组蛋白去乙酰化酶2过表达对多种肿瘤预后影响的meta分析

刘哲然 邓立彬 刘钰君 江 峰 杨超智 王语晴 刘进生 胡 川

(南昌大学医学院玛丽女王学院，江西 南昌 330000)

组蛋白去乙酰化酶(HDACs)可以通过紧密染色质结构和增加核小体正电荷沉默mRNA的转录。HDAC与组蛋白乙酰化酶共同作用，调节相关基因的激活和转录。组蛋白乙酰化和去乙酰化等表观遗传学修饰在肿瘤发生和进展中起着重要作用，包括抑制有关调节肿瘤增殖，转移，浸润；血管分化与形成的正常基因〔1〕。HDAC2从属于第Ⅰ类HDACs，只在细胞核内表达，它可以催化核心组蛋白分子末端的赖氨酸残基去乙酰化，使分子和组蛋白结合更加紧密从而阻断基因转录，在恶性肿瘤的产生和发展中起重要的调节作用〔2〕。研究表明在胃癌，食管癌，前列腺癌，肾癌等多种肿瘤中均能发现HDAC2的高表达〔3～6〕，提示HDAC2的高表达或许对肿瘤的发展进程和预后起到一定影响。目前，关于HDAC2过表达对于多种肿瘤预后的影响存在一定的争议。本实验尝试运用meta分析的方法，通过在Pubmed，Medline，Cochrane Library，中国知网中进行关键字检索和文献追溯，通过提取包含风险比(HR)和95%的置信区间及可用于计算风险比的肿瘤患者生存期的生存曲线，运用统计学方法评价HDAC2基因高低表达对多种肿瘤患者的预后影响。

1 材料和方法

1.1文献检索策略 以“(HDAC2 or (histone deacetylase 2) or HD2 or RPD3 or YAF1) AND (cancer or carcinoma or tumor or tumors or neoplasm or neoplasms) AND 〔(survival or survivals) or prognosis or prognostic or (predictive value) or (progression or progressions) or outcome or follow-up or (risk or risks)〕”或“(组蛋白去乙酰化酶-2 or HDAC2) AND (肿瘤or癌症)”为关键词在Pubmed，Medline，Cochrane Library，中国知网中进行检索并辅以文献追溯，收集从1990至2017年6月公开发表的文献。

1.2纳入与排除标准 纳入标准：①原始文献为已公开发表的文献。②研究对象为任一肿瘤。③研究方法为免疫组化或RT-PCR。④研究中包含HR及95%置信区间或含有可用于计算HR的肿瘤患者总生存期(OS)或无病生存期(DFS)的生存曲线。

排除标准：①无对照实验。②原始文献数据不完整。③动物或细胞研究。④肿瘤患者生存期小于24个月。

1.3文献筛选和资料提取 由两名研究者独立进行文献质量评价，若汇总时数据不一致，则两名研究者协商讨论，若仍不一致，提交给第三名研究者决定。收集内容包括：肿瘤类型、作者、发表年限、样本出处、样本大小、使用方法、cut-off值、随访时间HR。

1.4统计学分析 统计学分析采用Review Manager 5.3(Cochrane Collaboration，Oxford，UK)。通过计算HR及95%置信区间评估HDAC2的表达与肿瘤患者总体生存率的关系。当异质性大于50%时，采用随机效应模型进行分析，当异质性小于50%时，采用随机效应模型进行分析。发表偏倚通过漏斗图进行评估。

2 结 果

2.1纳入文献的情况和基本特征 在关键词检索后进行初次筛选，纳入文献623篇，通过逐层筛选，606篇因为以下原因被排除：①综述或相关meta分析等无原始数据的文献。②相关数据不完整，不存在或无法被提取。③患者存活期小于24个月。④采用不合适的方法评估HDAC2表达量。

纳入研究的基本特征见表1。一共纳入17篇文献〔5～21〕，乳腺癌研究有5篇，肝癌有3篇，肺癌有2篇，其他肿瘤有7篇。7篇来源于欧洲，7篇来源于亚洲，2篇来源于美国。15篇文献采用免疫组织化学(IHC)方法获取数据，2篇文献采用RT-PCR方法获取数据。

表1 纳入研究的基本特征

2.2HDAC2的表达对肿瘤患者预后的影响 研究数据合并后，对数据进行异质性检验，I2=94%，说明文献间异质性较大，采用随机效应模型进行分析。研究数据合并后显示HDAC2高表达的肿瘤患者的总生存期普遍短于低表达患者CI(HR=1.63，95%CI=1.16～2.30，P=0.005)，见图1。通过亚组分析进一步探究HDAC2高表达与消化道肿瘤患者及乳腺癌患者的预后关系，分别对乳腺癌组和消化道肿瘤患者组进行异质性分析，消化道肿瘤组I2=46%，采用固定效应模型，乳腺癌患者组I2=95%，采用随机效应模型。合并后发现HDAC2高表达对于消化道肿瘤患者的预后有显著的负面影响(HR=2.03，95%CI=1.63～2.53，P<0.000 01)，对乳腺癌患者无显著差异(HR=1.55，95%CI=0.82～2.95，P=0.19)。见图2。

图1 HDAC2表达与多种肿瘤预后关系的meta分析

图2 HDAC2表达与消化系统肿瘤预后关系的meta分析

2.3敏感性分析和发表偏倚 通过采用不同的统计模型和排除低质量研究进行敏感性分析，发现结果并没有产生显著改变，说明了现有分析结果的稳定性。发表性偏倚漏斗图各点基本对称分布，说明不存在明显的发表偏倚，见图3。

图3 HDAC2表达与多种肿瘤预后关系的漏斗图

3 讨 论

本研究通过合并17篇可用的临床文献揭示了HDAC2基因的表达在多种肿瘤患者预后中所起的重要作用。发现HDAC2的高表达对于多种肿瘤患者的预后有明显的负面影响。其影响可能是通过组蛋白去乙酰化，使其与携带负电荷的DNA相互结合，抑制抑癌基因的表达与转录，致使细胞的过度增殖。HDAC2亦可作用于细胞周期素和周期蛋白依赖性激酶(CDK)，细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(CDKi)及视网膜母细胞瘤相关基因(Rb)等与参与维持正常细胞周期和细胞凋亡的相关因子，影响细胞的分裂，分化和凋亡，对肿瘤细胞的增殖产生影响〔22〕。

有文献〔23〕称HDAC2的高表达与肿瘤的级别和增殖活性呈正相关，还能促进肿瘤细胞的转移。通过亚组分析，本研究进一步发现，HDAC2的高表达对于消化系统肿瘤患者的预后有显著的负面影响。总体来说，HDAC2表达量越高，患者的总生存期越短。揭示HDAC2可能是消化系统肿瘤生存率的独立预后因子。

同时本次Meta分析存在一些局限性：①可能存在漏筛，错筛部分符合标准文献的情况；②异质性较大，可能需要进一步分离异质性。