规模化种猪场猪伪狂犬病净化方法研究

彭 峰，江倩倩，章四新，王建举，苏 雷

（河南省诸美种猪育种集团有限公司，河南 驻马店 463612）

猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒引起的一种急性热性传染病，感染后猪的临床症状因感染日龄不同而异，母猪主要表现为产死胎、弱仔等繁殖障碍；公猪表现为睾丸肿大，精液质量下降；仔猪以神经症状最为常见，感染后15日龄内仔猪死亡率可达100%[1]，给养猪业造成巨大经济损失。世界动物卫生组织将其列为B类动物疫病，我国将其列为二类动物疫病。猪伪狂犬病病毒可随患病母猪的鼻液、乳汁、尿液等分泌物排出而感染仔猪，患病种公猪可经精液将病毒传播给母猪。因此，对种猪群进行猪伪狂犬病净化意义重大，同时，也有学者认为种猪场实现伪狂犬病净化势在必行[2]。

在国外，美国、英国、荷兰等国家已在全国范围内实现猪伪狂犬病的净化，法国于1989年实施猪伪狂犬病根除计划，计划实施后，1998年法国猪伪狂犬病野毒感染抗体阳性率从1995年的24.7%降至4.5%[3]。我国猪伪狂犬病净化起步较晚，在全国范围内还未进行该病的净化计划，但经过一些学者和养殖企业的努力，部分猪场也已成功清除了猪伪狂犬病。

本次试验猪场使用伪狂犬病gE基因缺失疫苗对猪群进行免疫，所以我们采用伪狂犬病gB-ELISA方法对猪群免疫抗体进行抽样监测，适时调整免疫程序；采用伪狂犬病gE-ELISA对猪群野毒感染抗体进行抽样监测，及时淘汰伪狂犬病gE抗体阳性猪。经过两年持续不断的检测淘汰，使种公母猪群伪狂犬病gE抗体阳性率降至0并维持阴性，从而达到净化目标。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 试验猪场 河南某规模化种猪场，基础母猪群1 109头，种公猪102头，年出栏种猪15 000头。

1.1.2 试验试剂 伪狂犬病gB抗体检测试剂盒、伪狂犬病gE抗体检测试剂盒均购自IDEXX公司；猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗购自梅里亚公司；猪伪狂犬病gE基因缺失灭活疫苗购自武汉科前公司。

1.2 试验方法

1.2.1 净化措施

（1）严把疫苗质量关，选择业内口碑好的疫苗公司生产的产品。结合化验室监测数据，确定免疫程序为：仔猪1日龄时滴鼻1头份伪狂犬病活疫苗，70、98日龄时分别进行肌注1头份伪狂犬病活疫苗，119、147日龄时肌注2 mL/头伪狂犬病灭活疫苗，后备猪配种前肌注1头份伪狂犬病活疫苗，种公母猪每年普防4次，每次肌注1头份伪狂犬病活疫苗。

（2）完善生物安全措施。1）在距离场区大门口一定距离处建停车场和消毒中心，公司员工及外来客户的车辆均停在停车场内。外来购猪车辆需清洗干净后进入消毒中心进行喷雾消毒。购猪车辆不能进入场区，通过装猪台隔绝装猪车和内部的接触，卖猪结束后对装猪台进行彻底清洗消毒。2）购猪客户不能进入生产区，可通过预售种猪观察舍对种猪进行观察挑选。本场员工外出后需进行隔离洗浴方可进入场区。3）生产区、生活区、粪污和无害化处理区通过绿化带和围墙进行有效分割。4）定期对猪场内部及周边杂草进行清除，及时清除水坑等蚊蝇孳生地。5）每栋猪舍门口设有专门的消毒池，人员进出均需消毒，消毒池内的消毒液要定期更换。6）猪群实行严格的全进全出制，猪舍内猪群转出后对猪舍进行全面彻底的清洗消毒。7）在生产区实施灭鼠、灭蚊蝇、防鸟、防猫狗等措施，将病原微生物的传播媒介降到最低。

（3）部分清群法和检测淘汰法。1）对符合体重要求的肥育猪和保育猪进行出售，剩余猪全部转移至另一扩繁场进行饲养，对猪场肥育区和保育区进行彻底清洁、消毒、圈舍修整。2）对所有种公母猪和后备公母猪进行伪狂犬病gB和伪狂犬病gE抗体检测，对伪狂犬病gB抗体阴性猪进行补免猪伪狂犬病gE基因缺失活疫苗，淘汰伪狂犬病gE抗体阳性猪。

（4）制定监测计划。部分清群法和检测淘汰法净化之后，每季度按比例在各阶段猪群中采血进行伪狂犬病gB和伪狂犬病gE抗体检测。1）仔猪群按10%的比例分别在 2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24周龄进行采血检测。2）母猪每季度按40头的数量分别在妊娠、哺乳、空怀等阶段猪群中进行采血检测。3）公猪群每季度按25%的比例进行采血检测。4）本场选留的后备猪在入群前45 d进行采血检测，伪狂犬病gE抗体阳性猪立即淘汰，伪狂犬病gB抗体阴性者补免后2周重新检测，抗体合格者入群，仍为阴性者淘汰。

1.2.2 血样采集及化验室检测

（1）按照监测计划对各阶段猪群进行前腔静脉采血，血样采集由猪场各阶段负责人监督采血，确保采血猪只耳号及免疫背景记录清晰准确，采血结束后血样由专人送至化验室。常规方法分离血清后保存于无菌离心管，进行相关检测之后血清于-20℃冻存。

（2）化验室检测人员严格按照检测试剂盒步骤要求对血清进行伪狂犬病gB抗体和伪狂犬病gE抗体检测。

（3）根据各阶段猪群伪狂犬病gB抗体消长规律，适时对猪伪狂犬病免疫程序进行调整；对检测出的伪狂犬病gE抗体阳性血清对应的猪只及时淘汰。

2 试验结果

由表1、表2可知，该场2015年种母猪群伪狂犬病gE抗体阳性率为3.8%，种公猪群伪狂犬病gE抗体阳性率为3.3%，经过两年持续检测淘汰的净化，2017年种猪群伪狂犬病gE抗体阳性率均降至0，并一直维持至今。通过坚持自繁自养、全进全出的饲养模式，以及对选留的后备猪进行严格的免疫抗体及野毒感染抗体的检测，后备母猪及后备公猪伪狂犬病gE抗体阳性率分别从1.7%和2.2%均降至0，并一直维持至今。同时，从2015—2017年各阶段猪群成活率和母猪生产性能均有明显提升（表3、表4）。

表1 2015—2017年能繁种公母猪的伪狂犬病gB、gE抗体检测结果

表2 2015—2017年后备公母猪的伪狂犬病gB、gE抗体检测结果

表3 2015—2017年分娩率及产仔数

表4 2015—2017年各阶段成活率

3 讨论

本次净化主要采用ELISA检测方法，该检测方法具有快速、简便、敏感性高等优点，OIE（世界动物卫生组织）将其作为诊断猪伪狂犬病的首选血清学方法，美国也将其作为检测猪伪狂犬病的法定检测方法之一[4]。

经过两年持续不断的检测淘汰方法，公猪群在2016年达到伪狂犬病gE抗体阴性状态，这一结果也为后续母猪群进行净化提供了有力保障，避免母猪使用阳性公猪精液被感染的风险。母猪群在2015年伪狂犬病gE抗体阳性率为3.8%，经过净化，在2017年阳性率降至0，这也说明，当母猪群感染抗体阳性率较低时（＜5%），采用检测淘汰阳性母猪的方法，是比较经济快速的净化方法。有学者经过4年净化在72家规模化猪场中有14家猪场野毒感染抗体阳性率降为0[5]。该场后备猪群均为本场选留，在2016年也达到了伪狂犬病gE抗体阴性状态，这与该场主要是自繁自养，未从国内引过种猪，并且在后备猪入群前进行了严格的免疫抗体与感染抗体检测有关，在对后备猪进行检测后，淘汰伪狂犬病gE抗体阳性猪只，对伪狂犬病gB抗体阴性猪只进行补免伪狂犬病gE基因缺失活疫苗，2周后重新采血进行伪狂犬病gB抗体检测，gB抗体阳性猪只留种，仍为阴性者不留种用。

该场之所以取得了比较彻底的猪伪狂犬病净化成果，主要与以下几方面有关：一、实行了严格的全进全出制度，猪群转出后对圈舍进行彻底的清洗消毒，并且加强了场内外的生物安全措施，降低了伪狂犬病病毒在猪群间传播的风险；二、该场2013年最后一次从美国引进种猪，未从国内种猪场进行过引种，坚持自繁自养的模式，后备公母猪均为本场选留，避免了引种时从外场带进病毒的风险；三、坚持对猪群免疫抗体及感染抗体的监测，及时了解猪群免疫抗体消长规律，适时调整免疫程序。对检测到的伪狂犬病gE抗体阳性猪及时淘汰，避免其传播病毒，感染其他猪只；四、及时调整免疫程序，通过对猪群免疫抗体及感染抗体进行监测发现，猪场肥育后期会出现部分猪伪狂犬病gE抗体转阳现象，本场将119日龄免疫科前公司伪狂犬病gE基因缺失灭活疫苗改为免疫梅里亚公司伪狂犬病gE基因缺失活疫苗，猪群伪狂犬病gE抗体转阳现象得到有效控制。调整后的免疫程序为：仔猪群1日龄滴鼻免疫梅里亚伪狂犬病活疫苗，70、98、119日龄肌注免疫梅里亚伪狂犬病活疫苗，147日龄肌注免疫武汉科前伪狂犬病灭活疫苗，后备猪配种前肌注1头份伪狂犬病活疫苗，种公母猪每年普防4次，每次肌注1头份伪狂犬病活疫苗。

规模化猪场进行猪伪狂犬病净化时应充分考虑本场的免疫程序、生物安全、免疫抗体的消长规律等多方面的因素，同时不能忽视饲养管理在疫病净化工作中所起的作用，以及猪场中其他疾病如猪瘟、蓝耳病、圆环病毒病等影响，应采取综合防控措施才会在伪狂犬病净化的工作中取得良好效果。