梵净山野生藤茶主要有机成分研究

梁琍 邱岚 吕廷红

摘 要：采用分光广度法分别对梵净山野生藤茶中的可溶性糖、黄酮类化合物、茶多酚3种有机成分的含量进行了研究分析。结果表明，野生藤茶中的可溶性糖含量为6.10%，总黄酮34.30%，茶多酚22.00%。该研究可为梵净山野生藤茶的进一步开发提供了科学的理论依据。

关键词：藤茶；有机成分；梵净山

中图分类号 TS272 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2018）21-0031-03

Study on the Main Organim for Natural Rattan Tea from Fanjing Mountain

Liang Li et al.

（College of Agro-Forestry Project & Program，Tongren University，Tongren 554300，China）

Abstract：Spectrophotometric method was adopted to analyze the content of soluble sugar，flavonoids and tea polyphenols.The results showed that the soluble sugar content in wild rattan tea was 6.10 %，the total flavonoids content was 34.30 % and the tea polyphenols content was 22.00 %.This results provide the scientific basis for the further study natural rattan tea stand on on Fanjing Mountain.

Key words：Vine tea；Organism；Fanjing Mountain

野生藤茶是葡萄科蛇葡萄属中的一种野生藤本植物，学名为显齿蛇葡萄（Ampelopsis grossedentata），俗称山甜茶、白茶、甘露茶、白毛猴等[1]，是一种类似于茶的植物。整株可以药用，味道较甘甜、性凉，具有清热解毒、祛风湿、强筋骨等功效，还可以治疗感冒发热、咽喉肿痛、黄疸型肝炎、疱疖等症状[2]。

近年来，随着科学技术水平的发展，学者们对藤茶的各种特性进行了研究，发现藤茶不仅可以作为药物，还可以作为饮品，对身体起着保健的作用[3]。藤茶中主要含有可溶性糖、总黄酮、茶多酚等营养物质[4]，具有调节免疫，抗氧化性，降血糖，降血压，降血脂等功效，对心血管疾病也起到很大的作用[5]。茶多酚（Tea Polyphenols，TP）是茶叶中以儿茶素为主的多酚类化合物的总称，是形成茶叶色香味的主要成分之一，也是茶叶中有保健功能的主要成分之一，是一种目前尚不能人工合成的多功能、高效能天然抗氧化剂，其抗氧化性能比维生素E的抗氧化效价高10～20倍，而且无毒，在食品、保健、医药等领域都具有非常广泛的应用价值[6]。

到目前为止，有关梵净山野生藤茶的成分研究方面的报道仍较少[7]。为此，本研究通过对梵净山野生藤茶中可溶性糖含量、总黄酮含量、茶多酚含量等方面的测定，探明其主要有机成分，为今后梵净山藤茶资源的开发利用提供理论依据。

1 研究区概况

梵净山位于贵州省东部，总面积约为567km2，海拔2572m，是中国较早加入联合国教科文组织人与生物圈计划（MAB）的自然保护区之一。处于我国亚热带范围的中心地带，具有中亚热带季风山地湿润气候特征。植物区系比较复杂，是1个比较丰富和古老的温带、亚热带植物区系。植被类型丰富多样，主要有针叶林、阔叶林、竹林、灌木林、沼泽5种类型。植物资源特别丰富，高达1800种，其中可食用和药用的有几百种以上[8]。野生藤茶广泛分布在梵净山坝盘、太平、桃映等地。

2 材料与方法

2.1 材料 野生藤茶（夏季采自梵净山），干燥后粉碎，密封保存于干燥的环境下。

2.2 试剂 蒽酮、芦丁、无水乙醇、硝酸铝、硝酸钠、氢氧化鈉、浓硫酸、磷酸、乙酸乙酯、酒石酸钾钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、硫酸亚铁等试剂均为分析纯。

2.3 仪器设备 GUTEL超声波清洗器，101-3型电热鼓风干燥箱，FW80高速万能粉碎机，KQ-C玻璃仪器气流烘干器，电子分析天平，SHZ-DIII予华牌循环水真空泵，T6新世纪紫外可见分光光度计。

2.4 实验方法

2.4.1 材料预处理 将藤茶去掉杂质、切碎，放入110℃烘箱内烘15min，然后调到70℃过夜。常温下用7倍体积的乙酸乙酯浸泡样品4h，用蒸馏水清洗残留有机溶剂至样品无味，再将样品放入70℃烘箱内烘干至恒重得到脱脂样品，粉碎机粉碎过50目筛，粉末至室温密封保存备用。

2.4.2 藤茶中可溶性糖含量的测定[9]

2.4.2.1 可溶性糖的提取 材料预处理→准确称取50mg的样品→倒入10mL刻度的离心管中加入4mL80%的乙醇→放入80℃水浴锅中不停搅拌40min→用离心机离心10min（转速为4000转）取其上清液，剩余的残渣加2mL80%乙醇反复2次，合并上清液→在上清液中加入10mg的活性炭，在80℃脱色30min→脱色过后倒入10mL容量瓶中用80%的乙醇定容至刻度，过滤后取滤液→吸取滤液1mL放进带塞试管中→加入5mL蒽酮试剂混和均匀，盖上塞子在沸水浴中煮沸10min→取出来以后立刻用水冷却至室温，用10mm的比色杯，在波长为625nm处，以试剂空白溶液为参照组，测吸光度。此操作重复3次，取其平均值。

2.4.2.2 标准曲线的绘制和样品测定 准确称取在80℃烘箱中烘烤到恒重的葡萄糖100mg，用80%的乙醇配制成100mL溶液放入容量瓶中摇晃均匀，分别吸取0、0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL放入20mL的有塞试管中，每一只试管中各加入5mL的蒽酮试剂后摇匀，盖上塞子，在有沸水的水浴锅中煮沸10min，取出来后马上用水冷却直至达到室温。在波长为625nm下，用试剂空白溶液为参照组，测量吸光度A（紫外分光光度计），葡萄糖含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，见图1。

从标准曲线图得到回归方程式为：A=0.0050x+0.0038，R2=0.9992，藤茶中可溶性糖含量的测定方法与测定绘制标准曲线的方法相同。

可溶性糖含量的计算。按下列公式计算藤茶中可溶性糖的含量：

样品中物质含量（%）=[（C×Vt）/FW×VS×103]×100

式中：C——由标准曲线所生成的回归方程所求出的物质含量（μg）；

Vt——提取液总的体积；

Fw——样品的重量；

Vs——测量时的体积；

103——重量单位换算系数。

2.4.3 藤茶中总黄酮含量的测定[10]

2.4.3.1 总黄酮的提取 精确称量1.0g藤茶叶粉末→放进100mL的三角烧瓶中→加入40%的乙醇，料液比为1∶45→在温度为80℃的超声波下提取45min→趁热减压抽滤，加水定容至100mL容量瓶中，作为备测液。

2.4.3.2 标准曲线的绘制和样品测定 精确称取芦丁0.023g，用30%乙醇溶解过后定容至100mL。拿7只有塞试管，各加入0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0mL芦丁溶液，加入5%NaNO3溶液0.3mL，摇动均匀，静置6min后再加入10%Al（NO3）3溶液0.3mL，摇动均匀，静置6min后再加入4%NaOH溶液4.0mL，用30%乙醇定容到刻度，摇动均匀。过10min后，在波长为510nm处测定，以试剂空白溶液为参照组，测吸光度。芦丁含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，见图3。

从标准曲线图得到回归方程式为：A=0.0002x+0.0008，R2=0.9988。藤茶中总黄酮含量的测定方法与测定绘制标准曲线的方法相同。

总黄酮含量的计算。

按下列公式计算藤茶中总黄酮的含量：

样品中物质含量（%）=[（C×Vt ）/FW×VS×103]×100

式中：C——由标准曲线所生成的回归方程所求出的物质含量（μg）；

Vt——提取液总的体积；

Fw——样品的重量；

Vs——测量时的体积；

103——重量单位换算系数。

2.4.4 藤茶中茶多酚含量的测定[11]

2.4.4.1 茶多酚的提取 精确称量10g藤茶叶粉末，放进三角烧瓶中，加入沸水50mL，放入70℃水浴锅中侵提55min，取出稍微冷确，倒出上清液，再加入50mL沸水，继续在70℃水浴锅中侵提55min，把两次侵提液和残渣一起倒入离心试管中，放入离心机中，转速为5000×g离心20min，得到待测液。取0.1mL待测液放入10mL容量瓶中，加入1.9mL的蒸馏水，再加入2mL酒石酸铁溶液和6mL磷酸缓冲液，混合均匀，在波长为540nm处测定，以试剂空白溶液为参照组，测吸光度。此操作重复3次，取其平均值。

2.4.4.2 标准曲线和绘制和样品测定 精确称取没食子酸标准样品0.025g，加蒸馏水溶解后并转入100mL容量瓶中定容。分别在6只100mL容量瓶中加入没食子酸标准样品0、1、2、3、4、5mL，加入5mL蒸馏水和5mL酒石酸亚铁溶液，充分混合均匀后，再加入pH值等于7.5的磷酸缓冲液定容到25mL，在波长为540nm处测定，以试剂空白溶液作参照组，测吸光度。没食子含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线，见图4。

从标准曲线图得到回归方程式为：A=2.2200x+0.0073，R2=0.9990。藤茶中茶多酚含量的测定方法与测定绘制标准曲线的方法相同。

茶多酚含量的计算，按下列公式计算藤茶中茶多酚的含量：

样品中物质含量（%）=[（C×Vt ）/FW×VS×103]×100

式中：C——由标准曲线所生成的回归方程所求出的物质含量（μg）；

Vt——提取液总的体积；

Fw——样品的重量；

Vs——测量时的体积；

103——重量单位换算系数。

2.5 数据处理 数据分析采用Excel统计分析软件。

3 结果与分析

经测定得出：梵净山野生藤茶中可溶性糖含量为6.10%，总黄酮为34.30%，茶多酚为20.00%。梵净山藤茶中3种有机成分与邻近地区张家界的相比，可溶性糖含量远低于张家界，总黄酮略高于张家界，而茶多酚与张家界相差不大[13]。造成此情况的原因有可能是由于各地藤茶的生长环镜不同，温度和湿度的高低不同，导致每个地方藤茶中可溶性糖含量不同。因为土壤水分胁迫程度对藤茶中可溶性糖含量有显著的影响，季节不同，也会影响藤茶中可溶性糖的含量。由于梵净山野生藤茶主要生活在海拔400～1300m的山地云雾林丛中，这里光照时间较短、空气湿度較大，这些特点都不利于糖类在植物体类的堆积，导致梵净山野生藤茶中糖的含量相对偏低。

4 结论与讨论

通过对梵净山野生藤茶中3种有机成分的测定，得出其可溶性糖的含量为6.1%，总黄酮为34.3%，茶多酚为22.00%。总黄酮具备抵抗血栓，降低血脂，保护肝胀、降低血糖、抗炎症、镇痛和升高免疫功能的作用，茶多酚具有抵抗癌症、抵抗辐射、降低血糖和血脂、预防心血管疾病等多种保健和药理功能，还具备抗氧化的作用。因此，梵净山野生藤茶中是一种集营养保健和药理为一体的，具有开发价值的药食两用植物。同时野生藤茶加工的方法简单，不需要大成本的投入，所以合理开发梵净山野生藤茶具有较高的经济价值。

参考文献

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[2]熊璞，姚茂君，肖凯军.藤茶中二氢杨梅素的提取工艺研究[J].现代食品科技，2009，25（8）：907-910.

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[4]刘慧颖，崔秀明，刘迪秋，等.显齿蛇葡萄的化学成分及药理作用研究进展[J].安徽农业科学，2016，44（27）：135-138.

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[6]刘焕云.Ca2+沉淀法提取茶多酚的方法研究[J].广州食品工业科技，2004，3：26-28.

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[11]中国科学院上海植物生理研究所.现代植物生理学实验指南[M].北京：科学出版社，2004，223-224.

[12]熊皓平，何国庆，杨伟丽，等.显齿蛇葡萄生化成分分析[J].中国食品学报，2004，4（3）：58-71.

（责编：张宏民）