丹参川芎嗪注射液中丹参总酚酸的含量测定分析*

袁 园

(河南省中医药研究院 ，河南 郑州 450004)

丹参总酚酸是丹参中的活性成分，对血小板有较好的抑制作用，还具有抗脂质过氧化、纤维蛋白溶解、抗凝等功能，可以对患者的微循环进行改善，通过多种途径对患者的心肌进行保护[1]。丹参川芎嗪注射液主要是由丹参总酚酸提取物与盐酸川芎嗪复合而成的制剂，可以对患者的动脉血管进行保护，同时可以起到养护心脏以及对冠状动脉扩张的作用，在心肌梗死患者以及心肌缺血患者治疗中的应用价值较高。丹参川芎嗪注射液中丹参总酚酸的质量直接对其治疗的质量造成影响[2]，因此，对丹参川芎嗪注射液进行相应的质量控制，对患者治疗的疗效进行保障意义重大。本文主要对丹参川芎嗪注射液中丹参总酚酸的含量测定方法进行了实验研究。

1 药品、试剂与仪器

丹参川芎嗪注射液，贵州拜特制药有限公司产品，批号20150819，20160319，20160321。丹参总酚酸对照品，购自中国药品生物制品检定所，批号111562-200605。UV-2550紫外分光光度计，日本岛津公司产品。

2 方法与结果

2.1 溶液的制备

2.1.1 对照品溶液的制备

将丹参总酚酸对照品经P2O5干燥减压处理24 h，精密称取25.00 mg，置100 mL的量瓶中，用适量的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，吸取10 mL稀释至100 mL，制成1 mL中含 25.00 μg的溶液，作为对照品溶液。

2.1.2 供试品溶液的制备

精密量取丹参川芎嗪注射液10 mL，置60 mL分液漏斗中，加入用盐酸(0.1 mol/L)饱和的醋酸乙酯50 mL，振摇提取，分取醋酸乙酯溶液，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解并定量转移至25 mL量瓶，加甲醇稀释至刻度，精密量取10 mL，以体积分数为100 mL /L 的甲醛溶液稀释至100 mL，摇匀，滤过，取滤液作为试品溶液。

2.1.3 空白样品溶液的制备

按丹参川芎嗪注射液处方比例，取除丹参总酚酸提取物外的甘露醇与盐酸川芎嗪的混合物，照2.1.2项下方法制备空白对照溶液[3]。

2.2 波长的选择

将对照品、供试品溶液、阴性对照溶液和空白对照溶液分别在190～500 nm的范围内放置，进行光谱扫描，结果：供试品溶液与对照品溶液均在283 nm处有强吸收，阴性对照溶液在283 nm处吸收较为微弱，对照品和供试品溶液均在305 nm处吸收较强，以此对丹参总酚酸的含量进行测定。测定结果显示：空白对照溶液在305 nm处不存在吸收的情况。因此，305nm处不会对丹参总酚酸含量的测定造成影响，可以对位丹参总酚酸含量测定的波长[4]。

图1 对照品、供试品和空白对照品的紫外吸收光谱图

2.3 线性关系

精密称取丹参总酚酸对照品5.00 mg，置100 mL的量瓶中；加入适当的水溶解并稀释至刻度；分别吸取0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，10.0 mL，置于10 mL的量瓶中；以体积分数为100 mL /L 的甲醛溶液进行稀释并摇匀。将此溶液和空白对照溶剂放置在305 nm的波长处测定吸光度，并进行线性分析，得到线性方程为：A=0.014 4C-0.000 9，r=0.9999。结果显示：丹参总酚酸对照品线性范围在2.5～50.00 μg/mL之间，其质量分数和吸收度之间线性关系较好。

2.4 稳定性试验

取丹参川芎嗪注射液样品，按2.1.2项下方法制成供试品，分别于放置0，10，20，40，60，120，240，360 min，在305 nm处对吸光度进行测定，吸光度的RSD为0.62%。结果显示：供试品溶液在放置360 min之内，具有较好的稳定性。

2.5 重现性

取同一批丹参川芎嗪注射液样品，制备5份供试品溶液，测定结果显示，丹参总酚酸的含量平均值为每mL含0.418 mg，RSD为1.40%，表明丹参川芎嗪注射液的重现性良好。

2.6 加样回收率

精密吸取已知含量为0.43 g/L的丹参川芎嗪注射液样品5 mL，吸取6份，分别加入 2.1 g/L的丹参总酚酸对照品溶液1 mL，以下按2.1.2项下丹参总酚酸的含量测定方法进行测定。结果显示：丹参川芎嗪注射液的平均回收率为99.63%，RSD为1.37%。

2.7 3批样品测定

按2.1.2项下方法测定3批样品中丹参总酚酸的含量，结果见表1。

表1 3批丹参川芎嗪注射液样品测定结果 g·L-1

3 讨 论

丹参川芎嗪注射液是丹参总酚酸与盐酸川芎嗪提取后的复方制剂，盐酸总酚酸与盐酸川芎嗪的最大吸附波长较为相近，因此，采用分光光度法对丹参总酚酸的含量进行测定。常规情况下，丹参川芎嗪注射液中丹参总酚酸含量的测定会受到盐酸川芎嗪的干扰，但是丹参总酚酸在醋酸乙酯中易溶，而盐酸川芎嗪在水中易溶。因此，本文主要采用酸性醋酸乙酯萃取的方法制备供试品溶液，能够有效对丹参总酚酸与盐酸川芎嗪进行分离[5]。

有研究表明，硝酸铝与丹参总酚酸可以形成络合物，其在一定程度下，可以对波长进行红移，利用此特点可以将盐酸川芎嗪对丹参总酚酸的干扰作用消除。但是，研究发现，硝酸铝与丹参总酚酸所形成的络合物，其稳定性较差，不适合应用于丹参川芎嗪注射液中丹参总酚酸的测定[6]。

综上所述，分光光度法应用在丹参川芎嗪注射液丹参总酚酸含量测定中，具有较高的应用价值，其操作较为简单，在丹参川芎嗪注射液质量控制中的应用效果较好，值得推广。