姜明,周客轩,弥春霞
(牡丹江师范学院生命科学与技术学院,黑龙江牡丹江157012)
食用菌菌糠主要原料是锯木屑、玉米芯、棉籽壳、稻草及秸秆等,是食用菌栽培后形成废弃培养基,其中含有大量的菌丝体,含有粗纤维、粗脂肪、粗蛋白、总糖及多种维生素、矿物元素、丰富的有机酸、氮、磷、钾、腐殖质等营养物质,经加工之后可以用作饲料、土壤改良剂、有机肥等[1-4]。目前我国食用菌产业发展迅速,食用菌经采收后剩下菌糠的数量极大,绝大多数菌糠被废弃,这会给食用菌产业带来很大隐患,给农业生态环境造成巨大破坏。若菌糠能被再次利用,这不仅能降低其对环境的污染,而且能够实现菌糠变废为宝。本实验将元蘑菌糠按照一定比例添加到土壤中栽培百日草(Zinniaelegans),通过比较添加不同比例元蘑菌糠的土壤对百日草生长的影响,看其是否能促进百日草生长,这对于菌糠的再次利用及食用菌产业发展具有一定意义。
供试菌糠:采用的菌糠为牡丹江师范学院所提供出菇3茬后的元蘑菌糠。滑菇培养料原始配方:木屑78%,麸皮20%,蔗糖1%,石膏1%。采取3茬元蘑后的培养料作为供试菌糠,从中挑选菌丝白密、料块结实的菌糠块,将其晒干,压碎备用。
土壤:腐殖土(土表层中的枯枝残叶经过长时期腐烂发酵形成的土壤,具有一定的肥力)、普通土(含沙量多的土,肥力低)。
1.2.1 添加不同比例元蘑菌糠的土壤对百日草种子发芽影响
(1)配制不同比例元蘑菌糠的土壤:将粉碎后的元蘑菌糠按照0%、10%、20%、30%、40%比例分别添加到腐殖土、普通土中,设计2组实验,以添加浓度为0%元蘑菌糠的腐殖土或普通土作为对照组,以添加浓度为10%、20%、30%、40%元蘑菌糠的腐殖土或普通土作为实验组。将其充分混匀后再分别装进留有漏水口花盆中。将花盆中含有元蘑菌糠的土壤表面呈水平面状态,用标签纸和记录笔标好号并贴在花盆的边缘。
(2)播种:挑取饱满、无损坏、无发霉现象的百日草种子,再将挑好的种子分别置于已挖好坑的花盆土壤中并且每个坑中1个种子,每盆放12颗种子且每盆做3次平行实验。相邻种子的间距保持一致,土壤中每颗种子的深度保持一致,并将每颗种子标好号。
(3)发芽:在埋好的种子土壤上方浇水,浇水太多容易造成土壤不透气,从而影响种子发芽效果。每2天浇1次水,使花盆中的土壤保持湿度。在菌糠土壤中的种子全部发芽前,每天都要来观察并记录百日草发芽个数,并取3次实验中百日草种子发芽个数的平均数。
(4)计算百日草种子的发芽率,其计算公式为:
GR=ΣGt/T×100%(Gt为10天内的发芽数;T为供试种子数)[5]。
1.2.2 添加不同比例元蘑菌糠的土壤对百日草株高的影响。在百日草种子最终发芽的种子数不变后,拔掉多余的百日草苗,使花盆中百日草苗的数量保持在6株。在花盆中的土壤保持水平面状态的前提下,用格尺或卷尺测定百日草顶芽距土壤表面的高度,即株高。每隔2天来测定百日草的株高并作好记录,全部数据采用Microsoft Excel 2010作图,并用单因素方差进行分析。
1.2.3 添加不同比例元蘑菌糠的土壤对百日草生长速率的影响。由于百日草进入花期后,其植株不再生长。测定每盆百日草的株高并记录测定时的天数,取每盆百日草株高的平均值,再计算百日草生长速率。得出全部数据采用Microsoft Excel 2010作图,并分析添加元蘑菌糠的土壤对百日草种子生长速率的影响。
1.2.4 添加不同比例元蘑菌糠的土壤对百日草开花时间的影响。当百日草进入花蕾期时,记录添加不同浓度梯度的元蘑菌糠土壤中百日草的开花时间,每天来记录百日草的开花时间,通过对比分析添加元蘑菌糠的土壤对百日草开花时间的影响。
1.2.5 添加不同比例元蘑菌糠的土壤对土壤微生物的影响。当百日草进入花期后,从添加不同浓度梯度的元蘑菌糠的土壤中取出离土壤表面5cm以下的土壤,置于干净的三角瓶中备用,用标签纸和笔标好号。制备土壤稀释溶液,并取0.1mL适当稀释度的土壤稀释液接种于牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)、高氏1号培养基(用于放线菌培养)、马铃薯培养基(PDA)(用于霉菌培养)表面,将高氏1号平板、马铃薯平板倒置于28℃温箱中培养,放线菌培养时间为5~7d,霉菌培养时间为3~5d,将牛肉膏蛋白胨平板倒置于37℃温箱中培养,细菌培养时间为1~2d。细菌、放线菌、霉菌分别培养1~2d、5~7d、3~5d之后,取出培养皿,首先挑选同一稀释度的平均菌落数在30~300之间进行计数。确定培养皿合适的稀释倍数D,然后计算出某一稀释度下几个平板上的菌落平均数X,依据平板上加入菌液量Y(0.1mL)和含菌样品克数Z(g),得出每克土壤中微生物的活菌数(CFU/g)=(X×D)/(Y×Z)[6]。全部数据采用Microsoft Excel 2010分析。
不同梯度菌糠的土壤中,每个梯度做3盆平行样,每盆放12颗百日草种子,最后取平均值计算百日草种子发芽率。
表1 添加不同浓度梯度的菌糠土壤对百日草种子发芽的影响
由表1得知:在腐殖土中添加浓度为10%元蘑菌糠时百日草种子发芽率最高,添在普通土中添加浓度为20%元蘑菌糠时百日草种子发芽率最高,两种土壤综合比较:添加浓度为10%元蘑菌糠的腐殖土中百日草种子的发芽率最高。
图1 添加不同浓度梯度菌糠的腐殖土或
利用添加不同比例元蘑菌糠的腐殖土或普通土栽培百日草,栽培67天后,进入花期时,植物停止生长,测量百日草最终株高,取不同比例菌糠的土壤中百日草株高的平均值,作柱状图进行分析。由图1得知:经单因素方差分析,由于F>F0.05,P<0.05,说明不同比例元蘑菌糠的土壤对百日草株高的影响显著差异。在腐殖土和普通土中,随着元蘑菌糠施用量的增加,百日草的平均株高呈现先增后减,2种土壤综合比较,发现元蘑菌糠浓度为10%的腐殖土栽培的百日草株高最高。
图2 添加不同浓度梯度菌糠的腐殖土或普通土栽培百日草67天测的平均生长速率
由图2得知:在腐殖土和普通土中,随着元蘑菌糠施用量的增加,百日草的平均生长速度呈现先增后减,腐殖土中元蘑菌糠浓度为10%时百日草的平均生长速率最快,普通土中元蘑菌糠浓度为10%时百日草的平均生长速率最快;两种土壤对比发现,添加浓度为10%元蘑菌糠的腐殖土栽培的百日草的生长速率最高。
图3 添加不同浓度梯度菌糠的土壤栽培百日草
由图3所示,黑色编号的为添加不同浓度元蘑菌糠的腐殖土,黄色编号为添加不同浓度元蘑菌糠的普通土,添加元蘑菌糠的腐殖土中栽培的百日草的开花时间比未添加元蘑菌糠的腐殖土早,同一时期添加元蘑菌糠的腐殖土栽培的百日草的开花时间比添加同浓度元蘑菌糠的普通土早,添加浓度为10%元蘑菌糠的腐殖土中百日草开花时间最早。
2.5.1 添加不同比例元蘑菌糠的土壤对土壤细菌影响的结果
表2 添加不同浓度元蘑菌糠的土壤中细菌数量统计
由表2得知:在腐殖土和普通土中,细菌的数量随着元蘑菌糠浓度递增出现先增后减;腐殖土中元蘑菌糠浓度为10%时细菌的数量最高,普通土中元蘑菌糠浓度为20%时细菌的数量最高,2种土壤中细菌数量相比较可知:添加浓度为10%元蘑菌糠的腐殖土中细菌数量最高。
2.5.2 添加不同比例元蘑菌糠的土壤对土壤中霉菌影响的结果
表3 添加不同浓度元蘑菌糠的土壤中霉菌数量统计
由表3得知:在腐殖土中,元蘑菌糠浓度为10%的腐殖土中霉菌数量最高,霉菌的数量随着元蘑菌糠浓度的增加出现先增后减;在普通土中,元蘑菌糠浓度为20%的普通土中霉菌数量最高,霉菌的数量也随着元蘑菌糠浓度的增加出现先增后减;2种土壤中霉菌的数量相比较可知:添加浓度为10%元蘑菌糠的腐殖土中霉菌数量最高。
2.5.3 添加不同比例元蘑菌糠的土壤对土壤中放线菌影响的结果
表4 添加不同浓度元蘑菌糠的普通土
由表4得知:在腐殖土中,元蘑菌糠浓度为10%的腐殖土中放线菌的数量最高,放线菌的数量随着元蘑菌糠浓度的增加出现先增后减;在普通土中,元蘑菌糠浓度为10%的普通土中放线菌的数量最高,放线菌的数量随着元蘑菌糠浓度的增加出现先增后减。2种土壤中放线菌的数量相比较可知:添加浓度为10%元蘑菌糠的腐殖土中放线菌的数量最高。
3.1 添加浓度为10%元蘑菌糠的腐殖土对百日草的发芽率、株高、生长速率有显著地促进作用,百日草开花时间最早。
3.2 元蘑菌糠浓度为10%的腐殖土中细菌、霉菌、放线菌的数量最高,添加元蘑菌糠的腐殖土中微生物的数量明显比添加同浓度元蘑菌糠的普通土高。因此,当腐殖土中添加浓度为10%的元蘑菌糠能增加土壤中微生物的数量。
3.3 元蘑菌糠中含有菌体蛋白、微量元素、次生代谢产物等营养物质,当施入到土壤中,进一步被微生物分解成腐殖质。由于腐殖土比普通土中微生物的含量丰富,元蘑菌糠施入到腐殖土中更容易被微生物分解成腐殖质,从而使土壤变得肥沃,有助于植物的生长。综合上述可知:可用添加10%比例元蘑菌糠的腐殖土来栽培百日草。