藏药八味沉香散的有效成分及药理作用研究进展

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1.青海大学生态环境工程学院，青海 西宁 810016；2.青海大学医学院，青海 西宁 810001；3.三江源生态与高原农牧业国家重点实验室，青海 西宁 810016

藏医药已有2000多年历史，是在广泛吸收、融合了中医药学、印度医药学和大食医药学等理论的基础上，通过长期实践所形成的独特的医药体系，也是我国理论体系完整、使用地域广泛、使用人群最多的代表性的民族医药学之一[1-3]。八味沉香散收载于《中国药典》2015年版一部，本品系藏族验方。作为藏区临床应用广泛的藏成药之一八味沉香散气芳香，味咸、涩、微苦，具有活血止痛，清心热，养心，安神，开窍的功效，是治疗热病攻心，神昏谵语，冠心病，心绞痛的藏成药[4]。近年来国内学者不断研究八味沉香散的心肌缺血等药理作用并取得一定成果。

1 八味沉香散组成药物的有效成分分析

八味沉香散作为传统藏药复方,由沉香、肉豆蔻、广枣、木香、乳香、诃子、木棉花、石灰华等 8种单味药组成,其有效成分将通过其单味药的进行分析。

1.1 沉香有效成分 沉香是传统天然香料和名贵中药材，也是八味沉香散的主要单味药。熊礼燕等[5]发现，使用沉香挥发油预处理PC12细胞可以降低细胞内活性氧水平，显著增强细胞内抗氧化酶的活力，使脂质过氧化标记物MDA合成减少。有研究证实，沉香挥发油是通过增强细胞中抗氧化酶的活性来保护细胞免受氧化损伤，从而起到保护细胞的作用。如Dahham等[6]从沉香精油中提取出的β-石竹烯也具有抗氧化活性。Chen等[7]从沉香中分离鉴定了11个2-(2-苯乙基)色酮类化合物都具有一定的抗炎活性。Guo R等[8]研究表明，2-(2-苯乙基)色酮类化合物可以显著抑制诱导型的一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase，iNOS)的基因转录、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor，TNF)α以及白细胞介素(interleukin，IL)6的分泌，显著抑制核转录因子kappa B(nuclear transcription factor kappa B，NF-κB) p65的过度活化和STAT1/3的磷酸化。

1.2 肉豆蔻有效成分 肉豆蔻的主要成分为挥发油、木脂素和苯丙素等, 具有抗氧化、抗炎、促进血液循环等作用；肉豆蔻中的榄香素、肉豆蔻醚可有效治疗心脏病,蒙古族与藏族验方中经常可见肉豆蔻来治疗心血管系统疾病。研究发现连续给小鼠灌胃肉豆蔻挥发油10 d，能提高小鼠肝细胞中细胞色素P450含量，并且使得细胞色素B5及血清中GST的含量显著增加[9]。MURAKAMI Y等[10]研究发现肉豆蔻中的木脂素类成分能够强烈抑制环氧合酶(COX)-2的基因表达以及LPS刺激的核因子κB(NF-κB)活化，证明了其是抑制脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞中炎症因子的有效制剂。张子英等[11]研究发现肉豆蔻挥发油对心律失常也有一定的治疗作用，肉豆蔻可以能减慢小鼠心率、延长Q-T间期。

1.3 木香有效成分 木香主要的活性成分是挥发油，其中的木香内酯、去氢木香内酯等具有抗炎、降压、扩血管和抑制血小板聚集的作用；去氢木香内酯能使核转录因子(NF-κB)失活而抑制诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因的表达，进而使NO产生减少，对脂多糖(LPS)诱导的TNF-α水平也有所降低[12]；木香烃内酯既能抑制NO产生，还能降低AP-1蛋白的DNA 结合活性和MAPKs蛋白激酶的活化，从而抑制IL-1β基因的表达[13]。木香对心血管系统也有一定作用，其作用分为抗血液凝集和降血压两方面。木香提取物中还含有降压和扩张血管的成分，包括去内酯油、总内酯、生物碱、木香内酯、二氢木香内酯、去氢木香内酯和12-甲氧基二氢木香烃内酯等[14]； 石小燕等[15]研究发现木香烃内酯能够抑制NF-κB蛋白和基因的表达,激活Caspase-3蛋白和Caspase-9蛋白从而诱导卵巢癌细胞的凋亡。

1.4 乳香有效成分 乳香的主要成分为萜类和挥发油，具有抗炎和抗氧化的作用。11-羰基-β-乙酰乳香酸(AKBK)是乳香中作用最强的单体之一，AKBA能够抑制高血压所致的TNF-α和MCP-1炎症因子上调，从而恢复超氧化物岐化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)的生物活性,同时还能有效改善高血压过程中NO和Ang II的异常分泌, 使其恢复到正常水平[16]。研究发现， AKBK与三氧化二砷配伍能抑制肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素18的分泌[17]。研究表明乳香提取物对佐剂诱导的大鼠关节炎有显著疗效，其抗炎作用机制可能是抑制促炎症反应细胞活素类的生成有关[18]。对乳香提取物临床前的研究发现，其能减轻膝关节炎患者的疼痛，增强骨关节的屈伸[19]。

1.5 广枣有效成分 广枣的主要成分为酚酸类、黄酮类、小分子有机酸类和多糖等，其中黄酮、酚酸和小分子有机酸是广枣抗心肌缺血再灌注损伤的药效物质基础；实验证实广枣有机酸、酚酸和黄酮均可以通过激活蛋白激酶B的磷酸化而抑制心肌细胞的凋亡,对心肌细胞缺氧复氧损伤和心肌缺血再灌注损伤有直接保护作用且可以缩小心肌梗死的范围 , 减轻心肌缺血的损伤程度[20-22]。广枣提取物能有效的清除和抑制氧自由基。实验证明广枣总黄酮能对抗阴离子氧和羟自由基对血红蛋白的氧化，此对抗程度呈现剂量依赖性[23]；且广枣总黄酮可使缺氧的离体大鼠心肌收缩力增强并对缺氧所导致的心率减慢呈现明显的对抗作用[24]。

1.6 诃子有效成分 诃子在我国民间用药较广泛，在藏药中有“药中之王”之称。诃子化学成分丰富，主要含鞣质类、酚酸类、三萜类、黄酮类、挥发油等。诃子醇提物、水提物、乙酸乙酯萃取物都具有比较强的抗氧化活性[25]。有研究表明，诃子的水-甲醇提取物能够显著增加草酸钠诱导的大鼠肾氧化失衡模型体内的SOD、总还原性谷胱甘肽(GSH) 、过氧化氢酶(CAT)含量，进而降低草酸引起的脂质过氧化[26]。诃子中的没食子酸，可清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)自由基，具有一定抗氧化活性[27]。李建良等[28]通过推测诃子抗草乌心脏毒性的靶点通路, 发现诃子能够多途径、多通路缓解草乌造成的心律不齐和心脏毒性，调节心肌细胞的舒张和收缩,从而进一步保护心脏的正常功能。诃子醇提物对心房肌的作用类似于强心苷，可使窦房结心房肌肌收缩功能加强，频率增快, 收缩幅度变大,显示正性肌力作用[29]。

1.7 木棉花有效成分 木棉花的主要成分为多糖、花青素、黄酮及脂肪酸等。木棉花总黄酮能显著降低高脂血症大鼠血清中总胆固醇(TG)、甘油三酯(TC)、低密度脂蛋白(LDL)的含量，升高高密度脂蛋白(HDL)的含量[30]并且对小鼠免疫性肝损伤也具有保护作用[31]。刘金泳等[32]采用二甲苯和醋酸作为小鼠的致炎和致痛因子，观察到木棉花水提取物对二甲苯致耳廓肿胀的抑制率呈现剂量依赖性；在醋酸致小鼠扭体反应的影响实验中，木棉花水提取物能有效地减少小鼠的扭体次数。证明了木棉花水提取液具有一定的抗炎镇痛效果。

综上，藏药八味沉香散其单味药的主要化学成分为黄酮类、脂肪酸类、酚酸类和萜类等，其中既含有挥发性成分，也含有非挥发性成分，大多具有一定抗氧化和抗炎作用。

2 八味沉香散的药理作用

2.1 八味沉香散对高原低氧环境所致疾病的影响 高原具有低氧的环境特点，机体对低氧应激反应异常是导致各种高原适应不全和急性高原疾病的重要原因。长期处于高原低氧环境中会引起严重疾病,其中包括心血管方面的疾病、脑缺氧等。

2.1.1 八味沉香散的抗心肌缺血作用和保护心功能作用 低氧环境引起的心血管疾病其中心肌缺血、缺氧是这些疾病中最严重的。李永芳等[33-34]研究发现八味沉香散能降低由异丙肾上腺素引起的乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)水平；而八味沉香散水提液可改善垂体后叶素致心肌缺血大鼠的心脏收缩及舒张功能。陈宏等[35]表明八味沉香散50%醇提液能明显改善垂体后叶素致急性心率加快，对垂体后叶素所致大鼠急性心肌缺血具有一定的保护作用。推测藏药八味沉香散可能通过以下几种方式发挥作用：①药物通过减慢心率来改善心肌缺血。②通过降低血清中CK和LDH水平，阻断脂质过氧化来改善心肌缺血。③改善心室舒缩性从而改善心肌缺血。④通过保护心脏超微结构改善心肌缺血。

2.1.2 八味沉香散对低氧大鼠学习记忆的改善 张昱等[36]通过低氧大鼠MORRIS水迷宫测试及海马CA3区测量，表明八味沉香散促进了低氧大鼠海马CA3区正常突触形态结构的稳定，对大鼠的空间学习记忆能力有一定保护作用。研究表明八味沉香散可能通过对低氧环境下脑组织的抗缺氧作用来发挥保护学习记忆能力。

2.2 八味沉香散对心肌缺血再灌注损伤的影响 缺血再灌注所引起的组织损伤致死性疾病其主要原因，并不是缺血本身，当恢复心肌血液供应后，缺血心肌虽然得以恢复正常灌注，但过量的自由基冲击重新获得血液供应的组织内的细胞从而加重或造成心脏损伤。

2.2.1 八味沉香散对脑缺血再灌注的影响 杨春燕等[37]研究发现八味沉香散可以提高大鼠血清SOD水平，降低大鼠血清MDA水平；且可以使大鼠Caspase-3基因表达显著减弱。表明八味沉香散对脑缺血再灌注损伤有一定保护作用。

2.2.2 八味沉香散对肾缺血再灌注的影响 肾缺血再灌注损伤是导致缺血性急性肾功能衰竭的主要原因之一，朱艳梅等[38]研究发现八味沉香散对SOD和谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)的活性有一定的保护作用，从而延长体内NO的半衰期，有利于维持肾血流和肾氧供。表明八味沉香散在肾缺血再灌注损伤中具有抗氧化作用，此保护作用可能和其保护抗氧化酶的活性、提高机体的抗氧化能力以及抑制体内的脂质过氧化反应有关。

3 小结与展望

藏药作为我国传统药学的重要组成部分，有着较高的应用基础和悠久的历史，并且对心绞痛、高血压、脑溢血、萎缩性胃炎等疑难杂症有独特的疗效。其中八味沉香散对于解决高原地区长期缺氧引起的心血管系统疾病有着重要的意义，同时也存在着需要进一步研究与讨论的问题。一是藏药复方是藏药用药的主要形式, 药效物质基础及作用机制是藏药复方研究的核心, 药效物质基础及机制不明确直接影响藏药质量标准的建立，缺乏可靠的药理学、毒理学研究数据，使藏药的推广应用受到限制。二是八味沉香散作为一种藏药复方，其抗缺血作用已从多个方面得到证实，该药作为有效的抗缺血、缺氧的传统藏药，但其抗心肌缺血损伤的药效物质基础及作用机制尚不清楚。三是八味沉香散的传统使用说明中表明使用不同溶剂(牛奶、水、酒)溶解饮用后，所达到的药理作用效果是不一样的，但是关于溶剂与药理作用之间的关系尚待商榷。四是八味沉香散对心肌缺血的保护作用已得到证实，但其是否对心肌缺血再灌注损伤也有保护作用尚不了解；如有保护作用，其作用是否是通过PI3K/Akt信号通路调控氧化应激、炎症反应和细胞调亡而发挥的。五是八味沉香散的研究热点一直在心肌保护方面，但是藏药的运用过程中，很多传统藏族遵循搭配用药，这可以使得八味沉香散与其他藏药的协同作用导致其作用于其他脏器，因此，八味沉香散在其他脏器所发挥的作用还有待进一步研究。