糖尿病肾病患者血清25羟维生素D3水平变化及与TNF-α、IL-6关系分析

左湘川，胡淑芳，荣太梓

(1. 江汉大学文理学院，湖北 武汉 430000；2. 湖北省武汉市汉口医院，湖北 武汉 430000)

糖尿病肾病为糖尿病患者微血管并发症之一，是造成终末期肾脏病的主要原因。糖尿病肾病初始临床特征为肾小管上皮细胞及肾小球肥大，肾小管基底膜一定程度增厚，随病情进展可出现高滤过以及微量白蛋白尿，进而出现蛋白尿、肾小管间质纤维化以及肾小球硬化等，最终造成终末期肾脏病[1-2]。糖尿病肾病发病机制尚未完全明确，与氧化应激、炎症反应、细胞因子、血流动力学异常改变以及遗传易感性有关[3]。近年来的相关研究指出，对于胰岛细胞，维生素D具有一定保护作用，维生素D浓度降低可能是造成机体糖耐量异常以及糖尿病及其并发症发生发展的重要原因[4]。25羟维生素D3[25-(OH)D3]反映了体内活性维生素D的含量，通过测定25-(OH)D3值可以了解机体维生素D水平[5]。本研究分析了糖尿病肾病患者血清25-(OH)D3水平变化情况及其与肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、肾功能的关系，旨在为2型糖尿病肾病早期监控及严重程度评估提供参考依据，现报道如下。

1 临床资料

1.1一般资料 收集2015年1月—2017年8月武汉市汉口医院收治的2型糖尿病患者106例(病例组)，均符合《中国2型糖尿病防治指南(2010年版)》[6]中的诊断标准。入选标准：①患者血压正常，即<140/90 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)；②无肾动脉狭窄；③入组前1个月内未使用过明显影响肾功能的药物或者肾毒性药物；④均为原发性2型糖尿病。排除标准：①存在高钾血症、原发性肾小球肾炎、糖尿病酮症及尿路梗阻者或者其他原发、继发肾脏疾病者；②心、肝功能异常者；③合并感染、过敏、白血病或恶性肿瘤者；④其他原因导致的肾脏疾病者。根据106例患者的尿蛋白排泄率(UAER)分为单纯糖尿病组(UAER<20 μg/min)、早期糖尿病肾病组(UAER 20～200 μg/min)、临床期糖尿病肾病组(UAER>200 μg/min)。糖尿病组34例，男19例，女15例；年龄39～78(52.86±9.61)岁。早期糖尿病肾病组37例，男23例，女14例；年龄37～76(53.04±9.78)岁。临床期糖尿病肾病组35例，男19例，女16例；年龄36～78(52.49±9.83)岁。另选取健康体检者35例作为对照组，血糖、血压、血脂、心肝肾功能、血常规等均正常，其中男20例，女15例；年龄35～79(53.29±10.16)岁。4组受试者年龄、性别比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。

1.2方法 于入院第2天清晨抽取空腹静脉血5mL，对照组于体检之前采血，行EDTA抗凝，以3 500 r/min离心，离心5 min后提取血清，放置于-20 ℃冰箱中保存待检；通过日立7170A型全自动生化分析仪检测血尿素氮(BUN)、血肌酐(SCr)；通过酶联免疫吸附法检测TNF-α、IL-6水平，通过放射免疫法检测UAER，检测试剂盒由北京北大维信生物科技有限公司生产，严格按照说明书进行检测；通过电化学发光免疫法测定25-(OH)D3值，瑞士罗氏公司生产的Cobas8000E602型全自动电化学发光免疫分析仪，配套试剂购自罗氏公司，严格按照试剂盒说明书进行操作。

2 结 果

2.1病例组与对照组血清25-(OH)D3、TNF-α、IL-6及肾功能指标比较 病例组血清TNF-α、IL-6、SCr、BUN及UAER均明显高于对照组(P均<0.05)，血清25-(OH)D3明显低于对照组(P<0.05)。见表1。

2.2患者组间血清25-(OH)D3、TNF-α、IL-6及肾功能指标比较 早期糖尿病肾病组、临床期糖尿病肾病组血清TNF-α、IL-6、SCr、BUN均明显高于单纯糖尿病组(P均<0.05)，血清25-(OH)D3均明显低于单纯糖尿病组(P均<0.05)；临床期糖尿病肾病组血清TNF-α、IL-6、SCr、BUN均明显高于早期糖尿病肾病组(P均<0.05)，血清25-(OH)D3明显低于早期糖尿病肾病组(P<0.05)。见表2。

表1 病例组与对照组血清25-(OH)D3、TNF-α、IL-6及肾功能指标比较

2.325-(OH)D3与TNF-α、IL-6及肾功能指标相关性分析 Pearson相关分析结果显示，25-(OH)D3与TNF-α、IL-6及肾功能指标均呈显著负相关性(r<0，P均<0.05)。见表3。

2.42型糖尿病肾病多因素Logistic回归分析 将2型糖尿病肾病作为因变量，将TNF-α、IL-6、25-(OH)D3作为自变量，进行多因素Logistic回归分析，结果显示，TNF-α、IL-6、25-(OH)D3为2型糖尿病肾病发生的影响因素(P均<0.05)。见表4。

3 讨 论

临床研究显示，大约35%的2型糖尿病患者会发生糖尿病肾病，且随病程延长呈进行性发展，约有70%的2型糖尿病肾病患者会在15～20年内发展为终末期肾病[7]。目前，UAER值为糖尿病肾病患者病情分期的主要标准，不过近年来亦有学者通过尿白蛋白/尿肌酐的比值对2型糖尿病早期肾脏损伤进行评估，具有一定临床价值。2型糖尿病肾病发病机制比较复杂，目前对于该病发病机制临床尚不够明确。

表2 不同病情糖尿病患者血清25-(OH)D3、TNF-α、IL-6及肾功能指标比较

注：①与单纯糖尿病组比较，P<0.05；②与早期糖尿病肾病组比较，P<0.05。

表3 25-(OH)D3与TNF-α、IL-6及肾功能指标相关性分析

表4 2型糖尿病肾病多因素Logistic回归分析

临床研究指出，凝血功能障碍、炎症反应、免疫功能紊乱等在糖尿病肾病的发生及病理损害过程中起到了重要作用[8]。免疫功能紊乱会造成肾脏内炎症细胞的浸润，增加了多种炎症因子的分泌，促使肾脏固有的细胞尤其系膜细胞增生的发生，使得肾内微血管和固有细胞受到损害，造成凝血障碍，进而引起细胞外基质聚积，最终造成肾间质纤维化和肾小球硬化。人体内部有许多种细胞能够分泌TNF-α，肾脏的固有细胞也可以分泌TNF-α，而TNF-α能够对肾小管的内皮细胞造成损害，导致细胞外基质的分泌增多和沉积，并减少细胞外基质的降解，导致肾间质纤维化[9]。IL-6为有多种生物活性的炎症细胞因子，高水平的IL-6可促进肾小球系膜细胞增殖，从而导致细胞外基质合成增加和聚积[10]。因此，减轻2型糖尿病肾病患者体内炎症反应，促进细胞外基质的降解，并抑制其聚积，对改善患者肾脏病理损害具有重要意义。

维生素D对促进人体的骨骼生长发育具有重要作用，维生素D不足或者缺乏会导致骨骼生长发育缓慢或者异常；还可能导致慢性肝病、慢性肾病、慢性阻塞性肺疾病等慢性疾病的发生[11-12]。近年来的研究指出，慢性炎症反应以及维生素D缺乏共同参与了2型糖尿病以及2型糖尿病肾病发生过程[13]。25-(OH)D3为维生素D代谢中间产物，血中稳定性好，半衰期长，为评估维生素D的有效指标。本研究中，2型糖尿病患者血清25-(OH)D3水平明显低于健康人群；而且不同病情程度患者之间血清25-(OH)D3水平存在明显差异，临床期糖尿病肾病患者血清25-(OH)D3均明显低于早期糖尿病肾病和单纯糖尿病患者，提示25-(OH)D3在2型糖尿病肾病发生及发展过程中起到了重要促进作用。

本研究中，通过对IL-6和TNF-α的研究发现，2型糖尿病患者血清IL-6和TNF-α水平均明显高于健康人群，而且临床期糖尿病肾病患者血清IL-6和TNF-α水平均明显高于早期糖尿病肾病患者和单纯糖尿病患者；通过相关性分析发现，IL-6和TNF-α均与25-(OH)D3呈显著负相关；多因素Logistic回归分析结果显示，TNF-α、IL-6、25-(OH)D3为2型糖尿病肾病发生的影响因素。研究结果提示，维生素D缺乏通过对IL-6和TNF-α等相关炎性因子的影响作用于2型糖尿病患者的肾脏，进而影响患者肾脏出现病理改变，最终导致肾脏损害的发生。近年来研究显示，在2型糖尿病肾病患者治疗中加用维生素D具有一定疗效，通过补充维生素D，可降低24 h尿蛋白定量以及超敏C反应蛋白、高密度脂蛋白水平[14-16]。亦有研究指出，1,25二羟维生素D3可抑制TNF-α、IL-1等炎性因子分泌，减轻肾小球损害，进而保护患者肾功能[17-18]。因此，监测血清25-(OH)D3水平对于2型糖尿病肾病患者防治具有重要意义。

综上所述，2型糖尿病肾病患者血清炎性因子水平明显升高，血清25-(OH)D3明显降低，且与炎症反应及肾功能密切相关，可作为2型糖尿病患者肾脏损害早期检查以及病情严重程度评估的重要指标。在随后的研究中，应积极开展大样本多中心研究，进一步研究证实。