300份血培养阳性标本细菌分布及耐药性分析

郑敏华 陈燕妆 陈佳

我国人口老龄化问题日益严峻, 多种免疫缺陷疾病的出现, 造成现阶段临床抗生素、各类广谱抗菌药的应用泛滥,导致耐药菌株数量不断增加, 对患者的健康造成了严重的威胁［1］。血流感染当前主要通过实验室血培养进行诊断, 该种诊断方法能够明确标本中的细菌分布及耐药性, 可对患者病情进展和结局进行有效预测［2］。近年来临床中用于治疗的抗菌药不断增加, 耐药性问题十分严峻。血培养技术是诊断血液感染和监测患者病情的主要手段。因此, 本院为探究血培养阳性标本中的细菌分布情况及耐药性进行了相关研究, 现具体报告如下。

1 材料与方法

1.1 标本来源 收集2016年10月～2018年5月本院送检的300份血培养阳性标本。

1.2 仪器与试剂 BACT/ALERT 3D全自动血培养仪(法国梅里埃公司)及配套培养试瓶, VITEK 2 Compact全自动微生物分析设备。质控菌株包括大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌等。

1.3 检验方法 在空腹状态下, 经无菌操作采集检验血液标本5～10 ml, 将标本置入培养瓶内, 通过血液培养仪对标本行连续振荡培养以及监测, 警报阳性培养瓶转种巧克力平板及血平板, 接种时进行革兰涂片染色, 将平板置于温度为35℃的环境进行培养, 时间为24～48 h, 细菌生长后继续进行鉴定,若培养时间＞5 d仍未报阳性, 可鉴定为阴性。通过微生物分析设备进行细菌鉴定, 开展药敏试验, 实验结果参照最新版美国临床和实验室标准协会(CLSI)标准进行判定, 其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、超广谱β-内酰胺酶的检测同样以相关规定进行。

1.4 观察指标 统计革兰阳性菌、革兰阴性菌及真菌株数,分析血培养阳性标本细菌分布情况及药敏试验结果。

1.5 统计学方法 采用WHONET 5.6软件及Excel 2003对数据进行统计分析。

2 结果

2.1 血培养阳性标本细菌种类及构成比 300份血液标本中, 检出革兰阴性菌173株(57.67%), 以大肠埃希菌(38.00%)、肺炎克雷伯菌(10.33%)为主；检出革兰阳性菌109株(36.33%),以凝固酶阴性葡萄球菌(16.67%)、金黄色葡萄球菌(7.67%)为主；真菌18株(6.00%)。见表1。

表1 300份血培养阳性标本细菌种类及构成比(株, %)

2.2 血培养阳性菌耐药性分析 大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类药物敏感率(如亚胺培南)最高, 分别为98.25%和100.00%；对阿米卡星、哌拉西林敏感率较高；对氨苄西林和复方新诺明耐药率较高。凝固酶阴性葡萄球菌、金黄色葡萄球菌对万古霉素、喹奴普汀敏感率最高, 均为100.00%；对青霉素、红霉素、苯唑西林耐药率较高。见表2。

表2 血培养阳性菌耐药性分析(%)

3 讨论

血流感染的临床诊断金标准是血培养, 但是该种诊断方式耗时久且阳性检出率偏低, 当前血流感染患者及疑似患者的临床治疗方案主要以抗菌药为主［3］。但是诱发血流感染的细菌种类较多, 不同细菌的耐药性不同, 因此定期对院内血培养阳性标本的分布情况以及药敏试验结果进行分析具有重要意义。

在本次研究中, 对本院近两年期间收集的300份血培养阳性标本分析发现, 革兰阴性菌占比最高(57.67%), 以大肠埃希菌(38.00%)、肺炎克雷伯菌(10.33%)为主。药物敏感试验显示, 大肠埃希菌对碳青素烯类药物(如亚胺培南)敏感率最高, 为98.25%；对阿米卡星、哌拉西林敏感率较高；对氨苄西林和复方新诺明耐药率较高。而肺炎克雷伯菌对碳青素烯类药物(如亚胺培南)敏感率为100.00%。革兰阳性菌以凝固酶阴性葡萄球菌(16.67%)、金黄色葡萄球菌(7.67%)为主。药物敏感试验显示, 凝固酶阴性葡萄球菌和金黄色葡萄球菌对万古霉素、喹奴普汀敏感率最高, 均为100.00%；对青霉素、红霉素、苯唑西林耐药率较高。大肠埃希菌、凝固酶阴性葡萄球菌是血培养中较为常见的分离病原菌, 导致该种情况出现的原因较多, 主要包括：①随着医疗水平的提升, 临床侵入性操作愈加频繁, 抗生素的应用更加广泛；②标本采集操作不规范, 导致标本中误入皮肤污染菌等［4-6］。

本次研究结果显示, 针对革兰阳性菌的临床治疗, 根据研究结果可采取万古霉素、喹奴普汀等耐药性低的抗菌药治疗。革兰阴性菌的临床治疗可首选碳青素烯类药物(如亚胺培南)进行治疗。大肠埃希菌对哌拉西林具有较低耐药性,临床治疗中可考虑该类药物。针对常规抗菌药物耐药性偏低的细菌, 在临床治疗时需要注意原本有较强敏感性的药物可能出现耐药, 因此应多次对标本进行监测及时发现耐药性情况并予以处理［7,8］。

临床中诱发血流感染的细菌种类多, 初期症状无特异性,因此需要加强对血培养分离菌的监测和观察, 定期开展药敏试验, 并根据研究结果对临床抗生素合理应用提供数据参考,对患者的临床治疗效果、病情控制、健康恢复以及生活质量改善具有积极影响, 因此各级医院均应该根据实际情况定期进行血培养以了解不同细菌的耐药性。