，活化细胞进而消灭细菌。最新的研究[17]显示中性粒细胞在受到外界刺激6 h内即可出现表达水平增高，与感染程度正相关，因而中性粒细胞CD64表达指数在儿童白血病合并感染的早期诊断中意义重大。

综上所述，外周血中性粒细胞表面CD64表达指数在儿童白血病合并感染早期诊断中有较好的价值，值得临床应用。