不同免疫检验方法用于检测抗HIV结果的可靠性比较探究

郭仁明

（铁法煤业集团总医院检验科，辽宁 调兵山 112700）

艾滋病又被称为获得性免疫缺陷综合征（AIDS），是由于人体感染HIV病毒而引发的一种传染性疾病[1]。T淋巴细胞是构成人体免疫系统最重要的因素，HIV病毒正是通过入侵机体T淋巴细胞，以破坏人体免疫系统，使人体抵抗力和免疫力降低，因而极易感染各种类型疾病，甚至会引发恶性肿瘤，因而具有较高的致死率，严重影响人们的身体健康及生活质量[2-3]。随着艾滋病患者的不断增多，我国对艾滋病的重视程度也越来越高，通过宣传教育提升人们的疾病防范意识，并采取较多的治疗和预防措施，使得艾滋病的发病情况逐渐得到改善。目前，临床上对于AIDS病还缺乏特效的治疗手段，因而临床筛查和及早确诊，预防通过性及血液制品等途径的继续传播，是控制AIDS病进一步传播的有效措施。临床上对于HIV检测的方法主要有三种，即双抗原夹心ELISA法、金免疫层析试验、和间接酶联免疫吸附试验，然而这三种方法检测结果的可靠性还存在一定的争议[4]。鉴于此，本研究以我院所收治的75例感染HIV患者作为研究对象，提取血清后分别给予上述三种方法予以检测，对比检测结果的可靠性。现将整个研究结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料：选取我院在2014年8月至2017年6月所收治的75例HIV患者作为研究对象，所有患者均经严格的检查，并确诊感染HIV。其中男性42例，女性33例，患者年龄18～55岁，平均年龄为（31.4±2.5）岁。通过免疫印迹法检查，发现75例患者中49例HIV抗体阳性，26例HIV抗体阴性。

1.2 方法

1.2.1 材料、仪器、试剂：抗HIV阳性质控血清，由北京康彻思坦生物技术有限公司提供，浓度4 NCU/mL；血液保存液Ⅱ、Ⅲ，由广州费森尤斯卡比医疗用品有限公司提供；人类HIV抗原抗体诊断试剂盒，由法国Bio-Rad公司提供；340Rt酶标仪（奥地利）、DEM-Ⅲ型自动洗板机（北京拓普）、可调移液器、恒温水箱；国产免疫金标试纸卡等。

1.2.2 检测方法：①ELISA检测：包括双抗原夹心法与间接酶联免疫吸附法两种类型，在对抗HIV进行检测时，应当严格依照试剂使用说明实施操作。②胶体金免疫层析试验：首先将免疫金标试纸相应加样区放置于患者血清样本中，放置时间为10 s左右，然后观察并记录试纸的颜色变化，如果观察到2条红线，则表明检测结果为阳性，如果仅观察到l条红线，则表明检测结果为阴性，而对于阴性标本其观察时间应控制在30 min以上。③免疫印迹法[5]：采集患者血液，并经PAGE分离出血清，然后将患者血清转移至固相载体，其中固相载体通过非共价键形式进行蛋白质吸附，且不会影响蛋白质多肽类型及其生物活性。将固相载体中蛋白质及多肽作为抗原，将其与所对应的抗体进行免疫反应，然后与酶或是同位素标记的另一抗体进行反应，通过底物显色及放射自显影技术对电泳分离出的蛋白成分进行检测。

1.3 评价指标：以免疫印迹法的检测结果作为金标准，观察并记录三种检测方法对于抗HIV检测结果的敏感性、特异度、准确度，评价三种检测方法的可靠性。

表1 三种检测方法检测结果比较

1.4 统计学方法：运用SPSS19.0统计分析软件对此次所观察的数据资料进行统计学分析，其中计数资料以百分比（%）表示，并施以χ2检验，若结果有P＜0.05，则表示组间比较差异明显，具有统计学意义。

2 结 果

双抗原夹心ELISA法检测的敏感度为96.08%（49/51）、特异度为92.31%（24/26）、准确度为97.33%（73/75）；金免疫层析试验法检测的敏感度为96.0%（48/50）、特异度为96.15%（25/26）、准确度为97.33%（71/73）；酶联免疫吸附试验法检测的敏感度为92.16%（47/51）、特异度为84.62%（22/26）、准确度为92.0%（69/75）。见表1。

3 讨 论

艾滋病是由于人体感染HIV病毒而引发的一种严重的传染性疾病。T淋巴细胞是人体免疫系统最重要的构成部分，HIV病毒可以通过入侵机体T淋巴细胞，使其溶解、凋亡，从而对人体的免疫系统造成严重的破坏，使人体抵抗力和免疫力降低，因而极易感染各种类型疾病，甚至会引发恶性肿瘤，因而具有较高的致死率，严重影响人们的身体健康及生活质量。AIDS病具有较强的传染性，其传播途径主要包括垂直传播、母婴传播、性传播及血液传播等，目前，临床上对于AIDS还缺乏特效的治疗方法，因而，加大临床筛查力度和及早确诊，预防通过性及血液制品等途径的继续传播，是控制AIDS病进一步传播的有效措施。

对艾滋病进行有效的预防和控制，其前提是要有一种有效的检查方法，目前临床上常用的HIV检测方法包括双抗原夹心ELISA法、金免疫层析试验和间接酶联免疫吸附试验法，而予以确诊的金标准为免疫印迹法[6]。临床上对于上述三种检测方法用于抗HIV检测结果的可靠性方面还存在一定的争议，本研究以我院所收治的75例HIV患者作为研究对象，对其分别予以上述三种方法进行检测，结果表明，双抗原夹心ELISA法检测的敏感度、特异度及准确度分别为96.08%、92.31%、97.33%；金免疫层析试验法检测的敏感度、特异度及准确度分别为96.0%、96.15%、97.33%；酶联免疫吸附试验法检测的敏感度、特异度及准确度分别为92.16%、84.62%、92.0%。三种方法在检测抗HIV的敏感性、特异度、准确度均较高，而双抗原夹心ELISA法具有更高的敏感性和特异度，且操作过程简便，对设备及试剂的要求也较低，适宜实验室中进行大规模的检验。

综上所述，三种检测方法中，双抗原夹心ELISA法在HIV检测中的灵敏度比另两种方法均偏高，并具有较强的特异度和准确度，且其操作简便，可靠性高，具有广阔的临床的应用价值。