不同化学发光检测系统测定PCT结果的相关性分析

沈素晶，邓超，李霭文，谭俊青

(广东省第二中医院检验科，广东 广州 510095)

同一医院同一项目有多套检测系统已是相当普遍的现象，各个检测系统对同一份标本的同一项目检测结果应具有可比性，这是检验人员、所有厂商等共同努力的方向，追求检验结果具有可比性是最实在的质量[1]。降钙素原（PCT）作为炎症标志物，在鉴别细菌性与非细菌性感染中相对其他炎症标志物有较高的灵敏度和特异性，具有极大的早期诊断价值[2，3]。PCT的检测也日渐成为常规检测项目，为了能够使检测方法更加规范，检验结果更加准确，我们在本院实验室2套化学发光检测系统间进行了PCT的相关性分析，现报道如下。

1 材料与方法

1．1 检测标本 第三方质控品由郎道公司提供，批号 23745190 和 23748190，有效期均为 2018．9．30；患者血清163例，空腹采集静脉血，及时分离血清检测，经罗氏Cobas e 602系统检测所选血清标本的降钙素原的浓度范围在0．01～100ng/ml之间。

1．2 检测系统 新产业生物的Maglumi 2000 Plus全自动化学发光分析仪Snibe系统及其配套校准品，Snibe 系统检测 PCT 的范围是 0．01～100nmol/L。罗氏Cobas 602电化学发光分析系统及Elecsys BRAHMS PCT试剂盒及其配套校准品

1．3 检测方法 新产业Maglumi 2000 Plus检测系统Snibe，采用化学发光免疫分析技术，发光标记物异鲁米诺及其衍生物直接被激发发光，通过测定光强检测待测物质。罗氏Cobas 602采用电化学发光法，通过光电倍增器测量发光强度，Elecsys软件自动通过校准曲线计算得到检测结果。

以实验室日常使用的两个水平的质控物来比较两个系统的精密度，每天检测1次，连续检测20d。另外，以罗氏厂家提供的两个浓度的定值参考物质做回收实验验证准确度。取定值样本互相配比稀释两个浓度连续检测取定值样本互相配比稀释三个浓度连续检测3次去平均值，计算其回收率R。

以罗氏cobas 602系统检测从门诊，体检和住院患者的血清标本，从中选择低中高值标本163例，浓度包含 0．01～100ng/ml。 比较两个系统的相关性，及评价新产业系统的临床满足程度。

1．4 判断标准 以澳大利亚室间质量评价标准T±4或T±20%作为日间CV的允许范围；以%SE小于澳大利亚室间质量评价标准规定的允许误差为临床可接受标准，以参考值上限、标准检测系统本次不同浓度标本检测均值和医学决定水平处的系统误差来判断检测系统间是否可以接受[4，5]。准确度的评价标准以回收率R在90%～110%为可接受范围。

NCCLS的EP－9A2文件规定：两方法的相关系数R2≥0．95，则两方法结果一致。中国国家食品药品监督管理局医疗器械审评中心的 《体外诊断试剂分析性能评估（准确度－方法学比对）指导原则》规定：免疫类产品两方法学的相关系数R2≥0．90，则两方法测定结果为一致。本文按照上述两标准对新产业系统和罗氏系统检测结果一致性进行判断。

3统计学分析 检测结果的相关性分析采用线性回归分析，以两方法相关系数R作为判断2种方法一致性的标准。检测数据采用Excel软件和SPSS 20．0软件进行数据可比性分析、线性回归方程及相关系数R值。

4 检测结果

4．1 两套检测系统测定2个水平PCT质控物测定结果见表1，其日间CV及总CV均小于T±20%的日间CV允许范围。表1可见新产业Snibe系统在测定PCT质控物时均值与罗氏C602相近，且精密度在允许范围内。

表1 不同检测系统2个水平PCT质控物测定结果

4．2 两套系统正确度比较 选用的两个定值校准品浓度分别为 0．562ng/ml和 42．165ng/ml， 分别以1：4和4：1的比例混合为两个浓度的配制样本，以Snibe系统和C602系统测定3次求平均值计算回收率，结果如下：

表2 Snibe准确度验证结果

表3 C602准确度验证结果

从表2表3可见两个系统的回收率均在90%～110%范围内，表明两个系统的准确度在临床可接受范围内。

4．3 PCT检测结果相关性分析 用新产业Snibe系统和罗氏coba 602电化学发光法同时对受检血清标本进行定量分析见表4。结果表明，两种方法检测结果的差异无统计学意义（P＜0．05）。

4．4 新产业Snibe系统与罗氏602系统比对的敏感度、相对特异性、总体符合率结果：新产业Snibe系统的相对敏感度为98．8%，相对特异性为100%，与罗氏C602系统测定结果的总体符合率为99．3%，两者一致性很好，结果见表5。

表4 两个系统测定不同浓度的新鲜血清PCT结果（ng/ml）

表5 新产业Snibe与罗氏C602比对结果（例数）

4．5 新产业Maglumi Snibe系统与罗氏C602系统在阴性结果（PCT＜0．05ng/ml）内的符合率结果：新产业Snibe系统与罗氏602系统测定结果的符合率为97．1%，相关系数R2为0．968两者一致性较好，见图1。

图1 新产业Snibe系统与罗氏602在PCT＜0.05ng/ml检测区间内的相关性

4．6 新产业Snibe系统与罗氏602系统在低、高风险脓毒血症范围内的相关性比对 德国重症学会在脓毒血症诊断中提出 0．5ng/ml和 2．0ng/ml作为诊断截点，PCT＜0．5ng/ml表明脓毒症不可能；PCT＞2．0ng/ml表明脓毒症高风险，非常有可能成为严重脓毒症或脓毒血症休克。

结果表明，两种方法检测结果的差异无统计学意义（P＜0．05），当在 PCT＜0．5 ng/ml范围内，相关系数 R2=0．949 （见图 2）；在 PCT＞2．0 ng/ml，相关系数 R2=0．977（图 3）。 根据 NCCLS 的 EP－9A 规定，两种方法检测结果相关性良好。表明新产业检测降钙素原在预测临床疾病效果与罗氏相当。

图2 新产业Snibe与罗氏602检测PCT结果在脓毒症低风险范围PCT＜0.5ng/ml内比对结果

图3 新产业Snibe与罗氏602检测PCT结果在脓毒症高风险范PCT＞2.0ng/ml比对结果

5 讨论

PCT作为感染性疾病的诊断指标，具有敏感度高、特异度好、操作简单、结果准确快速等优点，已经逐渐被临床所接受并广泛应用，在感染性疾病的早期诊断、治疗效果监测及预后判断等方面有重要的临床意义。随着临床研究的不断进展，PCT也得到广泛应用[6]。如在肝衰竭合并感染[7]、人中枢神经系统感染诊断[8]、克罗恩病[9]及指导抗生素的使用等[10]。目前检测PCT的实验室检测方法包括：放射免疫法[11]、双抗夹心免疫荧光法[12]、胶体金标法[13，14]、透射免疫浊度法[15]。目前最常用的检测方法是电化学发光法[16]，而且这种免疫检测系统不会受到溶血、脂血和黄疸标本的影响。但其中的相关性仍未有全面的相关性分析。

新产业Maglumi系统采用化学发光免疫标记的方法检测降钙素原。近年来，化学发光免疫分析发展速度极快，结合化学发光的高灵敏度和抗体技术的高特异性，以灵敏度高、分离效果好、测定时间短、批间误差小、无放射污染等特点，已经从实验室进入临床医学的常规应用逐步发挥主流作用。加之其检测成本比罗氏系统低，检测时间仅19min，可大大减少患者的经济压力和缩短检测时间。

本试验中，经过验证，新产业的化学发光法与罗氏的电化学法在检测PCT时精密度和准确度均能满足临床要求并能达到比较高的水平。新产业在检测病人血清标本与罗氏系统相关性达99%以上，在预测脓毒血症的相关性也达95%。表明新产业系统与标准化的罗氏系统具有良好的等效性，并且能满足临床需求。

综上所述，本实验新引进的新产业Maglumi 2000 Plus在检测PCT时敏感度，精密度和相关性均可满足临床需求，可投入临床使用。但因所选临床病例不够大量，日后使用过程中仍需密切观察其性能，及时做好校准和维护，以便更好服务于临床。