河朔荛花化学成分的研究

牛 峥, 陈玲玲, 贺文达, 麦燕随, 卜子君, 刘育坛, 陈建南*, 黄 松*

(1.东莞广州中医药大学数理工程研究院,广东 广州510006；2.广州中医药大学中药学院,广东 广州510006；3.昆明斛之梦制药有限公司,云南 昆明652200)

《中国植物志》 记载,河朔荛花为瑞香科荛花属,其花蕾称为黄芫花［1］,又名北芫花、芫蒿、矮雁皮、羊厌厌、拐拐花、老虎麻等,在我国华北、西北北部多有分布,长于山坡、路旁和草丛中,在宋代古本草《图经本草》 一书中最早记载,《本草纲目》 描述“荛者,饶也,其花繁饶也”,其花性温味辛,有小毒。河朔荛花在陕北一带多做民间用药,主治泻下逐水、通便,用于水肿胀满,痰饮积聚,咳逆喘满,急、慢性传染性肝炎,精神分裂症,癫痫等,有成本低、剂量小、副反应轻、安全等优点。该药曾载入1977 年版《中国药典》第一部［2-3］,之前大部分文献报道河朔荛花粗提物有镇静、抗早孕等功效［4-5］；从植物分类学来看,瑞香科植物有显著的生理活性,如抗菌、抗肿瘤、抗生育等；查阅文献［6］ 发现,对瑞香科荛花属植物化学成分的报道较少,故本实验对其进行了系统研究,以期为后续活性研究奠定物质基础。结果,从中分离得到20 个化合物,主要为黄酮类和木脂素类,其中化合物1 ～2、5 ～6、11 ～17、19 为首次从荛花属中分离得到,1 ～2、4 ～6、11 ～19 为首次从该植物中分离得到。

1 仪器与材料

Bruker AVANCE ⅢHD 400 型核磁共振仪器(德国布鲁克公司)； Agilent Technologies 6430 Triple Quad LC/MS、HP 1100 型高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)；YMC-Pack ODS-A 半制备反相柱、YMC-Actus ODS-A 制备反相柱(日本YMC 公司)；C18MB100-40/75 反相填料(美国Fuji Silysia化学公司)；SephadexTMLH-20 (GE Healthcare)；手提式紫外分析仪(邦西仪器科技有限公司)；EYELA 旋转蒸发仪(日本东京理化器械株式会社)。薄层硅胶板GF254和柱层析硅胶(100 ～200、200～300 目,青岛海洋化工厂)。色谱纯甲醇和乙腈(德国Merck 公司)；其余试剂均为分析纯,购于广东光华科技股份有限公司。

黄芫花购于西安药材批发市场,由广州中医药大学数理工程研究院陈建南研究员鉴定为瑞香科荛花属河蒴荛花Wikstroemia chamaedaphne Meisn.的花蕾,标本(20171001) 存放于广州中医药大学数理工程研究院。

2 提取与分离

5 kg 干燥药材研磨后,70%乙醇室温下浸泡提取3 次,每次24 h,过滤合并滤液,减压浓缩得到浸膏1.5 kg。 以温水溶解浸膏, 分别以石油醚(60～90 ℃)、二氯甲烷、乙酸乙酯萃取,得石油醚层50.0 g、 二氯甲烷层46.0 g、 乙酸乙酯层41.7 g。石油醚层色素、脂肪酸多,乙酸乙酯层成分较少,只分离得到化合物20(1.5 g)；化合物1～19 均从二氯甲烷层中分离得到。

3 结构鉴定

化合物1： 白色无定形粉末, ESI-MS m/z：371.1［M-H］-。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ：6.89 ～6.77 (6H, m, Ar-H), 5.95 (2H, s,-OCH2O-),4.72(2H, s, H-7,7′),4.24(2H,m,H-9a,9′a),3.91 (3H,s,-OCH3),3.83 ～3.89(2H,brs,H-9b,9′b),3.07(2H,m,H-8,8′)；13C-NMR(100 MHz,CDCl3) δ：148.1(C-4),147.2 (C-3), 146.8 (C-3′), 145.4 (C-4′),135.2 (C-1), 133.0 (C-1′), 119.5 (C-6),119.1 (C-6′), 114.4 (C-5′), 108.7 (C-2′),108.3(C-5),106.7 (C-2),101.2 (-OCH2O-),86.0 (C-9, 9′), 71.9 (C-7, C-7′), 56.1 (-OCH3),54.5(C-8),54.3(C-8′)。以上数据与文献［7］ 一致,故鉴定为piperitol。

化合物2：无色油状物,ESI-MS m/z：373.1［M-H］-。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ： 7.57(1H,d,J ＝1.9 Hz,H-2′),7.56(1H,dd,J ＝1.9,8.3 Hz,H-6′),7.02(1H,s,H-2),6.96(1H, d, J ＝8.3 Hz, H-5′),6.87 (1H, s, H-4),6.87(1H,s,H-6),4.67(1H,d,J ＝9.1 Hz,H-7),4.28(1H,brd,J ＝11.0 Hz,H-9′β),4.18(1H,m, H-9′α),4.18 (1H, m, H-8′),3.95 (3H, s, 3′-OCH3), 3.91 (3H, s, 3-OCH3),3.77 (1H, dd, J ＝4.4, 10.9 Hz, H-9β),3.65(1H,dd,J ＝5.6,10.9 Hz,H-9α),2.89 (1H, m, H-8)；13C-NMR (CDCl3, 100 MHz) δ： 198.1 (C-7′), 151.0 (C-4′), 147.0(C-3,3′),145.7 (C-5),132.3 (C-1),129.6(C-1′),123.6(C-6′),120.3(C-6),114.2(C-4,5′),110.3 (C-2′),109.2 (C-2,2′),83.5(C-7), 70.7 (C-9′), 61.5 (C-9), 56.2 (-OCH3,-OCH3′),52.2 (C-8),49.8 (C-8′)。 以上数据与文献［8］ 一致,故鉴定为forsythialan A。

化合物3：淡黄色粉末,ESI-MS m/z：386.4［M］+。1H-NMR(400 MHz,CD3Cl)δ：6.96(2H,s,H-2, 2′), 6.88 (2H, d, J ＝8.4 Hz, H-5,5′),6.85(2H,brd,J ＝8.4 Hz,H-6,6′),4.76(2H,d,J ＝4.1 Hz,H-7,7′),3.12(2H,brs,H-8,8′), 3.91 (2H, brs, H-9a, 9′a), 4.26(2H, brs, H-9b, 9′b), 3.88 (6H, s, 3, 3′-OCH3), 3.88 (6H, s, 4, 4′-OCH3)；13C-NMR(100 MHz,CDCl3) δ：133.6 (C-1,1′),109.3(C-2,2′),149.3(C-3,3′),148.7(C-4,4′),111.1(C-5,5′),118.3(C-6,6′),85.9(C-7,7′),71.8 (C-9,9′),56.0 (-OCH3×2), 56.0(-OCH3×2),54.1(C-8,8′)。以上数据与文献［9］ 一致,故鉴定为桉脂素。

化合物4：无色油状物,ESI-MS m/z：355.3［M+H］+。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ：3.05(2H,m,H-1,H-5),3.87(2H,dd,J ＝9.3,3.7 Hz,H-4a, H-8a),4.23(2H, dd, J ＝9.3,6.8 Hz,H-4b,H-8b),4.71(2H,d,J ＝4.4 Hz,H-2,H-6),5.95(4H,s,-OCH2O×2),6.77(2H,d,J ＝7.9 Hz,H-5′,5″),6.80(2H,dd,J ＝7.9,1.5 Hz,H-6′,6″),6.84(2H,d,J ＝1.2 Hz,H-2′,2″)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3) δ： 54.3(C-1,5),71.7(C-4,8),85.6(C-2,6),101.1(-OCH2O-),106.5 (C-20, 20′), 108.2 (C-5′,5″), 119.4 (C-6′, 6″), 135.1 (C-10′, 10″),147.1(C-4′,4″),148.0(C-3′,3″)。以上数据与文献［10］ 一致,故鉴定为芝麻素。

化 合 物5： 无 色 针 状 晶 体, ESI-MS m/z：377.5［M+1］+。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ：6.10 (1H, qq, J ＝1.3, 7.2 Hz, H-2′), 5.46(1H, brd, ddd, J ＝3.7, 7.7, 8.4 Hz, H-8),2.87(1H, d, J ＝13.8 Hz, H-6a),2.60 (2H,dd,J ＝6.4,18.5 Hz,H-2a×2),2.53(1H,brd,dd,J ＝10.4,13.8 Hz, H-6b),2.43 (1H, m,H-1),2.42(1H,dd,J ＝3.7,10.4 Hz,H-7),2.26(1H,ddd,J ＝1.3,7.7,14.6 Hz,H-9a),2.06(dd,J ＝3.4,18.5 Hz,H-2b),2.01(3H,dq,J ＝1.3,7.2 Hz,H-1),1.99(s,-COCH3),1.91(3H,q,J ＝1.3 Hz,H-4′),1.73(3H,d,J ＝2.0 Hz, H-15), 1.63 (1H, ddd, J ＝8.4,10.4,14.6 Hz, H-9b), 1.54 (3H, s, H-13),1.52(3H,s,H-12),1.03(3H,d,J ＝6.7 Hz,H-14)；13C-NMR (100 MHz, CDCl3) δ： 208.5(C-3),174.2(C-5),170.5(-CO),166.9(C-5′),138.4 (C-2′), 135.2 (C-4), 127.8 (C-3′),84.5 (C-11), 70.8 (C-8), 51.2 (C-1),46.4(C-7), 41.3 (C-2), 40.6 (C-9), 33.5(C-10),25.8 (C-6),24.6 (C-13),24.0 (C-12),22.8 (C-14),22.7 (-COCH3),20.7 (C-4′)15.9(C-1′),8.1(C-15)。以上数据与文献［11］ 一致,故鉴定为torilin。

化合物6： 无色晶体, ESI-MS m/z：367.4［M+Na］+。1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ：6.80(2H,d,J ＝8.0 Hz,H-5,5′),6.58(2H,d,J ＝8.0 Hz,H-6,6′),6.50(2H,s,H-2,2′),5.56(2H, brs, 4, 4′-OH), 3.92 (2H, m, H-9′β,9β),3.82(6H,s,3,3′-OCH3),3.53(2H,m,H-9′α,9α),2.54(4H,m,H-7,7′,8,8′)；13CNMR(100 MHz, CDCl3) δ： 146.5 (C-3, 3′),144.0(C-4,4′),132.4(C-1,1′),121.4(C-6,6′),114.2(C-5),111.2(C-2,2′),73.4(C-9,9′),55.9(3,3′-OCH3),46.6(C-8,8′),39.3(C-7,7′)。以上数据与文献［12］ 一致,故鉴定为3,4-二香草基四氢呋喃。

化合物7：无色针状结晶,ESI-MS m/z：417.3［M-H］-。1H-NMR (CDC13, 400 MHz) δ： 6.59(4H, brs, H-2, 6, 2′, 6′), 5.55 (2H, s,-OH), 4.70 (2H, brs, H-7, 7′), 4.26 (2H,brs,H-9b,9′b),3.90(14H,m,-OCH3×4,H-9a,9′a), 3.10 (2H, m, H-8, 8′)；I3C-NMR(CDCl3,100 MHz) δ：147.5(C-3,5,3′,5′),134.6(C-4,4),132.4(C-1,1′) 103.3(C-2,2′,6,6′),86.4(C-7, 7′),72.1 (C-9, 9′),56.7(-OCH3×4),54.6(C-8,8′)。以上数据与文献［13］ 一致,故鉴定为丁香脂素。

化合物8： 白色粉末, ESI-MS m/z：383.4［M+Na］+。1H-NMR(DMSO-d6,400 MHz)δ：8.76(2H,s,Ar-OH×2),6.82(1H,brs,H-2),6.74(1H,brs,H-5),6.67-6.72(3H,overlap,H-6,2′,5′),6.57(1H,d,J ＝7.58 Hz,H-6′),4.65(1H, m, H-7),3.87 (1H, brs, Ha-9′), 3.67(1H,m,Hb-9),3.55(1H,brs,Hb-9′),3.46(1H, m, Ha-9), 2.82 (1H, d, J ＝12.4 Hz,Ha-7′),2.57 (1H, brs, H-8′) 2.41 (1H, dd,J ＝12.3, 11.5 Hz, Hb-7′), 2.19 (1H, m, H-8′)；13C-NMR (DMSO-d6, 100 MHz) δ： 147.5(C-3′),147.4(C-3),145.6(C-4),144.6(C-4′),134.7 (C-1), 131.8 (C-1′), 120.6 (C-6′),118.2 (C-6), 115.4 (C-5′), 115.1 (C-5),112.7 (C-2′),109.9 (C-2),81.8 (C-7),71.9(C-9′),58.6(C-9),55.6(-OCH3×4,H-9a,9′a) 52.5 (C-8),42.0 (C-8′),32.3 (C-7′)。以上数据与文献［14］ 一致,故鉴定为落叶松脂醇。

化合物9：无色油状,EI-MS m/z：381.4［M+Na］+。1H-NMR(400 MHz,CDCl3) δ：6.85(4H,m,H-2′,5′,2″,5″),6.78(2H,d,J ＝8.3 Hz,H-6′,6″),4.72(2H,brs,H-2,6),4.22(2H,m,H-4a,8a),3.90(6H,s,-OCH3×2),3.87(2H,m,H-4b,8b),3.10(2H,m,H-1,5)；13C-NMR(100 MHz,CDCl3) δ：146.9 (C-3′,3″),145.3(C-4′,4″),132.7(C-1′,1″),119.0(C-5′,5″),114.5(C-6′,6″),108.9(C-2′,2″),85.9(C-2,6),71.6(C-4,8),56.0(-OCH3),54.2(C-1,5)。以上数据与文献 ［15］ 一致, 故鉴定为松脂素。

化合物10：淡黄色胶状物(甲醇),分子式为C26H32O11。1H-NMR(400 MHz,CD3OD) δ：7.15(1H,d,J ＝7.2 Hz,H-5),7.03(1H,brs,H-2),6.95(2H,overlap,H-2′,6),6.78 ～6.84 (2H,overlap,H-5′,6′),4.77(1H,brs,H-1″),4.71(1H,brs,H-7),4.25(2H,m,H-9a,9′a),3.89(3H,s,-OCH3),3.87(3H,s,-OCH3),3.81(2H,m,H-9b,9′b),3.14(2H,m,H-8,8′)；13C-NMR (100 MHz,CD3OD) δ：151.0 (C-3),149.1 (C-3′), 147.5 (C-4), 147.3 (C-4′),137.5 (C-1), 133.7 (C-1′), 120.1 (C-6′),119.8 (C-6), 118.0 (C-5), 116.1 (C-5′),111.6 (C-2), 110.9 (C-2′), 102.8 (C-1″),87.5(C-7), 87.1 (C-7′), 78.2 (C-3″),77.8(C-5″), 74.9 (C-2″), 72.7 (C-9), 71.3 (C-4″), 62.5 (C-6″), 56.7 (-OCH3), 56.4 (-OCH3),55.5(C-8),55.3(C-8′)。以上数据与文献［16］ 一致,故鉴定为松脂酚-4-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物11： 淡黄色固体。 EIMS m/z：288.3［M］+。1H-NMR(DMSO-d6)δ：12.14(1H,brs,5-OH), 9.05 (3H, brs, 3′, 4′, 7-OH), 6.88(1H,s,H-2′),6.74(2H, s,H-5′,6′),5.88(2H,s,H-6,8),5.37(1H, brs, H-2),3.17(1H, brs,H-3b), 2.66 (1H,brs,H-3a)；13CNMR(DMSO-d6)δ：196.3(C-4),166.6(C-7),163.6(C-5),163.5(C-8),145.7(C-4′),145.2(C-3′),129.5(C-1′),117.9(C 61),115.4(C-5′),114.4(C-2′),101.8(C-4),95.8(C-6),95.0(C-8),78.5(C-2),42.1(C-3)。以上数据与文献［17］ 一致,故鉴定为圣草酚。

化合物12：白色无定形粉末。1H-NMR (400 MHz,CDCl3) δ：12.0 (1H,s,5-OH),6.87 ～7.02(3H, m, H-2′,5′,6′),6.06 (1H, brs,H-6), 6.04 (1H, brs, H-8), 5.31 (1H, brs,H-2), 3.91 (3H, s,-OCH3), 3.79 (3H, s,-OCH3),3.10(1H,dd,J ＝17.1,12.6 Hz,H-3α)2.80(1H,dd,J ＝17.1,3.0 Hz,H-3β)；13C-NMR(100 MHz,CDCl3) δ：196.1 (C-4),168.0 (C-7′),164.1(C-5′),162.9(C-9′),146.7(C-3′),146.0 (C-4′), 131.5 (C-1′), 118.2 (C-6′),112.8(C-5′), 110.8 (C-2′), 103.2 (C-10),95.1 (C-6), 94.3 (C-8), 79.0 (C-2), 56.1(-OCH3),55.7(-OCH3),43.1(C-3)。以上数据与文献 ［18］ 一致, 故鉴定为圣草素-7,3′-二甲醚。

化合物13：白色粉末(氯仿),ESI-MS m/z：209.2［M+H］+。1H-NMR(CD3OD,400 MHz)δ：7.53(1H,d,J ＝16.0 Hz,H-7),6.97(1H,d,J ＝2.0 Hz,H-2),6.87(1H,dd,J ＝8.2,2.0 Hz,H-6),6.78(1H,d,J ＝8.2 Hz,H-5),6.25(1H,d,J ＝16.0 Hz,H-8),4.21(2H,q,J ＝7.5 Hz,H-1′),1.25(3H,t,J ＝7.1 Hz,H-2′)；13C-NMR(CD3OD,100 MHz)δ：169.3(C-9),149.6(C-4),146.8 (C-7),146.7 (C-3),127.7(C-1),122.9(C-6),116.5 (C-2),115.2 (C-8),61.4(C-1′),16.5(C-5),14.6(C-2′)。以上数据与文献［19］ 一致,故鉴定为咖啡酸乙酯。

化合物14：黄色粉末(甲醇),ESI-MS m/z：193.1 ［M-H］-。1H-NMR(400 MHz,CD3OD) δ：7.53(1H,d,J ＝15.9 Hz,H-7),7.02(1H,brs,H-2),6.93(1H,brd, J ＝8.1 Hz,H-6),6.76(1H,d,J ＝8.1 Hz,H-5),6.24(1H,d,J ＝15.9 Hz,H-8),3.74(3H,s,3-OCH3)；13C-NMR(100 MHz,CD3OD) δ： 169.9 (C-9),149.7 (C-4),147.1(C-3),146.9(C-7),127.9(C-1),123.0(C-6),116.6(C-5),115.3(C-8),115.0(C-2),52.1(3-OCH3)。以上数据与文献［20］ 一致,故鉴定为咖啡酸甲酯。

化合物15：无色油状物,ESI-MS m/z：227.2［M+H］+。1H-NMR(400 MHz, CDCl3) δ：5.84(1H,s,H-4),3.82(1H,m,H-9),2.52(1H,d,J ＝18.0 Hz,H-2a),2.22(1H, d, J ＝18.0 Hz,H-2b),2.02(3H, s,5-CH3),1.91(2H,m,H-7),1.53(2H,m,H-8),1.23(1H,d,J ＝6.2 Hz,H-10),1.09(6H,s,-CH3×2)；13CNMR(100 MHz,CDCl3)δ：198.4(C-3),168.5(C-5),126.0(C-4),77.9(C-6),68.7(C-9),50.1(C-2),41.9(C-1),33.5(C-7),33.4(C-8), 24.0 (1-CH3), 23.9 (1-CH3), 23.7 (9-CH3),21.2(5-CH3)。以上数据与文献［21］ 一致,故鉴定为blumenol B。

化合物16：黄色结晶性粉末(丙酮),ESI-MS m/z：179.1［M+H］+。1H-NMR(400 MHz,DMSOd6)δ：12.71(1H,brs,5-OH),10.89(1H,brs,7-OH),8.19 (1H,brs, H-2),6.37(1H, brs,H-8),6.28(1H,brs,H-3),6.20(1H,brs,H-6)；13C-NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ：181.3(C-4),164.4(C-7),161.6 (C-5),157.8(C-9),157.5(C-2),110.5(C-3),104.9(C-10),99.4(C-6),94.0(C-8)。以上数据与文献［22］ 一致,故鉴定为5,7-二羟基色原酮。

化合物17： 黄色结晶, ESI-MS m/z：193.1［M+H］+。1H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ：12.55(1H, s, 5-OH), 7.72 (1H, brs, H-2), 6.36(1H,d, J ＝2.3 Hz, H-8),6.34(1H, d, J ＝2.3 Hz, H-6), 6.19 (1H, brs, H-3), 3.83(3H,s,7-OCH3)；13C-NMR(100 MHz,CDCl3)δ：182.0 (C-4), 165.7 (C-7), 162.4 (C-5),158.2(C-9),155.8(C-2),111.5(C-3),106.7(C-10), 98.3 (C-6), 92.8 (C-8), 55.9 (7-OCH3)。以上数据与文献［23］ 一致,故鉴定为5-羟基-7-甲氧基色原酮。

化合物18：黄色结晶(甲醇)。ESI-MS m/z：273.3［M+H］+。H-NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ：12.18 (1H,s,5-OH),10.78 (1H,brs,7-OH),9.58 (1H,brs,4′-OH),7.31 (2H,brs,H-2′,6′),6.79(2H,brs,H-3′,5′),5.81(2H,s,H-6,8),5.42(1H,dd,J ＝12.8,2.8 Hz,H-2),3.23 (1H,dd, J ＝17.2,12.8 Hz, H-3a),2.67(1H,dd,J ＝17.2,2.8 Hz,H-3b)；13C-NMR(100 MHz, DMSO-d6) δ： 195.7 (C-4), 166.6(C-7),163.8 (C-5),162.9(C-9),157.5 (C-4′),128.3(C-1′),128.3(C-2′,6′),115.3(C-3′,5′),101.3 (C-10),96.0 (C-6),95.1 (C-8),78.2(C-2),41.6(C-3)。以上数据与文献［24］ 一致,故鉴定为柚皮素。

化合 物19： 白 色 针 状 结 晶。 ESI-MS m/z：193.2［M+H］+。1H-NMR (DMSO-d6,400 MHz)δ：9.95 (1H, brs,4-OH),7.57 (1H, d, J ＝16.0 Hz,H-7),7.55(2H,d,J ＝8.5 Hz,H-2,6),6.79 (2H, d, J ＝8.5 Hz, H-3,5),6.38(1H,d,J ＝16.0 Hz,H-8),4.16(2H,q,J ＝7.0 Hz, H-1′), 1.24 (3H,t, J ＝7.0 Hz, H-2′)；13C-NMR(DMSO-d6,100 MHz)δ：166.6(C-9),159.9(C-4),144.6(C-7),130.3, (C-6),125.0(C-1),115.8(C-3),114.2(C-8),59.7(C-1′),14.2(C-2′)。以上数据与文献［25］ 一致,故鉴定为反式对羟基肉桂酸乙酯。

化合物20： 黄色粉末, ESI-MS m/z：286.2［M］+。1H-NMR(400 MHz,C5D5N)δ：13.82(1H,s,5-OH),7.93(1H,brs,H-2′),7.56(1H,d,J ＝8.3 Hz,H-6′),7.31(1H,d,J ＝8.3 Hz,H-5′),6.95(1H,s,H-3),6.75(2H,s,H-6,8)；13C-NMR(100 MHz, C5D5N) δ：183.1(C-4),166.2(C-7),165.2(C-2),163.5(C-9),158.8(C-5),150.6(C-3′),148.1(C-4′),123.3(C-6′),119.9(C-1′),117.2(C-5′),115.0(C-2′),105.3(C-10),104.3(C-3),100.3(C-6),95.1(C-8)。以上数据与文献［26］ 一致,故鉴定为木犀草素。