噻虫胺原药的高效液相色谱测定

刘玉琪， 杨俊柱

(1.合肥市第八中学，安徽 合肥 230071；2.安徽省化工研究院，安徽 合肥 230041)

引 言

噻虫胺化学名称(E)-1-(2-氯-1,3-噻唑-5-基甲基)-3-甲基-2-硝基胍(结构式见图1),由拜耳公司和日本Takeda武田公司共同开发，是一种活性高、具有内吸活性、触杀和胃毒作用的新烟碱类广谱杀虫剂。适用于叶面喷雾、土壤处理使用。对水稻稻飞虱、小麦蚜虫、番茄烟粉虱和韭菜韭蛆具有较高活性和较好防治效果[1]。

图1 噻虫胺结构式

有关噻虫胺的常量分析和残留检测主要涉及原药、制剂和土壤、蔬菜等，大多采用液相色谱法[2-4]和液相色谱-质谱法[5-6]，但均未涉及对噻虫胺及其异构体的分析，而根据其结构式可以看出，其存在E式和Z式两种异构体，且二者生物活性和药效均不一样，故分离并检测其有效异构体具有十分重要的意义。本文采用正相高效液相色谱法进行分离和外标法定量，具有简单、迅速、准确度高、精密度好等特点。

1 实验部分

1.1 试剂及仪器

正己烷、四氢呋喃，色谱纯；噻虫胺标准品物质，≥98.5%，由国家农药质检中心(沈阳)提供。

安捷伦1 100液相色谱仪，具可变波长紫外检测器；色谱工作站；微孔过滤器，0.45 μm有机滤膜；进样针：20 μL；超声波清洗器。

1.2 液相色谱操作条件

色谱柱：SiO2, 200×4.6 mm(id)×5 μm不锈钢柱；柱温：35 ℃；流动相：v(正己烷)∶v(四氢呋喃)=100∶4，经滤膜过滤并超声脱气10 min；流速：1.0 mL/min；检测波长：260 nm；进样量：5 μL；保留时间：噻虫胺6.9 min，噻虫胺Z体8.1 min(图2、图3)。

图2 噻虫胺标准样品HPLC谱图

图3 噻虫胺原药HPLC谱图

1.3 测定步骤

1.3.1 标准溶液的配制

称取噻虫胺标准品0.04 g(准确至0.000 2 g)于50 mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，超声振荡5 min，取出恢复至室温，摇匀备用。

1.3.2 试样溶液的配制

称取含噻虫胺0.04 g(准确至0.000 2 g)的试样于50 mL容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，超声振荡5 min，取出恢复至室温，摇匀，经微孔过滤器过滤，滤液待用。

1.3.3 测定和计算

在上述操作条件下，待仪器基线稳定后,连续进数针标准溶液，待相邻2针峰面积变化小于1.2%后，按标准溶液、试样溶液、试样溶液、标准溶液的顺序进行液相色谱测定。

试样中噻虫胺的质量分数(X)按式(1)计算。

X=(A2×m1×P)/(A1×m2)

(1)

式中：A1为2针标样溶液中噻虫胺峰面积的平均值；A2为2针试样溶液中噻虫胺峰面积的平均值；m1为噻虫胺标准物质的质量，g；m2为试样的质量，g；P为噻虫胺标准物质的质量分数,%。

2 结果与讨论

2.1 检测波长的优化

对噻虫胺标准溶液进行200 nm～300 nm紫外扫描，其在260 nm左右吸收最大，且杂质峰较小，噻虫胺及其异构体和杂质峰的分离度高，因此，设定检测波长为260 nm。

2.2 色谱柱的选择

在分析过程中，选择了反相色谱柱，甲醇、乙腈与水的混合溶液，改变各成分的配比，噻虫胺及其异构体的分离效果均不理想，且分析时间较长。因此，选用正相色谱柱。

2.3 流动相的优化

分析用v(正己烷)∶v(四氢呋喃)=100∶4为流动相，流速为1.0 mL/min时,出峰时间短,峰形对称、分离度高。

2.4 重复性实验

在选定的色谱操作条件下，对同一样品平行测定5次，求得其标准偏差为0.16；相对标准偏差为0.17%(见表1)。

2.5 添加回收率实验

取5份已知含量的噻虫胺试样，分别加入一定量的噻虫胺标准物质，在相同色谱条件下进行重复测定，测得其平均回收率为99.50%(见表2)。

表1 重复性实验

表2 添加回收率实验

2.6 线性相关实验

将10 mg/mL噻虫胺标准溶液用流动相稀释配得一系列标准溶液。按上述液相色谱条件测定，以噻虫胺标准溶液及其峰面积作标准曲线，得到线性回归方程：y=166.86x-3.8811，相关系数：r2=0.999 4(见表3)。

表3 线性相关试验

3 结语

本方法重复性好、准确度高、线性关系良好，能很好地用于噻虫胺原药及其制剂的定量分析。