低血红蛋白糖尿病人在HLC-723G8分析仪上测定糖化血红蛋白方法的探讨

陶纯刚

（镇江市丹徒区人民医院检验科 江苏 镇江 212028）

对于贫血病人由于Hb异常或含量过少，常常导致仪器无法给出测定结果。本试验为解决这个问题而提出，现对实验结果做如下报告。

1.资料与方法

1.1 一般资料

本院内分泌科糖尿病住院和部分门诊患者HbA1c标本20份，其中血红蛋白含量在≥100g/L的标本10份，＜100g/L的标本10份。每次检测前及全部标本检测后进行两个水平质控品测定，均显示检测结果在控。

1.2 仪器与试剂

五分类血球计数仪迈瑞5380，用来测量标本血红蛋白浓度，以便对标本行分组。日本TOSOH HLC 723G8糖化血红蛋白分析仪，所用试剂为仪器配套试剂，质控品为Roche公司生产。所用的采血管均为EDTA-K2抗凝真空定量采血管。

1.3 方法

所有标本均采双份平行血样。首先将患者其中一份EDTA-K2抗凝的全血标本测量其血红蛋白含量，记录结果，并按≥100g/L和＜100g/L分A,B两组。分别将两组标本直接上723G8糖化血红蛋白分析仪测量，并记录结果。然后，将A,B两组对应的另份平行样本以500G/5分钟离心,将离心后A组对应的平行标本用微量移液器吸出300ul血浆加入到先前已测过GHb的A组样本中，使之成为稀释过的A’组样本。对B组标本对应的平行标本则用微量移液器吸出300ul血浆弃去，使之成为浓缩过的B’组样本。充份混均均A’,B’两组标本。分别测定A’,B’组样本血红蛋白含量，记录结果，并上723G8分析仪测量HbA1C含量，并记录全部结果。

1.4 统计学处理

使用SAS9.2统讲软件，根据数据资料求出各组平均值及标准差，以±s表示，组间数据采用t检验。

2.结果

2.1 A组与A’组的数据比较

A组样本为血红蛋白正常范围内标本，A’组为A组经血浆稀释过的试验标本。其中有一个样本经稀释过后血红蛋白浓度太低的缘故，未能测定出HbA1c结果。所以A2及A2’样本数据在计算时未计入。A组样本及A’组样本的HbA1c结果分别为（8.30±1.55)%，（8.31±1.52)%。两均数间比较用t检验，P＞0.05差异无统计学意义。详见表1。

表1 A组与A'组的HbA1c实验数据

2.2 B组与B’组的数据比较

B组样本为血红蛋白低于正常范围标本，B’组为B组经离心去除部分血浆的浓缩的试验标本。其中有一个样本未浓缩前血红蛋白浓度太低的缘故，未能测定出HbA1c结果。所B7及B7’样本数据在计算时未计入。B组样本及B’组样本的HbA1c结果分别为（8.54±1.64)%，（8.52±1.62)%。两均数间比较用t检验，P＞0.05差异无统计学意义。详见表2。

表2 B组与B'组的HbA1c实验数据

3.讨论

实验数据显示，HLC-723G8糖化血红蛋白分析仪对测量分析的样本的血红蛋白浓度是有一定要求的，从实验数据上看，当血红蛋白浓度低于60g/L左右时,就不能给出实验结果。仪器给出的时间对输出信号作积分的可靠值在500～2700mV·s。可见对血红蛋白的浓度是有一定范围要求的。由于采用的是HPLC技术，使用阳离子交换柱，用3种不浓度盐溶液所形成的梯度洗脱液根据血红蛋白所带电荷差异分离出6种血红蛋白，测定分离后的各种Hb含量从而获得HbA1c的百分含量。所以当我们对贫血比较严重的样本采取适当的浓缩，使其Hb在仪器测量范围内测定时，应该对血红蛋白各组分含量的百分比是没有什么影响的。本试验正是基于此假设进行的，试验的数据结果很好的验证了我们的假设。