红豆树茎枝中黄酮类成分及其抑菌活性研究

邱亚铁，石 妍，徐会有，倪 林,*，陈启建，何碧珠，卢海啸

1福建农林大学植物保护学院，福州 350002；2玉林师范学院 广西农产资源化学与生物技术重点实验室，玉林 537000； 3福建农林大学 自然生物资源保育利用福建省高校工程研究中心，福州 350002

红豆树(Ormosiahosiei)隶属于豆科(Leguminosae)红豆属(Ormosia)，又称鄂西红豆树[1]，主要分布在福建、浙江、江苏等地区，是国家Ⅱ级重点保护树种，具有较高的药用价值。其根、枝、叶和种子均可入药，具有理气、通经等功效，可用于治疗疝气、腹痛、血滞经闭等症状[2]。文献研究发现，红豆树的药用价值开发与利用几乎未见报道，化学成分研究方面仅报道了4个生物碱类成分[3]。

本课题组前期发现，红豆树枝条提取物对禾谷镰刀菌(Fusariumgraminearum)、西瓜尖镰孢菌(Fusariumoxysporumf)、茄病镰刀菌(Fusariumsolani)3种植物病原真菌有较好的抑制活性。为深入研究抑菌活性物质，我们对红豆树枝条提取物进行了系统的化学成分研究，并从中分离得到了16个黄酮类化合物，分别鉴定为圆荚草双糖苷(Sphaerobioside，1)、5,7-二羟基-4′-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷(sissotrin，2)、4′,8-二甲氧基-7-O-β-D-葡萄糖基异黄酮(4′,8-dimethoxyl-7-O-β-D-glucopyranosyl isoflavone，3)、芒柄花苷(ononin，4)、异樱黄素-7-O-β-D-葡萄糖苷(isoprunetin-7-O-β-D-glucoside，5)、芦丁(rutin，6)、山奈酚-3-O-β-D-芸香糖苷(kaempferol-3-O-β-D-rutinoside，7)、4′-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-木糖(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(Kushenol O，8)、4′-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-芹糖(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7-hydroxy-4′-methoxylisoflavone-7-O-β-D-apiofuranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranoside，9)、染料木素(genistein，10)、异樱黄素(isoprunetin，11)、2′,4′,5,7-四羟基异黄酮(2′,4′,5,7-tetrahydroxyisoflavone，12)、大豆素(daidzein，13)、柚皮素(naringenin，14)、二氢染料木素(dihydrogenistein，15)、去甲基化美迪紫檀素(demethylmedicarpin，16)，并对部分含量较大的化合物采用生长速率法进行抑菌活性评价。化合物1～16均为首次从该植物中分离得到，其中化合物1、3、4、6～9、12、15、16为首次从红豆属中分离得到。抑菌活性测试显示，化合物2、5和14对F.graminearum、F.oxysporumf、F.solani有较好的抑制作用。这将为红豆树后续的植物资源的开发与利用提供参考。

1 仪器与材料

1.1 仪器

ZF-5手提式紫外分析仪(上海嘉鹏科技有限公司)；TQ-400Y高速多功能粉碎机(永康市天祺盛世工贸有限公司)；BS-100A自动部份收集器(上海沪西分析仪器厂有限公司)；BS-214D电子天平(赛多利斯科学仪器北京有限公司)；LC-20AP制备型高效液相色谱仪(日本岛津有限公司)；waters-2695-QDA高效液相色谱-质谱联用仪(美国沃特世科技有限公司)；Buchi Rotavapor Essential旋转蒸发仪系列(瑞士步琦公司)；HX-1050恒温循环器(北京博医康实验仪器有限公司)；Bruker AV-400III型核磁共振仪(德国布鲁克公司)。

1.2 材料

GF254薄层层析硅胶及柱色谱用硅胶(青岛海洋化工有限公司)；D101大孔吸附树脂、Sephadex LH-20凝胶(美国通用电气公司)；YMC-Pack ODS-A反相色谱柱(250 mm×20 mm，5 μm)，日本YMC公司；Diamonsil C18分析型反相色谱柱(150 mm×4.6 mm，5 μm)，北京迪马科技有限公司；SilGreen ODS制备型色谱柱(250 mm×10 mm，5μm)，北京绿百草科技发展有限公司；常用有机试剂甲醇、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯等均为分析纯(国药集团化学试剂有限公司)；HPLC用色谱纯甲醇、乙腈(默克公司)。

红豆树枝条采自福建省福州市晋安区北峰村，经福建农林大学林学院邹小兴副教授鉴定为红豆树Ormosiahosiei枝条。

2 提取与分离

取干燥红豆树枝条12.5 kg，经粉碎机粉碎至粗粉，用125 L的70%乙醇加热回流提取2次，每次3 h，滤过，合并提取液，减压浓缩，得粗提取物浸膏1.2 kg。加入48 L水溶解浸膏，将水溶物过D101大孔吸附树脂，以水-乙醇系统(100∶0、70∶30、40∶60、5∶95)梯度洗脱得到4个组分(A1-A4)；A-4(160 g)经硅胶柱色谱，用二氯甲烷-乙醇系统(1∶0 ～ 0∶1)梯度洗脱，经合并后得到17个组分(B1-B17)。B-5(4.4 g)经Sephadex LH-20柱色谱，以[二氯甲烷-甲醇(1∶1)]洗脱分离，得到5个组分(C1-C5)；C-3(291.8 mg)经硅胶柱色谱分离，用二氯甲烷-甲醇-水(5∶2∶0.2)等度洗脱，得到化合物6(45 mg)和7(16 mg)；C-4(3.5 g)经制备HPLC(C18,28%乙腈,3.0 mL/min,检测波长290 nm)纯化得到化合物16(tR=29.241 min,6.4 mg)和15(tR=35.789 min,3.3 mg)；C-5(133 mg)经制备HPLC(C18,55%甲醇,8.0 mL/min,检测波长210 nm)纯化得到化合物10(tR=24.917 min,49.9 mg)和14(tR=21.399 min,13.4 mg)。B-9(3.9 g)经Sephadex LH-20柱色谱，以甲醇洗脱分离，得到12个组分(D1-D12)；D-3(450 mg)经制备HPLC(C18,45%甲醇,8.0 mL/min,检测波长210 nm)纯化得到化合物8(tR=21.648 min,56 mg)和9(tR=23.957 min,33.8 mg)；D-5(120 mg)经制备HPLC(C18,34%甲醇,8.0 mL/min,检测波长210 nm)纯化得到化合物5(tR=27.451 min,10.5 mg)；D-6(149.5 mg)经制备HPLC(C18,53%甲醇,3.0 mL/min,检测波长254 nm)纯化得到化合物2(tR=22.928 min,15 mg)；D-10(62.5 mg)经制备HPLC(C18,53%甲醇,8.0 mL/min,检测波长210 nm)纯化得到化合物1(tR=16.048 min,13 mg)。B-10(2.2 g)经Sephadex LH-20柱色谱，以甲醇洗脱分离，得到10个组分(E1-E10)；E-4(85.9 mg)经制备HPLC(C18,45%甲醇,8.0 mL/min,检测波长210 nm)纯化得到化合物4(tR=34.469 min,3.3 mg)和3(tR=46.983 min,12.8 mg)；E-6(102.7 mg)经制备HPLC(C18,50%甲醇,3.0 mL/min,检测波长254 nm)纯化得到化合物11(tR=20.272 min,40.9 mg)；E-7(42.8 mg)经制备HPLC (C18,46%甲醇,8.0 mL/min,检测波长210 nm)纯化得到化合物12(tR=21.520 min,7.6 mg)和13(tR=29.396 min,3.5 mg)。

3 结构鉴定

化合物1白色粉末(甲醇)，分子式为C27H30O14，mp.216～218 ℃，ESI-MS:m/z577.3 [M-H]-，UV λmax(MeOH-H2O):259.2,327.0 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:12.88 (1H,s,5-OH),9.63 (1H,s,4′-OH),8.40 (1H,s,H-2),7.40 (2H,d,J=8.4 Hz,H-2′,6′),6.83 (2H,d,J=8.4 Hz,H-3′,5′),6.73 (1H,d,J=2.0 Hz,H-8),6.44 (1H,d,J=2.0 Hz,H-6),5.02 (1H,d,J=7.2 Hz,H-1′′),4.52 (1H,br s,H-1′′′),1.10 (3H,d,J=6.0 Hz,H-6′′′)；13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:180.5 (C-4),162.8 (C-4′),161.5 (C-7),157.5 (C-5),157.3 (C-9),154.8 (C-2),130.2 (C-2′,6′),122.5 (C-1′),121.1 (C-3),115.1 (C-3′,5′),106.2 (C-10),100.7 (C-1′′),100.0 (C-1′′′),99.7 (C-6),94.6 (C-8),76.5 (C-3′′),75.6 (C-5′′),73.1 (C-2′′),72.2 (C-4′′′),70.7 (C-3′′′),70.3 (C-2′′′),70.0 (C-4′′),68.4 (C-5′′′),66.4 (C-6′′),17.9 (C-6′′′)。以上数据与文献[4]报道一致，故鉴定化合物1为圆荚草双糖苷。

化合物2白色粉末(甲醇)，分子式为C22H22O10，mp.212～214 ℃，ESI-MS:m/z447.2 [M+H]+，UV λmax(MeOH-H2O):259.2,325.8 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:12.92 (1H,s,5-OH),8.48 (1H,s,H-2),7.53 (2H,d,J=8.8 Hz,H-2′,6′),7.02 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′),6.73 (1H,d,J=2.4 Hz,H-8),6.48 (1H,d,J=2.4 Hz,H-6),5.07 (1H,d,J=7.2 Hz,H-1′′),3.16～3.70 (6H,m,H-2′′,3′′,4′′,5′′,6′′),3.79 (3H,s,4′-OCH3)；13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:180.4 (C-4),163.1 (C-7),161.6 (C-5),159.2 (C-4′),157.2 (C-10),155.0 (C-2),130.2 (C-2′,6′),122.7 (C-1′),122.3 (C-3),113.8 (C-3′,5′),106.2 (C-9),99.8 (C-1′′),99.6 (C-6),77.2 (C-5′′),76.4 (C-3′′),73.1 (C-2′′),69.6 (C-4′′),60.6 (C-6′′)，55.2 (4′-OCH3)。以上数据与文献[5]报道一致，故鉴定化合物2为5,7-二羟基-4′-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物3白色无定型粉末(甲醇)，分子式为C23H24O10，mp.216～218 ℃，ESI-MS:m/z461.1 [M+H]+，UV λmax(MeOH-H2O):253.3 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:8.49 (1H,s,H-2),7.80 (1H,d,J=8.8 Hz,H-5),7.53 (1H,d,J=8.8 Hz,H-2′,6′),7.36 (1H,d,J=8.8 Hz,H-6),7.00 (1H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′),5.10 (1H,d,J=7.2 Hz,H-1′′),3.94 (3H,s,8-OCH3),3.79 (3H,s,4′-OCH3),3.70～3.20 (6H,m,Glc-2′′,3′′,4′′,5′′,6′′H)；13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:174.8 (C-4),159.1 (C-4′),154.1 (C-7),153.7 (C-2),150.0 (C-9),136.8 (C-8),130.1 (C-2′,6′),124.0 (C-1′),123.1 (C-3),120.3 (C-5),119.3 (C-10),114.0 (C-6),113.7 (C-3′,5′),100.4 (C-1′′),77.3 (C-5′′),76.7 (C-3′′),73.3 (C-2′′),69.6 (C-4′′),61.3 (8-OCH3),60.6 (C-6′′),55.2 (4′-OCH3)。以上数据与文献[6]报道一致，故鉴定化合物3为4′,8-二甲氧基-7-O-β-D-葡萄糖基异黄酮。

化合物4白色粉末(甲醇)，分子式为C22H22O9，mp.216 ℃，ESI-MS:m/z431.2 [M+H]+，UV λmax(MeOH-H2O):249.7 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:8.45 (1H,s,H-2),8.05 (1H,d,J=8.8 Hz,H-5),7.53 (2H,d,J=8.8 Hz,H-2′,6′),7.25 (1H,d,J=2.4 Hz,H-8),7.15 (1H,dd,J=2.4,8.8 Hz,H-6),7.00 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′),5.11 (1H,d,J=7.6 Hz,H-1′′),3.79 (3H,s,4′-OCH3)；13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:174.7 (C-4),161.5 (C-7),159.0 (C-4′),157.1 (C-9),153.7 (C-2),130.1 (C-2′,6′),127.0 (C-5),124.0 (C-1′),123.4 (C-3),118.5 (C-10),115.7 (C-6),113.6 (C-3′,5′),103.4 (C-8),100.0 (C-1′′),77.2 (C-5′′),76.5 (C-3′′),73.1 (C-2′′),69.6 (C-4′′),60.6 (C-6′′),55.2 (4′-OCH3)。以上数据与文献[7]报道一致，故鉴定化合物4为芒柄花苷。

化合物5白色固体(甲醇)，分子式为C22H22O10，ESI-MS:m/z445.1 [M-H]-，UV λmax(MeOH-H2O):255.7 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:8.16 (1H,s,H-2),7.31 (2H,d,J=8.8 Hz,H-2′,6′),6.78 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′),6.73 (1H,d,J=2.0 Hz,H-8),6.59 (1H,d,J=2.0 Hz,H-6),5.08 (1H,d,J=7.2 Hz,H-1′′),3.83 (3H,s,5-OCH3),3.72 (1H,m,H-6′′a),3.45 (2H,m,H-5′′,6′′b),3.30 (1H,m,H-3′′),3.28 (1H,m,H-2′′),3.16 (1H,m,H-4′′)；13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:173.9 (C-4),161.4 (C-7),160.8 (C-5),158.8 (C-9),157.1 (C-4′),150.9 (C-2),130.2 (C-2′,6′),124.9 (C-3),122.6 (C-1′),114.8 (C-3′,5′),109.6 (C-10),99.9 (C-1′′),97.1 (C-6),95.6 (C-8),77.3 (C-5′′),76.6 (C-3′′),73.1 (C-2′′),69.8 (C-4′′),60.7 (C-6′′),56.1 (5-OCH3)。以上数据与文献[8]报道一致，故鉴定化合物5为异樱黄素-7-O-β-D-葡萄糖苷。

化合物6黄色粉末(甲醇)，分子式为C27H30O16，mp.177～178 ℃，ESI-MS:m/z609.2 [M-H]-，UV λmax(MeOH-H2O):255.7,354.6 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:12.59 (1H,s,5-OH),7.55 (1H,d,J=2.4 Hz,H-2′),7.53 (1H,dd,J=8.4,2.4 Hz,H-6′),6.83 (1H,d,J=8.4 Hz,H-5′),6.38 (1H,d,J=2.0 Hz,H-8),6.18 (1H,d,J=2.0 Hz,H-6),5.34 (1H,d,J=7.2 Hz,H-1′′),4.38 (1H,br s,H-1′′′),0.98 (3H,d,J=6.4 Hz,H-6′′′)；13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:177.4 (C-4),164.3 (C-7),161.2 (C-5),156.6 (C-9),156.5 (C-2),148.5 (C-4′),144.8 (C-3′),133.3 (C-3),121.6 (C-1′),121.2 (C-6′),116.3 (C-5′),115.3 (C-2′),103.9 (C-10),101.2 (C-1′′),100.8 (C-1′′′),98.8 (C-6),93.7 (C-8),76.5 (C-3′′),75.9 (C-5′′),74.1 (C-2′′),71.9 (C-4′′′),70.6 (C-3′′′),70.4 (C-4′′),70.0 (C-2′′′),68.3 (C-5′′′),67.0 (C-6′′),17.8 (C-6′′′)。以上数据与文献[9]报道一致，故鉴定化合物6为芦丁。

化合物7黄色粉末(甲醇)，分子式为C27H30O15，mp.223～225 ℃，ESI-MS:m/z617.3 [M+Na]+，UV λmax(MeCN-H2O):265.1,347.4 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:12.56 (1H,s,5-OH),10.18 (1H,s,7-OH),7.98 (2H,d,J=8.8 Hz,H-2′,6′),6.87 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′),6.41 (1H,d,J=2.0 Hz,H-8),6.20 (1H,d,J=2.0 Hz,H-6),5.31 (1H,d,J=7.2 Hz,H-1′′),4.37 (1H,br s,H-1′′′),0.98 (1H,d,J=6.4 Hz,H-6′′′)；13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:177.4 (C-4),164.3 (C-7),161.2 (C-5),159.9 (C-4′),156.9 (C-2),156.5 (C-9),133.2 (C-3),130.9 (C-2′,6′),120.9 (C-1′),115.1 (C-3′,5′),104.0 (C-10),101.4 (C-1′′),100.8 (C-1′′′),98.8 (C-6),93.8 (C-8),76.4 (C-3′′),75.8 (C-5′′),74.2 (C-2′′),71.8 (C-4′′′),70.6 (C-3′′′),70.4 (C-2′′′),69.9 (C-4′′),68.3 (C-5′′′),66.9 (C-6′′),17.8 (C-6′′′)。以上数据与文献[10]报道一致，故鉴定化合物7为山奈酚-3-O-β-D-芸香糖苷。

化合物8白色无定型粉末(甲醇)，分子式为C27H30O13，ESI-MS:m/z563.3 [M+H]+，UV λmax(MeOH-H2O):249.7 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:8.40 (1H,s,H-2),8.07 (1H,d,J=8.8 Hz,H-5),7.53 (2H,d,J=8.8 Hz,H-2′,6′),7.28 (1H,d,J=2.4 Hz,H-8),7.19 (1H,dd,J=8.8,2.4 Hz,H-6),7.00 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′),5.04 (1H,d,J=6.8 Hz,H-1′′),4.18 (1H,d,J=7.2 Hz,H-1′′′),3.79 (3H,s,4′-OCH3);13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:174.7 (C-4),161.4 (C-7),159.0 (C-4′),157.0 (C-9),153.7 (C-2),130.1 (C-2′,6′),127.1 (C-5),124.1 (C-3),123.4 (C-1′),118.5 (C-10),115.5 (C-6),113.7 (C-3′,5′),104.1 (C-1′′′),103.7 (C-8),100.1 (C-1′′),76.5 (C-5′′),76.4 (C-3′′′),75.8 (C-3′′),73.5 (C-2′′′),73.1 (C-2′′),69.7 (C-4′′),69.5 (C-4′′′),68.6 (C-6′′),65.7 (C-5′′′),55.2 (4′-OCH3)。以上数据与文献[11]报道一致，故鉴定化合物8为4′-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-木糖(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物9白色无定型粉末(甲醇)，分子式为C27H30O13，ESI-MS:m/z563.1 [M+H]+，UV λmax(MeOH-H2O):249.7 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:8.39 (1H,s,H-2),8.07 (1H,d,J=8.8 Hz,H-5),7.53 (2H,d,J=8.8 Hz,H-2′,6′),7.25 (1H,d,J=2.4 Hz,H-8),7.16 (1H,dd,J=8.8,2.4 Hz,H-6),7.00 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′),5.07 (1H,d,J=7.6 Hz,H-1′′),4.82 (1H,d,J=3.2 Hz,H-1′′′),3.79 (3H,s,4′-OCH3)；13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:174.7 (C-4),161.4 (C-7),159.0 (C-4′),157.1 (C-9),153.7 (C-2),130.1 (C-2′,6′),127.1 (C-5),124.1 (C-3),123.4 (C-1′),118.5 (C-10),115.5 (C-6),113.7 (C-3′,5′),109.4 (C-1′′′),103.7 (C-8),100.0 (C-1′′),78.7 (C-3′′′),76.5 (C-5′′),75.9 (C-2′′′),75.7 (C-3′′),73.3 (C-4′′′),73.1 (C-2′′),70.0 (C-4′′),67.8 (C-6′′),63.1 (C-5′′′),55.2 (4′-OCH3)。以上数据与文献[11]报道一致，故鉴定化合物9为4′-甲氧基异黄酮-7-O-β-D-芹糖(1→6)-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。

化合物10浅黄色粉末(甲醇)，分子式为C15H10O5，mp.303～304 ℃，ESI-MS:m/z269.2 [M-H]-，UV λmax(MeOH-H2O):260.4 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:12.96 (1H,s,5-OH),10.88 (1H,s,7-OH),9.59 (1H,s,4′-OH),8.32 (1H,s,H-2),7.37 (2H,d,J=8.8 Hz,H-2′,6′),6.82 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′),6.38 (1H,d,J=2.0 Hz,H-8),6.22 (1H,d,J=2.0 Hz,H-6)；13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:180.2 (C-4),164.3 (C-7),162.0 (C-5),157.6 (C-4′),157.4 (C-9),154.0 (C-2),130.2 (C-2′,6′),122.3 (C-1′),121.2 (C-3),115.1 (C-3′,5′),104.5 (C-10),99.0 (C-6),93.7 (C-8)。以上数据与文献[12]报道一致，故鉴定化合物10为染料木素。

化合物11白色粉末(甲醇)，分子式为C16H12O5，mp.287 ℃，ESI-MS:m/z285.1 [M+H]+，UV λmax(MeOH-H2O):255.7 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:10.74 (1H,s,7-OH),9.51 (1H,s,4′-OH),8.06 (1H,s,H-2),7.29 (2H,d,J=8.8 Hz,H-2′,6′),6.77 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′),6.39 (1H,d,J=2.0 Hz,H-8),6.37 (1H,d,J=2.0 Hz,H-6),3.79 (3H,s,5-OCH3);13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:173.8 (C-4),162.4 (C-7),161.2 (C-5),159.1 (C-4′),157.0 (C-9),150.4 (C-2),130.2 (C-2′,6′),124.7 (C-3),122.8 (C-1′),114.8 (C-3′,5′),107.9 (C-10),96.5 (C-6),94.8 (C-8),55.9 (5-OCH3)。以上数据与文献[13]报道一致，故鉴定化合物11为异樱黄素。

化合物12浅黄色固体(甲醇)，分子式为C15H10O6，mp.271～273 ℃，ESI-MS:m/z285.1 [M-H]-，UV λmax(MeOH-H2O):258 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:12.97 (1H,s,5-OH),9.35 (2H,br s,2′,4′-OH),8.13 (1H,s,H-2),6.96 (1H,d,J=8.0 Hz,H-6′),6.35 (1H,d,J=2.0 Hz,H-8),6.34 (1H,d,J=2.4 Hz,H-3′),6.26 (1H,dd,J=8.4,2.4 Hz,H-5′),6.19 (1H,d,J=2.0 Hz,H-6)；13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:180.4 (C-4),164.5 (C-7),161.9 (C-5),158.6 (C-4′),157.7 (C-9),156.5 (C-2′),155.3 (C-2),132.2 (C-6′),120.5 (C-3),108.7 (C-1′),106.2 (C-5′),104.4 (C-10),102.6 (C-3′),99.0 (C-6),93.7 (C-8)。以上数据与文献[14]报道一致，故鉴定化合物12为2′,4′,5,7-四羟基异黄酮。

化合物13浅黄色粉末(甲醇)，分子式为C15H10O4，mp.170～172 ℃，ESI-MS:m/z253.4 [M-H]-，UV λmax(MeOH-H2O):248.6,302.0 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:10.80 (1H,s,7-OH),9.55 (1H,s,4′-OH),8.29 (1H,s,H-2),7.96(1H,d,J=8.8 Hz,H-5),7.38 (2H,d,J=8.4 Hz,H-2′,6′),6.93 (1H,dd,J=2.0,8.8 Hz,H-6),6.86 (1H,d,J=2.0 Hz,H-8),6.80 (2H,d,J=8.4 Hz,H-3′,5′)；13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:174.7 (C-4),162.6 (C-7),157.4 (C-9),157.2 (C-4′),152.9 (C-2),130.1 (C-2′,6′),127.3 (C-5),123.5 (C-3),122.6 (C-1′),116.6 (C-10),115.2 (C-6),115.0 (C-3′,5′),102.1 (C-8)。以上数据与文献[15]报道一致，故鉴定化合物13为大豆素。

化合物14无色针状结晶(甲醇)，分子式为C15H12O5，mp.247～249 ℃，ESI-MS:m/z271.1 [M-H]-，UV λmax(MeOH-H2O):212.0,291.3,324.7 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:12.15 (1H,s,5-OH),9.63 (1H,s,4′-OH),7.31 (2H,d,J=8.8 Hz,H-2′,6′),6.79 (2H,d,J=8.8 Hz,H-3′,5′),5.87 (2H,s,H-6,8),5.43 (1H,dd,J=12.8,3.2 Hz,H-2),3.26 (1H,dd,J=17.0,12.8 Hz,H-3a),2.67 (1H,dd,J=17.0,3.2 Hz,H-3b)；13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:196.3 (C-4),166.8 (C-7),163.5 (C-5),162.9 (C-9),157.7 (C-4′),128.9 (C-1′),128.4 (C-2′,6′),115.2 (C-3′,5′),101.7 (C-10),95.8 (C-6),95.0 (C-8),78.4 (C-2),42.0 (C-3)。以上数据与文献[16]报道一致，故鉴定化合物14为柚皮素。

化合物15黄色粉末(甲醇)，分子式为C15H12O5，mp.216～218 ℃，ESI-MS:m/z273.1 [M+H]+，UV λmax(MeOH-H2O):213.2,291.3 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:12.19 (1H,s,5-OH),9.43 (1H,s,4′-OH),7.07 (2H,d,J=8.4 Hz,H-2′,6′),6.72 (2H,d,J=8.4 Hz,H-3′,5′),5.89 (1H,d,J=2.0 Hz,H-8),5.87 (1H,d,J=2.0 Hz,H-6),4.53 (2H,d,J=6.4 Hz,H-2),4.00 (1H,t,J=6.4 Hz,H-3)；13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:196.9 (C-4),166.9 (C-7),163.9 (C-5),162.9 (C-9),156.7 (C-4′),129.7 (C-2′,6′),125.7 (C-1′),115.3 (C-3′,5′),101.7 (C-10),96.0 (C-6),94.8 (C-8).70.8 (C-2),49.3 (C-3)。以上数据与文献[17]报道一致，故鉴定化合物15为二氢染料木素。

化合物16白色粉末(甲醇)，分子式为C15H12O4，ESI-MS:m/z257.2 [M+H]+，UV λmax(MeOH-H2O):285.3 nm;1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ:9.63 (1H,s,3-OH),9.36 (1H,s,9-OH),7.25 (1H,d,J=8.4 Hz,H-1),7.09 (1H,d,J=8.0 Hz,H-7),6.46 (1H,dd,J=8.4,2.4 Hz,H-2),6.28 (1H,dd,J=8.0,2.0 Hz,H-8),6.25 (1H,d,J=2.4 Hz,H-4),6.20 (1H,d,J=2.0 Hz,H-10),5.47 (1H,d,J=6.0 Hz,H-11a),4.20 (1H,m,H-6),3.52(2H,m,H-6a,6)；13C NMR (100 MHz,DMSO-d6)δ:160.2 (C-10a),158.7 (C-3),158.5 (C-9),156.3 (C-4a),132.1 (C-1),125.1 (C-7),117.6 (C-6b),111.3 (C-11b),109.6 (C-2),107.3 (C-8),102.8 (C-4),97.5 (C-10),77.8 (C-11a),66.0 (C-6),38.8 (C-6a)。以上数据与文献[18]报道一致，故鉴定化合物16为去甲基化美迪紫檀素。

4 活性测定

采用菌丝生长速率法测定化合物1～5、10～16对F.graminearum、F.oxysporumf、F.solani3种植物病原真菌的抑制活性。将上述化合物用V甲醇∶V水(50∶50)溶解，药液最终浓度150 mg/L。活性测定及计算方法参照文献[19，20]。化合物2、5和14对3种植物病原真菌显示中等抑制活性，实验数据见表1，未列出的化合物其抑制率均低于30%。

表1 部分化合物对3种植物病原真菌的抑制活性Table 1 Inhibitory activity of some compounds on three plant pathogenic fungi

5 结论

本次研究从红豆树茎枝中分离并鉴定了16个黄酮类化合物，其中，化合物1、3、4、6～9、12、15、16为首次从红豆属中分离得到，化合物1～16为首次从红豆树中分离得到。抑菌活性研究提示化合物2,5和14对禾谷镰刀菌、西瓜尖镰孢菌、茄病镰刀菌的菌丝生长显示出了中等强度的抑制作用。