6味中草药添加对鲫鱼诱食和生长的影响

陈思航， 路宏朝， 尚书凤， 王 琦， 颜文博， 王杨科

(陕西理工大学 生物科学与工程学院， 陕西 汉中 723000)

目前，饲料添加剂在水产养殖中已成为增产、增殖的常见方法。然而，长期使用化学药物、抗生素甚至激素，将导致食品安全、药物残留、耐药性以及水体环境污染等问题的出现。因此，有关国际组织对某些抗生素和化学药物在水产养殖中的应用作了限制[1]，由此可见，减少乃至禁止抗生素在饲料中添加，将成为饲料产业发展的趋势。所以，研究与开发新的替代药物与开展健康安全养殖就成为水产养殖的发展方向，中草药以其独特的特点引起了人们的关注。中草药是源于植物的药材，具有天然、高效、毒副作用小、抗药性不强、资源丰富等优点，不仅能够提高水产动物的免疫力，防治常见疾病，而且还可调节营养物质代谢、增进食欲、降低饵料系数、促进生长，并能减少水质污染[2]。研究开发对环境友好、无害、无残留的中草药添加饲料对水产养殖业的持续发展，保证水产品安全及人类健康具有重要的现实意义。本文以鲫鱼为实验对象，探讨6味中草药添加饲料对鲫鱼诱食和生长的影响，为进一步开发鱼用中草药添加饲料提供资料。

1 实验材料

1.1 实验用鱼

实验用鲫鱼购于汉中市鱼类市场，体长(13.13±1.17) cm，体重(38.56±4.07) g，个体均匀，健康活泼，雌雄兼用。

1.2 实验中草药

实验所用中草药购于汉中市第二药材公司，所用中草药分别为甘草、板蓝根、金银花、陈皮、肉桂、杜仲叶粉，为减少误差，确保实验一致性，一次性购买足量6味中药，冰箱保存备用。

1.3 实验饵料

取等量上述6味中药，水洗2次，加水浸泡30 min，第一次煎煮45 min，将药汁倒出，再加水煎煮30 min，过滤，将2次药汁合并浓缩成1 mL药液相当于1 g中药干物质的水煎剂，经高压灭菌后存放于冰箱(4 ℃)中。实验将处理好的中草药药液按适当比例反复喷洒于基础饲料上，搅匀、晾干，制成80 g/kg(Ⅱ组)、160 g/kg(Ⅲ组)、320 g/kg(Ⅳ组)的中草药复方添加饲料备用。

1.4 实验用鱼缸

50 cm×40 cm×40 cm方形玻璃透明鱼缸用于诱食实验，57 cm×43 cm×33.5 cm的方形半透明塑料鱼缸用于生长实验，实验期间鱼缸内盛有经2 d曝气的自来水，并有充气泵不间断充气。

2 实验条件与方法

2.1 实验条件

实验期间水温为16～20 ℃，pH为6～7，实验用水为曝气2 d的自来水。

2.2 诱食实验

触球法诱食观察[3]：在实验开始前15 d，每天在鱼缸内放置吸取了蒸馏水的脱脂棉球，用以训练鱼对棉球的啄咬。实验时，称取3 g实验饵料，用纱布包扎后系上棉线，即为实验组试球(试球半径约为1.5 cm)，为防止饵料漂浮在水面，可用不影响气味的重物坠挂。对照组试球以3 g基础饵料做同样处理。

诱食实验开始前，从鱼缸中随机取出12尾空腹24 h的鲫鱼，放入实验鱼缸中，让其适应20 min，随机确定以鱼缸一点为中心，半径5 cm为有效实验区域(简称有效区)，把预先做好的试剂球悬挂到有效实验区域中心点的水面下5 cm处，投入试球3 min后，实验者在隐蔽处开始连续目测记录鲫鱼进入有效区的次数(啄食试球的总次数)，统计时间为5 min，每组实验重复3次，方法同上。实验过程中应注意：①实验用水均为静置2 d的自来水，水深约15 cm，每次实验进行时都需要保证实验在同一个水平(将充气泵取出)；②每次实验后换水，对照组和实验组交替进行，保持每次实验条件一致；③每次实验结束后彻底清洗玻璃缸并更换实验鱼，用过的实验鱼放入水箱内暂养。由于鱼的取食有时间性，因此每次实验都安排在9：00进行。

2.3 生长实验

摄食生长法[4]：挑选体质健康、大小基本一致的个体，空腹24 h之后称重，随机放入鱼缸内，每缸15尾。实验分为4组。Ⅰ为对照组，饲喂基础饲料；Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ为实验组，分别饲喂制备好的实验饵料。喂食30 d，同时设置1个平行组。采用饱食量投喂法，按体重的2%进行投饵，并根据生长速度、水温条件和摄饵情况作适当调整。每日投喂两次，时间分别为9：30和14：30，次日8：00换水1/3，31 d逐缸逐尾称重并记录。

测定方法：

增重率=[(实验末鱼体重-实验初鱼体重)/实验初鱼体重]×100%，

成活率=成活尾数/总尾数×100%，

特定生长率=(ln末均重-ln初均重)/饲养天数×100%。

2.4 数据处理

诱食实验以5 min为单位，取实验鲫鱼进入有效区的次数作为观察值，计算各重复观察值的平均数，用平均数±标准差(M±SD)表示。以实验组与对照组数值之差的大小判断实验饵料的诱食效果，差值为正表示诱食反应，差值为负表示抑制反应，用SPSS17.0软件作统计分析。

生长实验的原始数据通过Excel和SPSS处理，求实验组和对照组的平均值与标准差，数据以平均值±标准差(M±SD)表示，并用SPSS17.0软件作t检验。

所有检验结果，当P<0.05视为差异显著，P<0.01视为差异极显著意义。

3 实验结果与分析

3.1 诱食实验数据处理及分析

由表1可见，中草药添加饲料后的各实验组与对照组之间的诱食活性比较，3个实验组与对照组的差值均为正值，比值也均大于1，说明实验组均具有不同程度的诱食效应。经统计学处理，Ⅱ组与对照组相比，诱食活性差异不显著(P>0.05)；Ⅲ组与对照组相比，诱食活性差异显著(P<0.05)；Ⅳ组与对照组相比，诱食活性差异极显著(P<0.01)，同时Ⅲ组与Ⅳ组的差异亦有显著的统计学意义。因此，这三组实验组之间的诱食活性强弱为：Ⅳ组>Ⅲ组>Ⅱ组。

表1 中草药添加饲料对鲫鱼的诱食活性

注：表中*表示与对照组比较差异显著(P<0.05)，**表示差异极显著(P<0.01)

3.2 生长实验的数据处理及分析

不同组实验饵料对鲫鱼生长的影响见表2。从实验对比来看，在同一基础饵料中加入不同比例的中草药并饲喂鲫鱼，增重率较对照组高，尤其是Ⅲ组、Ⅳ组增重率显著高于对照组(P<0.05)。表明饲料添加中草药能够促进鲫鱼的生长。

表2 中草药添加饲料对鲫鱼生长的影响

注：表中*表示与对照组比较差异显著(P<0.05)

比较对照组和各实验组的特定生长率，可见，实验组特定生长率均大于对照组，实验组随中草药浓度的增加，特定生长率增大，显示添加中草药对鲫鱼生长具有促进作用。

4 讨论与结论

4.1 中草药添加饲料对鲫鱼的诱食效果

鱼类的摄食活动是由不同的感受器，如化学、视觉、机械等感受器，尤其是化学感受器受到刺激，引起的吞咽反射。诱食剂的作用正是这样，随饲料溶于水，会刺激鱼类的嗅觉和味觉，影响鱼类的摄食活动。

通常认为，中草药添加饲料的诱食效果主要取决于水产动物对其气味、味道的嗜好[5]。由于不同物质分子结构上的差异，鱼类嗅觉与味觉感受器对它们的识别能力及敏感性均不同[6]，所以，诱食与鱼类自身的生物学特性及生理机能有关，如张琳琳等发现鲈鱼对肉桂等有一定的趋避反应，而郭永军等[7]实验表明，肉桂对鲤鱼具有诱食作用。目前知道，水产动物摄食引诱物质主要是氨基酸类、生物碱和核苷酸等物质[8-9]，同时，具有芳香性、甜味性或苦味性的中草药都不同程度具有诱食作用，且不同中草药提取物起效所需的浓度也不同。

本实验中，所采用6味中药中的陈皮、肉桂，含有肉桂醛、柠檬烯、月桂烯等挥发油，被较多的实验研究证实具有较好的诱食效果[7，10-12]。甘草虽未见报道作为鱼类诱食剂，但甘草含的甜度(相当于蔗糖的300倍左右)是可以提高和扩展诱食因子的作用范围。

诱食作用及效果不仅与诱食活性成分有关，也与其浓度有关。本实验发现，在所设定的浓度范围内，中草药添加的浓度越高，诱食效果越好。然而，并不是浓度越高越好，梁思析等[13]用黄柏水抽提液浓度为0.005%以上时有引诱作用，至0.05%浓度时，引诱效果较好，但当浓度超过5.0%时，引诱效果就没有再增加。陈振昆等[14]实验表明，浓度0.10%陈皮对草鱼诱食作用最佳，当陈皮添加量达0.25%以后，再增加添加量，其诱食作用反而减小，当添加量达3.00%时，其诱食作用完全消失。可见，诱食剂的添加还要控制浓度。

4.2 中草药添加饲料对鲫鱼生长的影响

中草药含有多种活性物质和天然营养物质，可以增进食欲，促进机体的代谢和蛋白质以及酶的合成，提高营养物质的利用率，进而加快水产动物的生长发育，提高饵料转化率，降低饵料系数，增强水产动物免疫力和抗应激能力，改善水产品品质。

本实验选用的6味中草药，其单味药对鱼类生长的影响，已有文献报道[15-20]，结果显示，添加单味中草药对不同鱼类生长有积极的作用，可以不同程度地提高鱼体的增重率和生长性能，降低饲料系数。本实验6味中草药配伍的复方制剂添加于常规鱼饲料中，提高了鲫鱼的增重率、特定生长率和成活率，显著促进了鲫鱼生长，提高了饲料利用率。其机理可能与以下三方面有关：首先，此中草药复方添加，具有较好的诱食作用，增加鱼的摄食，促进生长；其次，中草药含有多种复杂的生物活性物质(生物碱类、黄酮类、多糖类、萜类、微量元素)和营养物质，可起到补充营养的作用，为其生长奠定物质基础；最后，中草药复方添加提高生长性能还可能通过促进对饲料营养物质的消化吸收来实现[2，21-22]。

本实验结果显示，实验组成活率比对照组成活率高，由此说明，这种复方中草药添加饲料有可能通过提高鱼的抵抗能力，从而提高鱼的成活率，反映了中草药添加饲料具有增强鱼免疫力的功效。

因此，鱼类养殖中，使用中草药添加饲料不仅能增强鱼的免疫力、促进鱼的生长，而且环保、健康，是一种值得开发，具有广阔前景的绿色鱼用饲料添加剂，是今后养殖业研究和发展的方向，应该开展更加深入的研究探讨。