MMP-1、MMP-13及TIMP-1联合检测在下肢静脉曲张血管中的表达及价值

葛明广

（临沂市精神卫生中心检验科，山东临沂 276000）

在曲张静脉中的细胞外基质以及平滑肌细胞等等出现结构的改变，则称之为下肢静脉曲张血管重塑，这是情况通常是因各种病理状态而使得静脉壁采取补偿所引起的[1-2]。在人体内基质金属蛋白酶（MMPs）以及内源性抑制剂基质金属蛋白酶组织抑制剂（TIMPs）能够共同协调的将所有细胞外基质成分降解掉[3]。因此，可以推测出在人体内TIMPs/MMPs系统能够在静脉曲张血管重塑中起着非常重要的作用[4]。目前已经清楚MMP-1能够有效地降解Ⅰ型胶原三螺旋结构，MMP-13能够有效地降解Ⅲ型胶原三螺旋结构[5]。该研究检测在该院（2016年1月—2017年4月）接受治疗的下肢静脉曲张患者的TIMP-1、MMP-1以及MMP-13，并研究TIMPs/MMPs系统在治疗静脉曲张的作用，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选择在该院接受治疗的下肢静脉曲张患者（40例）为研究对象，这些患者中男女比例为1∶1（男性20例女性20例），患者年龄均在25～65岁之间，平均年龄为（39.7±3.2）岁。另外还有因外伤所造成截肢者或者静脉作供体移植的患者作为对照组 （共有20例），且无血管疾病，这些患者中男女比例为1∶1（男性10例，女性10例），年龄均在23～62岁之间，平均年龄为（37.4±2.7）岁。两组患者的一般资料对比差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

采用的检测方法是免疫组化检测法，所用的试剂有DAB显色剂、兔抗人MMP-1多克隆抗体 BA0568、通用型SP-9000试剂盒以及抗人MMP-13多克隆抗体 BA0574。首先将组织切片再用PBS冲洗，再加非特异性动物血清温室孵育10 min，再加第一抗体[TIMP-1(即用型)、MMP-1（1∶150）以及 MMP-13（1∶150）]，培育过夜后用PBS冲洗，加入2滴DAB溶液，在显微镜下观察效果较为满意后用水冲洗。

1.3 结果判定

阳性对照选择的是结肠腺癌切片，阴性对照组选择的是PBS。当细胞质被染成棕黄色均匀颗粒时确定为阳性染色，计算在十个高倍视野下的阳性细胞数，将等级分为四个 （当大于75%时定义为+++，当大于50%小于75%时定义为++，当大于25%小于50%时定义为+，当不大于25%时定义为-）。

1.4 统计方法

对数据进行处理和分析采用SPSS 19.0统计学软件计数资料采用百分率（%）表示，采用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 MMP-1表达强度对比

通过对比曲张静脉萎缩组、正常大隐静脉以及曲张静脉肥大组的阳性率以及MMP-1表达强度发现，曲张静脉萎缩组以及肥大组的MMP-1强度和阳性率较正常组均有较大的提高，并且对比差异有统计学意义（P＜0.05），详细情况见表1。

表1 曲张静脉萎缩组、正常大隐静脉以及曲张静脉肥大组的阳性率以及MMP-1表达强度对比

2.2 MMP-13表达强度对比

通过对比曲张静脉萎缩组、正常大隐静脉以及曲张静脉肥大组的阳性率和MMP-13表达强度发现，曲张静脉萎缩组以及肥大组的MMP-13强度和阳性率较正常组均有较大的提高，并且对比差异有统计学意义（P＜0.05），详细情况见表2。

表2 对比曲张静脉萎缩组、正常大隐静脉以及曲张静脉肥大组的阳性率和MMP-13表达强度

2.3 TIMP-1表达强度对比

通过对比曲张静脉萎缩组、正常大隐静脉以及曲张静脉肥大组的阳性率和TIMP-1表达强度发现，曲张静脉萎缩组以及肥大组的TIMP-1强度和阳性率较正常组均有较大的提高，并且对比差异有统计学意义（P＜0.05），详细情况见表3。

3 讨论

在曲张静脉中会出现细胞外基质以及平滑肌细胞等主要成分出现结构上的改变的现象称为下肢静脉曲张血管重塑，这种现象是静脉壁为了适应各种各样的病理状态所采取的补偿措施所引起的。组织形态的塑形以及形态发生改变主要是由细胞外基质的更新所引起的。MMPs是一种依赖Ca2+和Zn2+的一种酶，这种酶在人体中起着清除细胞外基质的作用，这种酶通常与内源性抑制剂TIMPs共同参与细胞外基质的代谢[5]。通过对曲张静脉管壁中MMPs含量改变的监测能够间接地了解到细胞外基质的重塑，进而对疾病的发展情况进行全面的了解。

表3 对比曲张静脉萎缩组、正常大隐静脉以及曲张静脉肥大组的阳性率和TIMP-1表达强度

该研究通过对比曲张静脉萎缩组、正常大隐静脉以及曲张静脉肥大组的阳性率以及MMP-1表达强度发现，曲张静脉萎缩组以及肥大组的MMP-1强度和阳性率均有较大的提高，并且对比差异有统计学意义（P＜0.05）；通过对比曲张静脉萎缩组、正常大隐静脉以及曲张静脉肥大组的阳性率和MMP-13表达强度发现，曲张静脉萎缩组以及肥大组的MMP-13强度和阳性率均有较大的提高，并且对比差异有统计学意义（P＜0.05）；通过对比曲张静脉萎缩组、正常大隐静脉以及曲张静脉肥大组的阳性率和TIMP-1表达强度发现，曲张静脉萎缩组以及肥大组的TIMP-1强度和阳性率均有较大的提高，并且对比差异有统计学意义（P＜0.05）。

综上所述，对下肢静脉曲张血管中的TIMP-1、MMP-1以及MMP-13进行联合检测具有良好的监测效果，值得推广。