Sysmex XT-4000i全自动血细胞分析仪临床应用与质量控制

滕士阶，刘小林，徐承来，赵长新，贾 嵘，王 琨，王珍霞

(1.连云港市第二人民医院检验科，江苏 连云港 222002；2.长春市中心医院干部病房，吉林 长春 130031)

随着科学技术的快速发展，高新技术的应用，血液分析仪器应运而生且越来越先进、功能越来越强大。

临床对实验室检验质量及时效性的要求越来越高，而实验室则对检验仪器的标本处理能力和分析效率要求更高，并要求设备能实现网络化远程诊断及数据传输功能的高度自动化、数字化、智能化。我院新引进一款Sysmex公司新推出的集血液、体液检测功能为一体的高端智能型全自动血液分析系统XT-4000i。该系统是一种全新理念的临床血液常规检验和临床研究功能完美结合的多功能智能化血液分析系统。现将临床应用及质量控制情况报告如下。

1 检测原理

1.1白细胞(WBC)分析：XT-4000i血液分析系统采用专用WBC/BAS0和WBC、DIFF检测通道，激光流式细胞原理结合细胞化学荧光染色技术，对血液细胞或颗粒进行逐个分析和分选，智能系统将激光获得的荧光信号、散射光信号绘制成WBC/BAS0、WBC/DIFF 2个散点图，通过分析系统(A.C.A.S)进行结果分析，从而获得准确、可靠的检测结果。

1.2网织红细胞(RET)检测：采用了2种荧光染色液POLYMETHINE和0XAZINE进行DNA和RNA染色。经激光、流式原理检测，得到RET散点图，经分析处理获得准确结果。

1.3红细胞/血小板(RBC/PLl、)检测：采用双鞘流法结合电阻抗原理对RBC/PLI进行检测，利用浮动界标技术进行直方图解析。双鞘流(前鞘流和后鞘流)技术使流经检测系统的RBC/PLT保证逐个通过，彻底避免细胞并列通过、侧向通过、细胞回流重复通过等带来的检测误差，确保检测结果的准确性。

1.4血红蛋白(HGB)检测：采用SLS-HGB无氰化物方法，在保证结果准确、可靠的前提下，更有利于操作人员和周围环境的保护，且无需增加废液处理设备。

1.5各种体液样本的检测：该系统设置了专用于各种体液样本的检测模式，极大地提高了体液样本检测的速度、精度和准确度。通过对荧光染色后的细胞进行计数，可得到体液样本中的白细胞数(BF-WBC)、单个核细胞数(MNC)、多个核细胞数(PMNC)、红细胞数(BF-RBC)等。

2 技术特点

2.1采用了半导体激光流式细胞技术：结合荧光染色技术，使细胞分析的准确度和灵敏度有了极大的提高，结果更准确可靠。

2.2采用电阻抗和核酸荧光染色双方法学进行血小板检测，该技术的应用使低值血小板的检测结果更准确。

2.3用核酸荧光染色和专用幼稚细胞检测通道及特种试剂染色，使外周血中的幼稚细胞检测灵敏度高达1%，极大地提高了早期白血病的检测率。

2.4该系统具有强大的网络功能及完善的数据管理系统。该仪器采用Windows XP操作系统及实时在线网络质控系统SNCS，可与实验室及医院的局域网、国际互联网相连接，能提供远程技术服务、在线实时质控等功能的软件支持，为实验室的标准化建设提供强力支持。

2.5有最宽的线性范围：系统检测细胞的线性范围为0～440×109/L：血小板的线性范围为0～5 000×109/L，是目前所有血液分析仪中最宽的线性范围。

2.6具有最多的网织红细胞检测参数：XT-4000i血液分析系统除能进行网织红细胞的计数及对网织红细胞进行成熟度的分类外，还能检测网织红细胞的血红蛋白含量.为临床诊疗提供极大方便。

2.7具有多通道高精度检测功能：XT-4000i血液分析系统具有单独的WBC/BAS0、DIFF、RBC/PLT、HGB、RET检测通道和专用试剂，使分析精度达到前所未有的高度。

2.8能提供全新的血液学分析参数：XT-4000i血液分析系统能提供：IG、IRF、网织红细胞血红蛋白含量(RET-HE)等定量参数的功能，是其他血液分析仪所不具备的，为临床诊疗提供非常有用的信息。

2.9XT-4000i血液分析系统：具有多功能Laboman Easv-Access中文数据管理系统，内设推片筛选软件，在血液分析过程中进行推片筛选，使异常标本筛选标准化，极大地提高了分析质量，从而有效规避了医疗风险。

3 临床应用与质量控制

我院引进的Sysmex XT-4000i型多功能全自动血细胞分析仪从采购到应用的每一个环节均进行更加严格的管理[1]，正式投入使用，根据《全国临床检验操作规程》[2]和国际血液学标准化委员会(ICSH)制定的评价指南文件[3]，结合我科2015年参加卫生部、江苏省临检中心室间质评情况对XT-4000i血细胞分析仪性能分析评价如下。

3.1材料与仪器：XT-4000i型血细胞分析仪(日本希森美康株式会社)，CD-1800型血细胞分析仪(美国雅培公司，江苏省临检中心血细胞分析参比仪器)；Olympus CX31显微镜；25μl微量加样器(上海光正医疗仪器有限公司)；静脉采血针、真空采血管(成都普什医药塑料包装有限责任公司)；LDZ4-0.8型低速自动平衡微型离心机(北京医用离心机厂)。XT-4000i所用试剂均为原装试剂，由日本希森美康株式会社提供，校准品(SCS-1000)批号为22900525，稀释液(EPK)批号为G0530，嗜碱细胞溶血剂(FB)批号为R0025，白细胞分类溶血剂(FFD)批号为R0034，血红蛋白溶血剂(SLS)批号为A0036,染色液(FFS)批号为A0008，采用希森美康配套高、中、低值室内质控品；CD-1800采用雅培CELL-DYN 22校准品，批号为CD3106，雅培配套高、中、低值室内质控品，稀释液批号为1591212，清洗液批号为1698012，溶血素批号为0185112，均为原装试剂。

3.2标本采集：用含乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝剂的真空采血管采集患者标本至真空管标定刻度。实验在2 h内完成。

3.3方法

3.3.2批间精密度检测：用中值质控品连续测试20天，计算出WBC、RBC、HGB、MCV、PLT的均值、标准差及变异系数。

3.3.3线性：标本以3 000 r/min离心，将血浆与血细胞分开；取血浆作为稀释液，血细胞作为100%血液，分别做10%、20%、40%、60%、80%、100%稀释，每个浓度的标本测定4次取平均值，计算WBC、RBC、HGB、PLT实测值、期望值线性回归方程及相关系数，用电子表格以预期值为横坐标，以测定值为纵坐标绘制出线性图。

3.3.4携带污染率：选取1份高值标本，连续测定2次(A、B)，随后立即进行3次本底计数(C、D、E)，计算WBC、RBC、HGB、PLT的携带污染率，携带污染率=[(C-E)/(B-E)]×100% 。

3.3.5结果对比：每天随机选取1份新鲜血，同时用XT-4000i与CD-1800两台仪器测定WBC、RBC、HGB、MCV、PLT，每份测定1次，记录结果。偏倚=(XT-4000i检测结果-CD-1800检测结果)/ CD-1800检测结果×100% 。每月比对结果以Excel进行绘图,参比仪器(CD-1800)结果为横坐标，XT-4000i结果为纵坐标。

3.4统计学方法：采用直线相关和回归分析。

3.5结果

3.5.1精密度：XT-4000i各项目精密度的变异系数(CV)均在规定允许范围内(XT-4000i规定血液分析精密度：WBC≤3.0%，RBC≤1.5%，HGB≤1.5%，MCV≤1.5%，PLT≤4.0%；体液分析精密度：WBC-BF≤30.0%，RBC-BF≤40.0%),结果见表1～3。

项目例数x±sCV(%)WBC-BF20742.6±102.313.78RBC-BF2052.9±10.519.85

3.5.2线性：XT-4000i检测标本具有良好的线性，各稀释度的检测结果与期望值之间密切相关(r均>0.999)，见表4。

表2XT-4000i血液分析批内精密度检测结果(n=20)

项目高值x±s CV中值x±s CV低值x±s CVWBC23.92±0.321.347.59±0.150.662.72±0.051.84RBC5.86±0.061.024.91±0.061.222.93±0.031.02HGB170±1.831.08139.7±1.891.3578.4±0.791.14MCV93.32±0.560.6085.2±0.70.8271.6±0.550.77PLT521±8.581.65236.5±5.762.4468.8±1.762.56

表3XT-4000i血液分析批间精密度检测结果

项目例数x±sCV(%)WBC207.15±0.162.24RBC204.33±0.051.15HGB20127.9±1.421.11MCV2089.5±0.820.92PLT20210.7±6.12.90

表4XT-4000i的线性检测结果

项目稀释度(%) 100 80 60 40 20 10 r值直线回归方程WBC(×109/L)实测值26.8821.2315.8810.455.332.730.999 8^Y=0.997 3X-0.108 8期望值26.8821.5016.1310.755.382.69RBC(×1012/L)实测值4.863.842.831.840.880.480.999 7^Y=1.007 7X-0.07 6期望值4.863.892.921.940.970.49HGB(g/L)实测值146.8118.086.356.531.016.30.999 5^Y=0.99X+0.728 3期望值146.8117.488.158.729.414.7PLT(×109/L)实测值452.3361.8271.4180.990.545.20.999 5^Y=0.990 6X-2.218 2期望值452.3360.4270.3180.290.145.1

3.5.3携带污染率：XT-4000i检测WBC、RBC、HGB、PLT的携带污染均<1% ，见表5。

表5XT-4000i检测WBC、RBC、HGB、PLT的携带污染率

参数ABCDE携带污染率(%)WBC26.426.80.2000.75RBC6.236.190.020.0100.32HGB1881901100.53PLT4664456240.45

3.5.4XT-4000i与CD-1800检测结果对比：XT-4000i与CD-1800的检测结果相关性好，偏倚小。其平均偏倚WBC为2.87%，RBC为1.92%，HGB为1.38%，PLT为7.46%，MCV为1.12%，见表6。

表6XT-4000i与CD-1800对比结果

项目平均偏倚(%)r直线回归方程WBC2.870.998 6^Y=1.011 4X+0.051 1RBC1.920.985 0^Y=1.023 2X-0.001 2HGB1.380.998 5^Y=0.992 0X+1.944 6PLT7.460.998 1^Y=0.994 0X-4.638 9MCV1.120.992 9^Y=1.001 3X+0.944 4

3.5.5我室室内质控及参加卫计委临检中心及江苏省临检中心全血室间质评情况：从我室2015年上半年室内质控情况看：WBC、RBC、HGB、PLT、MCV的平均CV%分别是2.09、1.23、1.25、3.43、1.39，平均偏倚< 1/4 CLIA′88 TEa；我室参加2015年上半年卫计委临检中心及江苏省临检中心全血室间(WBC、RBC、HGB、Hct、PLT 、MCV)质评成绩看：平均偏倚< 1/4 CLIA′88 TEa，全部为优秀的合格成绩，见表7。从室内质控及室间质评情况看，检验结果准确、可靠，有质量保证。

表72015年我室参加卫计委、江苏省临检中心全血室间质评情况

项目卫计委临检中心批号 21 22 23 24 25 平均偏倚(%)江苏省临检中心批号 01 02 03 04 05 平均偏倚(%)WBC靶值16.53.29.55.68.12.966.546.527.6815.6我室结果16.83.39.55.88.32.906.406.407.4015.0偏倚(%)1.823.120.003.572.472.19-2.02-2.41-1.84-3.65-3.85-2.29RBC靶值4.392.684.605.052.172.513.503.494.285.05我室结果4.342.664.575.002.162.503.463.394.274.95偏倚(%)-1.14-0.75-0.65-0.99-0.46-0.79-0.40-1.14-2.87-0.23-1.98-1.12Hb靶值106651381515368.896.195.9118.6150.8我室结果109651371505468.094.094.0118.0148.0偏倚(%)2.830.00-0.72-0.661.890.68-1.16-2.19-1.98-0.51-1.86-1.54Plt靶值20511423013941690.2146.7147.2224.9424.5我室结果21011523914042695.0150.0146.0235.0400.0偏倚(%)2.440.883.910.722.402.075.322.25-0.824.49-5.771.09MCV靶值74.079.386.586.778.090.684.984.590.593.2我室结果73.781.285.885.680.191.085.086.091.097.1偏倚(%)-0.412.40-0.81-1.272.690.520.440.111.780.554.181.41

注：卫计委临检中心批号：201521-201525；江苏省临检中心批号：151001-151005

4 讨论

血细胞分析仪是目前临床血液一般检查最常用的检测仪器，检测结果对临床诊断、治疗具有十分重要的意义。

XT-4000i全自动血液分析系统由于其智能化程度高、功能强大、检测速度快、测量指标多、数据采集量大以及具有强大的网络功能及完善的数据管理系统，可与实验室及医院的局域网、国际互联网相连接，能提供远程技术服务、在线实时质控等功能的软件支持，可为实验室的标准化建设提供强力支持等，是目前血液分析仪器中性能较好的一款。该仪器临床使用，为临床血液学、体液学分析检验带来质的改变，也为临床实验室自动化、信息化建设带来新的革命，对临床医学的发展起到积极的促进作用。该仪器对环境条件要求高，对温度、湿度、静电及空气清洁度敏感，需要做好防护工作，按规定的时间和程序进行每天、每周及每月的保养、维护，确保仪器性能状态良好。

新仪器安装或每次维修后，必须在使用前对由仪器、试剂、校准品、质控品共同组成的检测系统进行充分和正确的应用评价及性能验证[4]。ICSH已公布了对血细胞分析仪的评价方案，这一规定对了解仪器性能和发现质量问题有重要的意义。XT-4000i是由Sysmex公司推出的多功能全自动血细胞分析仪，具有灵活的5种检测模式，可满足临床不同的检测要求。XT-4000i除了可进行血液常规分析，还可为临床提供有核红细胞(NRBC)、幼稚型网织红细胞(IRF)、光学法血小板(PLT-0)等参数，尤其值得一提的是该仪器可对体液样本进行自动化分析，结果与手工法比较具有较高的相关性[5]，实现了体液标本细胞计数、分类的自动化和标准化，并有效解决了体液标本的实验室生物安全问题。

本文对XT-4000i参考《全国临床检验操作规程》和ICSH制定的评价方案，并结合江苏省临床检验中心对血细胞分析仪性能评价的要求，对WBC、RBC、HGB、MCV、PLT 五个项目进行临床应用检测和质量控制评价。精密度评价是其他方法学评价的基础，可分为批内精密度、批间精密度和总精密度，均以变异系数(CV )表示，按江苏省临床检验中心对血细胞分析仪性能评价的要求笔者进行了批内精密度和批间精密度检测，检测高、中、低值新鲜静脉血的批内精密度变异系数(CV)均在允许范围内；体液样本检测WBC-BF、RBC-BF的批内精密度变异系数(CV)分别为13.78%、19.85%，远低于厂家规定的30.0%、40.0%；检测中值质控品的WBC、RBC、HGB、MCV、PLT批间精密度变异系数(CV)分别为2.24%、1.15%、1.11%、0.92%、2.90%，也均在允许范围内。线性范围评价又称稀释效应，用于评价血细胞分析仪的测定值与稀释倍数是否呈比例关系并观察覆盖浓度范围的结果是否一致，本文数据表明XT-4000i检测WBC、RBC、HGB、PLT(r均>0.999)的线性良好。携带污染率是了解前一高值样本对其后低值样本测定结果影响程度的指标，XT-4000i携带污染率均<1% ，符合规定允许范围。同一实验室同时拥有两台以上仪器时，要保证相同标本同一项目结果及正常参考范围的一致性，很有必要进行方法学比对，以保证同一实验室测定结果的一致性。这是质量控制的重要组成部分。我室两台仪器的检测结果比对偏倚较小，结果具有良好的相关性。XT-4000i智能型全自动血液分析系统的智能化程度高、功能强大、操作程序多，操作时须按提示认真进行，避免程序紊乱，保证仪器正常运行[3]。XT-4000i智能型全自动血液分析系统能够对分析样本中的原始细胞、幼稚细胞和异型淋巴细胞等进行提示，提高了工作效率，但当遇到可疑或病理情况下，人工显微镜复查仍然很重要。

从我室2015年上半年室内质控情况看：WBC、RBC、HGB、PLT的平均CV%分别是2.09、1.23、1.25、3.43，平均偏倚<1/4 CLIA′88 TEa。我室参加2015年上半年卫生部临检中心及江苏省临检中心全血室间(WBC、RBC、HGB、Hct、PLT 、MCV)质评成绩看：平均偏倚<1/4 CLIA′88 TEa，全部为优秀的合格成绩。从室内质控及室间质评情况看，检验结果得到了充分的质量保证。

综上所述，通过对XT-4000i的临床应用、室内质量控制及参加国家、省室间质评结果看：该仪器的精密度高、线性范围广、携带污染率低,与已知性能的血细胞分析仪(CD-1800)偏倚小，结果具有良好的相关性。该仪器同时具有操作简便、提供参数多、灵敏度高、易于标准化等优点，可确保检验质量,能够满足临床需要，其100个标本/小时的检测速度也基本可满足医院的需求。对于仪器报出的原始、幼稚细胞及异型淋巴细胞要引起重视[6]，需进行人工显微镜下计数、分类，以确保结果的准确无误[7]。