色谱分析法在对复方红藤合剂进行质量控制中的应用价值

于良生，纪恒胜，梅 涵，赵 磊，孟凡刚，杨国帅

（青岛大学附属医院，山东 青岛 266003）

慢性盆腔炎是一种多发性的妇科疾病。此病可严重影响患者的身心健康。临床实践证实，单用抗生素治疗慢性盆腔炎的效果较不理想。近年来，我院应用自行研制的复方红藤合剂治疗慢性盆腔炎，取得了很好的效果[1]。本文主要介绍复方红藤合剂的处方、制备方法及色谱分析法在对此药进行质量控制[2]中的应用价值。

1 试验材料

高效液相色谱仪（美国Waters公司生产），绿原酸（中国药品生物制品检定所提供，批号为110735-200501），丹参酮ⅡA（中国药品生物制品检定所提供，批号为110766-2005181），当归对照药材（中国药品生物制品检定所提供，批号为120927-200512）。本次试验所用的复方红藤合剂由青岛大学附属医院制剂室提供。

2 复方红藤合剂的处方与制备

2.1 处方

红藤 20 g，丹参 20 g，金银花 20 g，党参 15 g，当归 12 g，木香10 g，赤芍10 g，茯苓10 g，陈皮6 g，甘草5 g。

2.2 制法

取红藤、丹参、金银花各2㎏,党参1.5 ㎏,当归1.2㎏，木香、赤芍、茯苓各1㎏，陈皮0.6㎏，甘草0.5㎏，置于中药提取器内，加入洁净水100L后浸渍2h,加热煎煮90min，滤出药液，在药渣中再加50L的洁净水加热煎煮1h,合并两次所得的药液，静置沉淀12h，取上清液浓缩至25L，灌装（250ml/瓶），封口，在116℃的环境下进行40min的灭菌处理，即得。

3 复方红藤合剂的质量控制[3]

3.1 性状

复方红藤合剂应为深棕色的汤剂，其味苦、微甘。

3.2 成分鉴别

3.2.1 绿原酸的鉴别[4]取本品10 ml，蒸干,加甲醇5 ml使其溶解，作为供试样品溶液备用。另取绿原酸对照品，加甲醇制成每1 ml含1 mg绿原酸的溶液，作为对照样品溶液。采用薄层色谱法进行试验，吸取供试样品溶液10～20μL、对照品溶液10μL，分别点于以同一羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶H薄层板上,以醋酸丁酯－甲酸－水（7:2.5:2.5）的上层溶液为展开剂进行展开，取出晾干，置于紫外光灯（波长为365 nm）下检视。在供试样品（复方红藤合剂）的色谱中，在与对照样品的色谱相应位置上，显示出相同颜色的荧光斑点[5]。

3.2.2 当归的鉴别[6]取本品30 ml，将其蒸干，在残渣中加入无水乙醇1 ml使其溶解，作为供试样品溶液备用。另取当归对照品1 g，加入石油醚（温度为60～90℃）20 ml，进行超声波处理15 min，进行滤过并蒸干，在其残渣中加入无水乙醇1 ml使其溶解，作为对照样品溶液。采用薄层色谱法进行试验，分别吸取上述两种溶液各5μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正己烷－醋酸乙酯（比例为9：1）为展开剂将其展开，取出晾干，置于紫外光灯（波长为365 nm）下进行检视。经检视，在供试样品的色谱中，在与对照样品色谱相对应的位置上，显示出相同颜色的荧光斑点[7]。

3.3 丹参酮ⅡA（C19H18O3）含量的测定[8]

3.3.1 色谱条件 色谱柱：Thersil-Keystone150.0 mm×4.6 mm,ODS;流动相：甲醇－水（80:20）;柱温：室温；流量：1 mL-1;检测波长：270 nm；理论板数按丹参酮ⅡA峰计算，应大于20000。

3.3.2 对照样品溶液的制备 取丹参酮ⅡA对照样品10 mg，置于棕色量瓶内，加入甲醇，制成每1 ml含20μL丹参酮ⅡA的溶液,即得。

3.3.3 供试样品溶液的制备 取本品10 ml置于具塞锥形瓶中，加入叔丁基甲醚30 ml，进行超声波处理30 min，放冷，吸取有机层并将其放入试管内，于40℃的水浴中用氮气吹干,在残渣中加入200μL的甲醇使其溶解，即得。

3.3.4 丹参酮ⅡA的含量测定 取10个批号的复方红藤合剂，分别制成供试样品溶液。分别精密吸取对照样品溶液与供试样品溶液各10μL,注入高效液相色谱仪中进行测定。测定结果显示，各批次样品中丹参酮ⅡA的含量均＞0.41mg/ml。详情见表1。

表1 对各批次样品中丹参酮ⅡA含量进行测定的结果Tab 1 Results of content determinations （n=10，mg/mL）

4 讨论

复方红藤合剂具有清热解毒、活血化瘀、行气止痛的功效，主要用于治疗慢性盆腔炎、附件炎等妇科疾病。此药的规格为每瓶250 ml，其用法是：在饭前30 min服用，0.5瓶/次，2次/日。经检测，我院研制的复方红藤合剂符合中国药典2010年版一部[9]（附录ⅥD）中“中药合剂”项下相关的规定。本次试验采用薄层色谱法对“复方红藤合剂”处方中几个具有代表性的成分进行鉴别，结果证实，该方法的专属性强，可对复方红藤合剂中的有效成分进行准确的定性鉴别。本次试验采用高效液相色谱法对复方红藤合剂中丹参酮ⅡA的含量进行测定，也取得理想的效果。

总之，色谱分析法可用于对复方红藤合剂中的有效成分进行定性鉴别及定量分析，在对复方红藤合剂进行质量控制中的应用价值较高。