雄激素受体在不同分子分型乳腺癌组织中的表达及意义

祝志川， 张喜平

乳腺癌作为一种激素依赖性肿瘤，雌激素、孕激素及雌激素受体(estrogen receptor，ER)、孕激素受体(progesterone receptor，PR)在乳腺癌的发生、发展中起着重要作用，ER、PR已成为判断乳腺癌预后的独立因子[1]，拮抗雌激素的内分泌治疗已成为luminal A、luminal B型患者的重要治疗手段[2]。绝经后女性乳腺癌的发病率并没有因体内雌激素急剧减少而下降，此外约1/5的luminal A、luminal B型患者也会内分泌治疗效果不佳[3]。雄激素在乳腺癌发生发展中的作用已有初步研究[4]。本研究探讨雄激素受体(androgen receptor，AR)在各种不同分型尤其是三阴性乳腺癌的表达情况，是否可作为一个靶点应用于三阴性乳腺癌的治疗，以及AR与乳腺癌分子各型的关系。

图1 雄激素受体在乳腺癌组织中表达的免疫组化染色结果1A：AR阴性表达(SP ×400)，三阴型；1B：AR弱阳性表达(SP ×400)，Luminal A型；1C：AR阳性表达(SP ×400)HER-2过表达型；1D：AR强阳性表达(SP ×400)Luminal B型

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2012年10月至2017年2月内蒙古医科大学附属医院经病理证实为乳腺癌且未采取任何治疗的585例患者，获取肿瘤组织标本。患者均为女性，年龄29～85岁，中位年龄53岁，资料完整，术前均行胸部CT，腹部、子宫双附件彩超，血清CEA、Ca125、Ca153等检查，进行分期并判定有无转移，均未行特殊治疗，行常规乳腺癌改良根治术或保乳术。

1.2 AR检测方法 切片及染色：① 常规以4%甲醛固定组织，石蜡包埋后切片HE染色；② 免疫组化检测ER、PR及HER-2，ER、PR染色后以阳性染色细胞数>10%作为评定依据。染色结果-或+判定HER-2为阴性，+++为阳性，(++)FISH检测；③ 由两名经验丰富的病理科医师对相应蜡块行连续切片、制片(厚度4 μm)并进行诊断。免疫组化常规用SP法，操作过程按试剂盒(福州迈新生物技术开发有限公司)说明书进行。

1.3 AR结果判定 肿瘤细胞胞质或胞核出现棕黄色颗粒为AR阳性表达，<10%为阴性(-)；10%～25%为弱阳性(+)；25%～50%为阳性(++)；>50%为强阳性(+++)。

2 结果

2.1 雄激素受体在乳腺癌组织中的表达与病理指标的关系 AR在乳腺癌组织广泛表达，阳性表达率高达59.5%，阴性组及+～+++组免疫组化染色结果如图1所示；ER、PR阳性组中AR阳性表达率分别为67%(263/393)、70%(225/321)，高于其在ER、PR阴性组的44%(84/192)、45%(123/274)(P<0.05)；AR阳性表达率在HER-2阳性组为65%(225/348)与在HER-2阴性组53%(126/237)比较，差异无统计学意义(P<0.05)；AR阳性表达在Luminal A型、Luminal B型、HER-2过表达型、三阴型分别为58%(96/165)、72%(171/237)、52%(48/93)和37%(33/90)，各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)，两两比较只有三阴型与Luminal B型比较差异有统计学意义(P<0.05)，非三阴性组495例，阳性表达率为64%(315/495)，与三阴性组比较差异有统计学意义(P<0.05)。详见表1。

表1 乳腺癌组织中雄激素受体表达与临床病理特征的关系

临床病理特征例数雄激素受体+～+++阳性率χ2值P值月经状态0.1560.693 绝经26415358% 未绝经32119561%TNM分期4.7120.030 Ⅰ、Ⅱ期49230963% Ⅲ、Ⅳ期933942%肿瘤大小(cm)2.6790.071 ≤2754256% >2,≤541726764% >5933942%淋巴结转移5.2780.102 阳性25513558% 阴性33021365%雌激素受体9.7900.002 阳性39326367% 阴性1928444%孕激素受体11.0670.001 阳性32122570% 阴性27412345%HER-22.5850.072 阳性34822565% 阴性23712653%分型12.5770.006 Luminal A型1659658% Luminal B型23717172%# Her-2过表达934852% 三阴型903337%*

注：三阴型组与其他3组之和比较*P=0.017，三阴型与Luminal B型比较#P=0.000

2.2 雄激素受体在乳腺癌组织中的表达与临床特征之间的关系 在TNM分期Ⅰ期和Ⅱ期组中，AR阳性表达率(63%)高于Ⅲ期和Ⅳ期组(42%)(P<0.05)；AR表达与淋巴结转移状况、肿瘤大小、月经情况间差异无统计学意义(P>0.05)。详见表1。

3 讨论

近年研究表明，人乳腺癌组织中AR表达明显，表达率为35%～90%[5-7]。本文585例乳腺癌组织的免疫组化结果显示，AR阳性染色率为60%，与报道结果相近。AR阳性表达率与ER表达呈正相关(P=0.027)[8-9]。国内也有报道显示ER、PR阳性表达与AR阳性表达呈正相关(P=0.000，P=0.000)[10]；HER-2阳性组与HER-2阴性组AR阳性率比较差异无统计学意义(χ2=2.582，P=0.072)；本文结果显示，ER、PR阳性者的AR阳性表达率明显高于ER、PR阴性者，差异有统计学意义(P=0.002，P=0.001)。目前研究表明，ER、PR阳性者乳腺癌恶性程度低、预后较好，而AR与ER、PR阳性表达呈正相关。有研究报道，ER阳性乳腺癌患者AR阳性往往预后良好[11]，ER阴性乳腺癌患者AR(阳性)却是预后不良的指标[12]。因此，AR也可能是乳腺癌恶性程度低、预后好的另一个重要指标[13]。

本研究中，585例病例分为Luminal A型165例，Luminal B型237例，HER-2过表达93例，三阴性组90例，组间AR阳性表达率差异有统计学意义(P=0.006)；Luminal B型阳性表达最高。于琦等[14]指出，Luminal A型组中表达最常见，与本研究相同，Luminal B型组与三阴性组比较，Luminal B型组AR阳性表达率高于三阴性组(P=0.000)，非三阴性组与三阴性组比较，前者表达略高(P=0.017)。2006年由Bryan[15]等首次提出三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer， TNBC)，国内目前约1/4患者为TNBC[16]，与非三阴性乳腺癌(non-triple negative breast cancer， non-TNBC)相比肿瘤直径较大，患者较年轻，淋巴结转移发生率高，组织学分级多为Ⅲ级，容易出现局部复发，远处转移率较多，预后差，死亡率较非三阴型高[17-18]。本研究中，TNBC组AR阳性表达为37%，与Luo[19]报道27.7%相比略高，而TNBC不适于内分泌治疗，化疗欠敏感，因此，AR在乳腺癌的表达有可能成为乳腺癌尤其是TNBC内分泌治疗或靶向治疗的靶点。但本研究样本量较小，仍需进一步研究。

实验结果显示，肿块≤2 cm组中AR阳性率(56%)较肿块>5 cm(42%)组明显增高，说明乳腺癌组织中AR阳性表达率与肿块大小有关，国内有人研究95.3%癌组织在≤2 cm肿瘤AR阳性表达[8]，也有报道78.9%癌组织在≤1 cm肿瘤AR阳性表达[7]，而肿瘤直径≤3 cm且>1 c m、肿瘤直径>5 cm者，阳性表达率分别为64.1%、47.5%(P=0.045)，相对较低。本实验3组间比较差异无统计学意义(P=0.071)，可能与样本量较小有关。结果显示TNM分期为Ⅰ期和Ⅱ期乳腺癌组织AR阳性表达率高于Ⅲ期和Ⅳ期(P=0.03)，国内外均报道过AR阳性表达率与TNM分期有关[20-21]。也有文献报道[22-23]，AR阳性表达率与淋巴结转移有相关性，本文结果差异无统计学意义(P=0.102)。

综上所述， AR可能与乳腺癌恶性程度有关，其高表达预示着肿瘤恶性程度较低，可用来判断预后。本文TNBC有部分AR阳性表达，但由于AR阳性表达相对较弱，多为+ ～++，且TNBC中仅1例表达为+++，因此AR能否成为乳腺癌尤其是TNBC新的治疗靶点，还需进一步扩大样本量。AR可作为疾病转归的评估指标，能在一定意义上指导治疗[24]，未来将会得到更多重视。