地中海贫血患儿红细胞参数分析及意义

黄娟芦，芦映红，杨琰，武贝，万丽君，石祖亮，张璟璇（.湖北省妇幼保健院，武汉430070；.湖北医药学院基础医学院，十堰44000）

地中海贫血（简称地贫）是一种常染色体隐性遗传性疾病，又称海洋性贫血或珠蛋白生成障碍性贫血，是小细胞低色素性贫血常见病因之一。在儿童期，地贫特别是轻型地贫容易与营养性缺铁性贫血（IDA）相混淆[1⁃3]。本研究分析了地贫患儿红细胞相关参数，包括红细胞计数（RBC）、血红蛋白（Hb）、平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞Hb含量（MCH）、平均红细胞Hb浓度（MCHC）及红细胞体积分布宽度（RDW）变异系数（CV），并与IDA患儿及正常儿童红细胞相关参数比较，旨在为简便、快速鉴别地贫及IDA提供有效方法。

1 资料和方法

1.1 资料

1.1.1 一般资料 选取2017年1—12月本院血液科经基因检测结合铁代谢指标确诊为单纯地贫患儿47例（地贫组），同时随机选取轻度IDA患儿58例（轻度IDA组），中度IDA患儿45例（中度IDA组），以及血常规正常的健康儿童50例（对照组）。4组男女性别比及平均年龄分别为 25∶22、31∶27、28∶17、27∶23 及（20.8±11.7）、（17.8±14.7）、（18.4±10.0）、（18.5±9.6）个月。4 组性别比及年龄比较，差异均无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.1.2 纳入及排除标准 纳入标准：（1）所有贫血患儿均系小细胞低色素贫血；（2）地贫患儿系地中海基因检测阳性；（3）IDA患儿参照文献[4]诊断标准确诊。排除标准：（1）地贫基因检测阳性伴铁代谢指标异常者；（3）地中海基因筛查阳性，但月龄小于3个月（早产儿补足月龄不足3个月）；（3）地中海基因检测阴性，但铁代谢指标无异常者。

1.2 方法

1.2.1 样本采集 采集静脉血，将标本分成2份，1份用于铁代谢检测，1份送华大基因公司行地中海基因检测。采用日本Sysmex 800i全自动血细胞分析仪及试剂进行血常规测定。

1.2.2 地贫基因分析 地中海贫血基因检测（α+β）301型筛查采用跨越断裂点聚合酶链反应技术及高通量测序技术进行检测。

1.3 统计学处理 采用SPSS10.0软件进行统计学处理，计量资料以表示，组间比较采用t检验；计数资料以率或构成比表示，组间比较采用χ2检验；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 地贫患儿基因检测结果 地贫组中α⁃地贫18例，占 38.3%，其中标准型 α⁃地贫（⁃⁃SEA/aa）13 例，右侧缺失型 α⁃地贫（⁃a3.7/aa）2 例，左侧缺失型 α⁃地贫（⁃a4.7/aa）1 例，中间型 α⁃地贫（⁃⁃SEA/⁃a3.7）1 例和 Hb Constant Spring（HbCS）1 例，分别占 72.2%、11.1%、5.6%、5.6%和5.6%。地贫组中β⁃地贫29例，占61.7%，其中IVS⁃Ⅱ⁃654（C⁃T）beta+14 例，Codons 41/42（⁃ttct）beta05例，Codons 17（a⁃t）beta05 例，Codons 43（g⁃t）beta02 例，28A〉G beta+1 例，HbJ⁃Bangkok 1 例，IVS⁃Ⅰ⁃129（A＞T）（HBB：c.93⁃2 A＞T）1例，分别占 48.3%、17.2%、17.2%、6.9%、6.9% 和 6.9%。见表 1、表 2。

表1 α-地贫缺失或突变基因型分布

表2 β-地贫突变基因型分布

2.2 4组红细胞参数比较 地贫组RBC高于轻度、中度IDA组及对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。地贫组MCV值小于轻度、中度IDA组及对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。地中贫组MCH值小于轻度IDA组及对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），但与中度IDA组比较，差异无统计学差异（P＞0.05）。地贫组MCHC值小于中度IDA组及对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），但与轻度IDA组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。地贫组RDW⁃CV值大于轻度IDA组小于对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），但与中度IDA组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表3

表3 4组红细胞参数比较（±s）

表3 4组红细胞参数比较（±s）

组别n地贫组轻度IDA组中度IDA组对照组4758 4550 Hb（g/L）98.2±8.2100.3±6.074.3±9.1111.5±5.2 RBC（×1012）5.4±0.44.4±0.54.5±0.44.6±1.2 MCV（fL）58.0±5.574.4±8.663.1±4.389.1±6.2 MCH（pg）18.4±1.523.3±3.017.8±1.930.1±1.7 MCHC（g/L）317.5±12.6314.3±11.3282.0±14.5338.0±13.2 RDW-CV（%）19.2±4.116.1±2.820.3±4.212.9±2.6

3 讨 论

地贫和IDA是临床上最常见的小细胞低色素性贫血，前者是由于人类α和（或）β珠蛋白基因缺陷，导致α和（或）β珠蛋白合成减少甚至缺失，引起珠蛋白合成障碍性贫血；后者是因为体内铁缺乏，导致Hb合成减少，引起贫血。由于二者的发病机制不同，治疗方案也截然不同。二者的鉴别尤为重要[5⁃6]，尤其是轻型地贫，临床表现及血常规表现与IDA十分相似，既往的细胞形态分析、血细胞计数、蛋白电泳等联合鉴别诊断方法耗时且低效，基因检测虽精准，但费用昂贵[7]。寻求一种简单有效的方法对这两类贫血进行初步鉴别，不仅有利于提高轻型地贫的检测率，防止误诊误治，还可以大大节约医疗成本和时间。

本研究中，47例地贫均为杂合子，未发现纯合子，说明轻型地贫系湖北地区儿童地贫的主要表现，因而基因诊断对于临床症状较轻而极易漏诊的儿童尤为重要，与唐燕青等[8]的观点一致。β⁃地贫基因突变至少有186种[9]，中国人常见的基因突变依次为CD41⁃42、CD17（A⁃T）、IVS⁃Ⅱ⁃654（C⁃T）、⁃28、CD71/72 等[10]。本研究结果显示，湖北地区儿童地贫以β⁃地贫为主，IVS⁃Ⅱ⁃654（C⁃T）突变是本地区 β⁃地贫主要突变类型，与肖晗等[11]研究一致。唐青燕等[8]研究指出，百色市儿童β⁃地贫以 CD17（A⁃T）为主；而阙婷等[12]研究指出，南宁地区儿童以CD41⁃42为主。这些结论与本研究结果不一致，表明地贫有区域差异，具有高度的异质性。因此，在各地区广泛开展地贫筛查，建立本地区基因突变数据库对该地区地贫患儿的诊治尤为重要。

近年来，关于红细胞参数在地贫与IDA鉴别诊断中的意义已有较多报道。欧燕兰等[13]认为，地贫患者MCV值显著低于IDA患者，其是鉴别二者的较好指标。冯建庭[14]比较了地贫患者、IDA患者及健康人的相关红细胞参数，认为RDW鉴别地贫和IDA的准确率较高。上述研究对象均为成人，且未进行分层研究。本研究中，地贫患儿均系轻型或静止型单纯地贫，故随机选取了轻度、中度IDA患儿及健康儿童与其对照，以便更好地进行统计分析。本研究结果显示，4组RBC均在正常范围，且地贫组RBC值高于其余3组，差异均有统计学意义（P＜0.05），考虑与慢性溶血至骨髓代偿增生有关。地贫组MCV值显著小于其余3组，差异均有统计学意义（P＜0.05），这与欧燕兰等[13]的结论一致。地贫组RDW⁃CV值大于轻度IDA组及对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），但与中度IDA组比较，差异无统计学意义（P＞0.05），这与冯建庭[14]的研究结论不完全一致，考虑与对IDA患儿进行了分层研究有关，也可能与不同地区地贫患者的临床差异有关。地贫组MCH值低于轻度IDA组及对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05），但与中度IDA组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。地贫组MCHC值低于对照组，高于中度IDA组，差异均有统计学意义（P＜0.05），但与轻度IDA组比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。王英等[15]研究认为，地贫患儿MCV、MCH、RDW、MCHC与IDA组、对照组均有显著差异，与本研究结果不完全一致，考虑与本研究排除了地贫合并缺铁性贫血患儿，且王英等[15]研究未按Hb分层有关。

综上所述，RBC和MCV可视为儿童地贫与IDA鉴别诊断的良好指标，在儿童小细胞低色素性贫血中，当RBC较高而MCV较小（小于60 fL）时要高度警惕地贫的可能，此时行地贫基因检测，既可提高本地区地贫患儿的检出率，避免误诊误治，还可降低医疗成本。