脂肪酶测定试剂盒性能指标统计分析与建议

杨笑鹤 何琼 寇艳芹 甄辉 浙江省医疗器械审评中心 （浙江 杭州 310012）

内容提要： 对浙江省脂肪酶测定试剂盒产品技术要求中的性能指标进行汇总，采用调查问卷形式对产品的实际性能指标进行调研，从统计学角度对脂肪酶测定试剂盒最低性能指标的制定提出了建议。旨在为脂肪酶测定试剂盒行业标准的制订和监管工作的改进提供建议，为技术审评人员提供技术参考，为注册申请人对相关产品的风险控制提供指导。

脂肪酶是由胰腺及周围脂肪组织分泌的糖蛋白，由420或449个氨基酸残基组成。血清脂肪酶主要来源于胰腺的分泌，分子量为32～39kDa，胰腺组织的脂肪酶浓度是血清脂肪酶的近20000倍[1]。胰脂肪酶与肝脂肪酶、脂蛋白酯酶同属于脂肪酶基因家族，基因结构具有高度同源性，其中胰脂肪酶催化循环血液或食物中的甘油三酯水解生成甘油二酯、甘油一酯或甘油和脂肪酸[2]。除胰腺疾病外，血清脂肪酶的升高可能还与急性胆囊炎、肠梗阻、腹部肿瘤等腹部各器官的病变，无症状慢性酒精中毒等全身性病变，肾功能不全、丙型病毒性肝炎等疾病有关[1]。有研究表明，早期检测血清脂肪酶能较好的区分急性和非急性胰腺炎，其血清表达水平和胰腺炎病情进展程度呈显著正相关，阳性率达92.0%，呈较高的敏感性，是诊断胰腺炎病情的主要监测指标[2]。

目前，检测脂肪酶的方法学主要有甲基试卤灵底物法、橄榄油比浊法、干化学法等。浙江省内绝大多数已注册产品采用甲基试卤灵底物法，检验原理如下：1,2-邻-二月桂宗甘油-3-戊二酸（6-甲基试卤灵）-酯作为底物，在碱性环境并有胆酸和共脂肪酶参与下，被脂肪酶水解，生成1,2-邻-二月桂基-消旋-甘油和一个不稳定的中间体戊二酸（6-甲基试卤灵）。该中间体在碱性条件下，继续水解，产生戊二酸和甲基试卤灵，在特定波长（如：570nm），根据产物的甲基试卤灵生成速率测定脂肪酶活性。

1.性能指标统计分析与建议

经查询国家食品药品监督管理总局医疗器械注册数据库，目前国内约已注册81个脂肪酶测定试剂盒（甲基试卤灵底物法）产品，其中浙江省24个，从注册证附件的完整性与可获得性考虑，19个产品纳入此次统计，尽管数据量不大，但对该产品的研究有一定的代表意义。检验原理均为甲基试卤灵底物法、速率法，主要组成成分为双试剂。研究组汇总了各产品的性能指标，数据完整性较好（见表1）。

其中，一个产品未提供空白吸光度变化率指标，但是该指标对采用速率法的产品比较重要，因此，在后续工作中应进一步关注产品性能指标的完整性。

截至目前，国家食品药品监督管理总局尚未发布脂肪酶相关的标准和指导原则。为进一步摸清我省脂肪酶测定试剂盒的性能指标情况，为后续标准和指导原则的制订提供参考，研究组分别计算了各指标的80%、85%、90%、95%参考值范围，详见表2。

表1.脂肪酶测定试剂盒各性能指标数据缺失情况构成分析

表2.脂肪酶测定试剂盒各性能指标(产品技术要求)参考值范围

从表2可见，各厂家对吸光度和灵敏度指标制定的差异较大，而线性区间、准确度、精密度则制定得相对统一但宽泛。为了更好地了解各厂商产品的实际情况，对以上19家企业进行了调查问卷。共发放问卷19份，收回18份。对收回的问卷进了汇总整理，并根据调查问卷结果给出了各性能指标最低要求的建议值（见表3）。

经了解获悉，为规避日常抽检风险，企业在制订产品性能指标时会比较谨慎、宽泛。空白吸光度、空白吸光度变化率、灵敏度三个指标是实现产品检测功能的基础，并与其他指标（线性区间、精密度等）密切相关，综合企业实际情况和其他行标编写特点，研究组对这三个指标不制订具体数值要求。其他性能指标建议值详见表3。

2.结论

在审评过程中发现，体外诊断试剂产品所涉及到的学科跨度较大，所采用的技术发展快、品种繁杂，不同学科的研发者对于质量研究的思路、内容有不同的认知。省内体外诊断试剂生产企业申报的相同产品，技术指标要求差异较大，造成了大量省内相同产品质量良莠不齐，仅靠市场规律去淘汰不合格产品需要较长周期并具有较大的安全风险，给监管工作带来了一定困难。

表3.脂肪酶测定试剂盒各性能指标参考值范围

据了解，脂肪酶测定试剂盒各生产厂家产品的性能指标差异较大，医疗机构提供的实验室间质评的结果表明脂肪酶检测结果的离散性较大。究其原因，其一，由于目前脂肪酶尚无公认的标准物质，各厂家在溯源性上不能做到统一，因而建议各厂家在做准确度研究时优先采用“回收试验”和“比对试验”；其二，省内脂肪酶测定试剂盒部分主要原材料质量标准不统一，且稳定性较差，根据使用环节的反馈，国产的部分试剂盒仅能稳定3d。

因此，建议监管部门尽早开发脂肪酶标准物质并制订相应的行业标准，制订最低性能指标要求，加强日常监管力度；建议生产企业做好研发和原材料的采购与质量控制，保障产品的稳定性和精度，做好风险管理工作；临床使用机构应做好产品临床应用前的性能验证工作。