SKALAR San++连续流动注射分析仪测定水中挥发酚的应用探讨

罗 兰

(江苏省海安市疾病预防控制中心 226600)

SKALAR San++连续流动注射分析仪是一款全自动多通道模块化分析仪。它使用标准方法，自动完成化学成分分析。与传统比色法相比可加速反应混合，减少试剂使用量，提高反应条件的稳定性，省去繁琐的操作与计算。在饮用水分析中可进行挥发酚、阴离子合成洗涤剂、氰化物的同时测定。现以挥发酚为例对分析原理、步骤、常见故障及其原因进行分析阐述。

1 实验原理与方法

1.1实验原理 连续流动注射分析的原理是运用经典比色法方法，测定挥发酚的化学反应单元基于4-氨基安替吡啉直接分光光度法(GB/T5750.4.9-2006)[1]。样品用浓磷酸酸化至pH<4，在酸性条件下，样品通过150 ℃在线蒸馏释放出酚，被蒸馏出的酚类化合物，加入弱碱性(pH=10)铁氰化钾溶液，与4-氨基安替吡啉(C11H13N3O)反应生成橙黄色的安替吡啉染料，于505 nm波长处测定吸光度。

连续流动注射仪通过蠕动泵压缩不同内径的弹性泵管，将试剂、试样和气体按比例吸入管路系统中，用空气气泡把样品试剂阻隔开来，使试样片段在连续流动的系统中混合均匀、蒸馏、保温反应，显色后测吸光度，通过数据转换器和软件实现自动连续测量和数据处理。

1.2仪器与试剂 仪器：荷兰SKALAR公司San++自动分析仪、SA1100自动取样器、SA5000化学反应单元、N86蠕动泵、低温恒温槽、仪器控制与数据处理系统。试剂A：蒸馏试剂，50 mL 85%的磷酸(H3PO4)溶于400 mL纯水，然后加入纯水至500 mL。试剂B：4-氨基安替吡啉溶液，将130 mg C11H13N3O溶于180 mL纯水，加纯水至200 mL后再加入1 mL 聚氧乙烯月桂醚(Brij35)摇匀。试剂C：铁氰化钾溶液，取0.4 g铁氰化钾、0.6 g硼酸和1.0 g氯化钾溶于180 mL纯水，用1 mol/L的氢氧化钾调pH至10.3后加纯水至200 mL。

1.3方法 打开连续流动注射分析仪电源，放下空气拉环，打开蠕动泵，开水浴15 ℃。将挥发酚的试剂管放入纯水中走水20 min，打开加热器，开氮气，减压阀调至0.1 mPa，流量(70～80单位)。等加热器温度达到设定值，将试剂管放入相应的试剂瓶中，选择分析项目，观察基线。等基线稳定后，开始分析。

1.4标准溶液配制 取1.0 mg/mL挥发酚标准溶液，分步稀释至1.0 mg/L，用0.1%硫酸铜溶液稀释定容，配制成标准系列，浓度分别为0.00、0.02、0.04、0.08、0.10 mg/L。

1.5精密度试验 对0.020、0.090 mg/L标准品分别平行测定8次，测定结果的相对标准偏差(RSD值)分别为4.22%、2.06%。见表1。

表1 标样测定结果(mg/L)

1.6准确度试验 在自来水样品中分别加标0.020、0.060 mg/L挥发酚标准，平行测定3次，加标回收率为95.0%～110.0%。见表2。

表2 样品加标回收率

2 结 果

按照厂家提供的方法条件测定饮用水中挥发酚，仪器运行良好的情况下，工作曲线相关系数可达0.999以上，加标回收率在90%～110%内。

3 讨 论

经过一段时间的使用，仪器在测定中会出现精密度、准确度下降的情况，其形成原因较为复杂，经查找资料、实验验证、分析、归纳总结如下。

3.1基线异常 日常分析必须在基线走平之后才能进行，基线异常是最常见故障。基线出现锯齿状毛刺时，形成原因可能是气泡不均匀，应检查空气管及模板上的连接口是否有松动或弹性下降，进行重接或更换[2-4]。基线出现短促的跳动时则可能是因为试剂未脱气或电压不稳，应将配制试剂用水先脱气。当基线出现不规则蔓延性波动时，除了观察气泡均匀性还应当检查试剂是否为新鲜配制、比色杯是否被污染、泵管接口是否有阻塞现象。试剂有杂质时应先过滤，比色杯难以清洗时，应用注射器从脱泡管里打入重铬酸钾放置浸泡，不宜放入超声波仪里清洗，以免损坏[5-6]。基线连续飘高或飘低时，还应检查试剂温度，冰箱取出的试剂应平衡至室温后使用。当基线比平时低很多时，应检查试剂或取样器冲洗液是否被污染，更换新配制的试剂。

3.2峰形异常 当同一位置峰高不一致，可能原因是进样空气泡太小，可延长进样空气时间；也可能是泵管弹性下降，需检查更换泵管。当同一位置出现有规律的肩峰，可能原因是冲洗阀漏气，应检查冲洗阀接口。当峰形不同位置出现不同形状时，应检查进样管和样品基质，进样管有部分堵塞应将其更换；样品有混浊时应先过滤，应调节样品酸碱度与取样器冲洗液酸碱度一致。如配制标准时加入硫酸铜，每升样中也加入1 g硫酸铜。取样管太长或受污染，气泡流动过程中会分裂，会引起出现峰粘连或拖尾，应清洗或更换[7-8]。

3.3标准曲线异常 标准曲线应经过或接近原点，当曲线截距(空白值)较大时，原因可能是配制标准的水受到被测成分的污染，应更换新的稀释液；也可能是标准系列与冲洗液之间酸碱性不融洽，应调节标准系列与冲洗液样品pH值和基质浓度尽量一致。标准曲线出现偏低离群点时应检查标准管加样量是否充足[9]。

综上所述，连续流动注射分析仪使用中的维护保养非常重要，要定期清洗、加润滑脂、检查泵管，并设置、完善维护记录本，出现故障和更换配件的情况都应当做好记录。