高赫一
(海南师范大学,海南 海口 570100)
作为典型的单细胞生物,草履虫同样可以独立完成生命活动。通过对草履虫运动、摄食等过程进行观察,则能更好地了解单细胞生物的生命活动过程。但受显微镜视野限制,且草履虫具有身体透明、运动迅速等特点,所以在观察草履虫运动和摄食时较难获得满意的效果。因此,还应加强对草履虫运动与摄食观察方法的研究,以便更好地开展生理实验。
草履虫的身体由单个细胞构成,包含细胞膜、细胞质和细胞核等基本结构,需要利用分化出的细胞器完成一般动物生活机能,比如运动、摄食等。在水中运动时,草履虫需要依靠全身密布的纤毛,通过纤毛有节奏的摆动对虫体形成推动。所以,其身体表面的纤毛即为运动胞器,从表膜下的基体发出,其运动需要借助基部复杂的微管纤维网进行纤毛的控制和协调。在运动的过程中,纤毛将成一个角度从前向后滑动,以获得较大推理。纤毛弯曲,则能由后向前恢复原本的位置。在运动的过程中,纤毛呈波浪状依次滑动,以减少身体受到的水阻力。从运动方式上来看,由于草履虫口沟位置的纤毛比其他位置的纤毛要长,摆动的力度更大,所以,草履虫身体前端弯向反口侧,同时绕着左右轴进行旋转。在这种作用力下,草履虫总是会沿着身上的长轴向纤毛摆动的反方向,采用螺旋式旋转的方式向前运动。
在观察草履虫运动时可以发现,在培养液中,草履虫运动速度较快。针对这种情况,还要通过限制其运动对其运动方式进行观察。通常的情况下,可以采用纤维阻拦法、化学试剂抑制法等措施。但是采用化学试剂抑制法容易导致草履虫受到毒害,甚至出现解体死亡现象,所以,一般采用纤维阻拦法对其运动进行观察。在实践操作中,需要使用尽可能薄的脱脂棉,并保障脱脂棉的厚度均匀,面积比盖玻片小。在操作过程中,考虑到草履虫为好气性生物,夏天大多集聚在培养液上层,冬天则位于中下层,所以,还要结合气候在草履虫密集的位置进行取样。取样量应为1滴,将其滴在脱脂棉中央,从一侧将盖玻片盖上,达到排除气泡的目的。将载玻片放在实验台上,通过轻轻按压使载玻片与盖玻片的接触更加紧密,然后可以利用放大镜进行观察。在观察的过程中,需要在棉花纤维间隙中寻找运动缓慢的草履虫,然后对其运动方式进行观察。采用该种方法,可以观察到草履虫的避让反应。具体而言,就是在草履虫遇到棉花纤维时,会发生纤毛摆动方向逆转的情况,导致身体向后退小段距离,在改变方向后,纤毛将恢复原本的摆动方向,促使草履虫向前进行试探运动。由于草履虫在纤维之间,所以会重复这样的运动过程,直至找到适宜前进方向。通过认真观察,则能了解草履虫的运动方式。
从草履虫的摄食方式来看,其主要依靠口沟进行食物的摄取。在草履虫的身体一侧存在口沟,将从草履虫的身体前端斜向后扩展至腹面中部。在草履虫全身纤毛摆动的过程中,食物颗粒将随着形成的水流进入口沟,随后将经过胞口,达到管状胞咽,在底部得到集合。之后,该位置将形成食物泡,从而进入细胞质。在胞内,食物泡将与溶酶体融合,实现消化,无法消化的食物残渣将经过胞肛排出。在摄食的过程中,食物颗粒最初会集合成小泡,只有集合到一定程度才能进入细胞内质成为食物泡,整个过程需要10~15 min。
分析草履虫的摄食过程可以发现,为了使其尽快形成食物泡,还要提供足够的营养物质。在实验时,可以取细颗粒玉米粉颗粒,利用饮用水调成稀糊状,避免过稠或过密。取一滴滴在载玻片上,然后利用微吸管将草履虫移入其中。为了减慢草履虫的运动,以便于观察,需要在水滴中放入棉花丝,然后将盖玻片压紧,以减慢草履虫运动速度。由于玉米面糊中营养物质较多,可以观察到草履虫进行营养物质颗粒摄入的过程。实际上,草履虫体内食物泡形成时间不仅与食物量有关,也与水温和本身生理状态有关。在取样时,应尽量选取个体大、活跃的草履虫,以便获得更好的摄食观察效果。在观察的过程中,应当将制备的临时水装片放在低倍显微镜下观察,将草履虫放置在视野中央。为了便于观察,可以从载玻片一侧滴入墨汁或中性红。通过观察可以发现,大小不同的食物泡将陆续产生,并遵循一定路线在虫体内移动,即先向后端运动,然后向前端运动,最后移向后端。加入中性红,食物泡在移动的过程中会发生颜色变化,从红色变为橙红,然后变为蓝绿色、淡黄色,最终再次变为橙红。因为中性红为指示剂的一种,在酸环境下为红色,在碱环境下为黄色。通过观察颜色变化,可知草履虫体内的食物泡将先经过酸性消化,然后得到碱性消化。由此可知,草履虫摄入食物后,虫体最初分泌的消化酶为酸性,之后分泌的为碱性。而能够消化的食物将被细胞质吸收,为草履虫完成生理机能提供能量,无法消化的将被排出体外。值得注意的是,采用中性红作为指示剂,需要经过多次过滤,以免草履虫因染料毒害发生解体死亡。在实验改进方面,可以采用螺旋藻悬浊液。在实验的过程中,可以在载玻片的一侧滴半滴螺旋藻悬浊液,然后进行持续观察;5~8 min后可以发现,草履虫口沟内出现绿色螺旋藻,之后可以观察到螺旋藻食物泡。经过15 min,草履虫体内将产生大量食物泡。绿色食物泡在细胞质内流动,可以为观察整个摄食过程提供便利。
在动物界中,草履虫为典型、原始和低等的单细胞动物,大草履虫的体长能够达到180~300 μm,有助于实现原生动物形态结构的观察。但是想要实现对草履虫整个生命活动过程的观察,还要通过限制其运动加强草履虫运动观察,并通过提供大量营养物质观察其摄食过程。通过掌握草履虫的运动和摄食观察技巧,则能获得较好的实验效果。
[1] 杨其,杨艳华,刘慧敏,等.用螺旋藻粉代替酵母菌进行草履虫摄食及消化过程观察[J].生物学通报,2016,51(09):55,64.
[2] 宇文延青,苟士正.草履虫观察技巧[J].实验科学与技术,2016,14(02):22-23.
[3] 王春喜,刘海涛.“观察草履虫的运动、取食和趋性”的实验教学[J].生物学通报,2014,49(04):17-18,63.