张亚萍,王礼兴,林楠菲(福建医科大学附属第二医院临床分子诊治研发中心,福建泉州362000)
在正常状态下,女性子宫通过宫颈黏液栓生理屏障抵御病原体的入侵,但该屏障在分娩、流产或宫腔操作时会被破坏,容易引起病原体感染,进而造成子宫内膜炎。子宫内膜炎是生殖系统中很常见的感染性疾病,如果炎症不能得到有效控制,可发展为子宫肌炎、宫腔积脓。尽管沙眼衣原体(Ct)、淋病奈瑟菌、人型支原体被认为是导致盆腔炎的主要病原体,但约70%病例有不明原因的病因[1]。近年来,生殖支原体(Mg)引起生殖道相关性疾病的问题受到了关注。国外研究表明,Mg感染与急性子宫内膜炎显著相关,通过聚合酶链反应(PCR)方法在58例子宫内膜炎和57例无子宫内膜炎患者中分别查出 Mg感染 9例(15.52%)和 1例(1.75%)[2]。然而,国内有关Mg与子宫内膜炎的研究报道较少见。为了确定Mg的流行情况及其与子宫内膜炎的相关性,本研究分析了子宫内膜炎患者Mg感染情况,现报道如下。
1.1 一般资料 选取2017年1月至2018年4月本院妇科门诊确诊的120例子宫内膜炎患者作为子宫内膜炎组,年龄 21~50 岁,平均(33.4±6.5)岁。同时选取体检健康女性120例作为体检组,年龄21~50岁,平均(34.5±6.3)岁。2组年龄比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
1.2 方法 Mg、Ct标本分别采用上海仁度生物科技有限公司的Mg核酸检测试剂盒[核糖核酸(RNA)恒温扩增]及Ct核酸检测试剂盒进行检测。采用医用棉拭子取宫颈分泌物,将拭子头放入1 mL生理盐水浸泡,即为待测样品。采用磁珠法提取病原体靶标核酸,每管加入100 μL核酸提取液(含捕获探针和磁性颗粒)及10 μL内标,震荡30 s,置于60℃下5 min,后室温放置10 min;将样本管置于磁珠分离装置上静置5 min,待磁珠吸附于管壁,吸干管盖和管中的气泡和液体,加入1 mL洗涤液震荡混匀洗涤,洗涤2次;将样本管移离磁珠分离装置,每管加入40 μL扩增检测液,震荡混匀。采用7500荧光定量PCR仪器(Applied Biosystems公司)进行RNA恒温扩增并采集荧光信号。
1.3 统计学处理 采用SPSS22.0软件进行统计学处理,计数资料以率或构成比表示,组间比较采用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
子宫内膜炎组中,Mg阳性15例,阳性率为12.50%;体检组中,Mg阳性2例,阳性率为1.67%。2组组Mg阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜炎组中,Ct阳性17例,阳性率为14.17%;体检组中,Ct阳性5例,阳性率为4.17%。2组Ct阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜炎组中,Mg阳性率(12.50%)与Ct阳性率(14.17%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。见表 1。
表1 2组Mg、Ct感染情况比较(n=120)
Mg是一种新发现的性传播病原体,其感染与沙眼衣原体感染相似,通常是无症状的。最早于1981年由TULLY教授从非淋菌性尿道炎的男性患者中分离出2株Mg[3],但由于当时该病原体的分离培养困难,且其致病性有待证实,因此相关研究甚少。直至1991年,基于PCR的检测方法问世[4],研究人员才重新开始Mg的研究。目前,Mg被明确为人类生殖道感染潜在的病原体,与尿道炎[5]、前列腺炎[6]、脓性宫颈炎[7]、盆腔炎[8⁃9]、不孕不育[10]等疾病密切相关。但Mg并未得到医生和患者足够的重视,未能如沙眼衣原体、淋病奈瑟菌等常见性传播病原体一样被广泛关注,因此Mg并不是临床常规的病原体检测项目。
本研究结果显示,子宫内膜炎患者Mg阳性率为12.50%,与体检组阳性率(1.67%)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。该结果与其他研究结论较一致,如文献[9]中盆腔炎患者Mg阳性率为13.00%,文献[11]中急性输卵管炎患者Mg阳性率为7.00%,文献[8]中人工流产后盆腔炎Mg阳性率为11.18%。同时,子宫内膜炎组中,Mg阳性率(12.50%)与 Ct阳性率(14.17%)比较,差异无统计学意义(P>0.05)。提示Mg与Ct感染率一样高,跟Ct一样,可视为常见生殖道感染的病原体。本研究应用灵敏、特异、可靠的RNA恒温扩增实时检测技术检测Mg的16S rRNA,不易造成产物污染,可减少检测结果的假阳性。而且病原体在患者治疗后死亡,RNA也随之降解。RNA检测技术只检测活的病原体,有利于临床疗效的评估及判愈,而DNA靶标不能很好地反映病原体在体内的存活情况。因此,本研究获得的Mg阳性率可能比其他文献中采用PCR扩增DNA的方法得到的阳性率略低。
综上所述,与Ct这种常见的性传播病原体比较,子宫内膜炎患者Mg的潜在感染不容忽视,同样应该受到广泛关注和重视。子宫内膜炎与Mg的感染具有一定的关联性,研究子宫内膜炎与Mg感染的相关性对临床诊断具有重要意义,应重视子宫内膜炎患者Mg感染检查,实现对症治疗。