猪伪狂犬病发病及其控制净化试验

韩春华

(江苏省南京市六合区畜牧兽医站 211500)

猪伪狂犬病 (Pseudorabies.PR)是由疱疹病毒科、亚科中的猪疱疹病毒I型所引起猪、牛、羊等多种家畜和野生动物感染的一种以发热、奇痒 (除猪外)及脑脊髓炎为主要症状的急性传染病。猪是伪狂犬病的唯一自然宿主，对其危害大。不同阶段猪表现出的症状不同，母猪感染症状有空怀、不发情、配不上种，返情率高达90%，屡配不上，部分胚胎早期死亡、产仔数少、易流产、前后无明显症状、早产、产弱仔，有的延迟分娩；成年公猪是潜在携带者，其携带并传播病毒且不表现症状或突然不能使用；仔猪口吐白沫或流涎 (链球菌和水肿病均无流涎现象) (第七对面神经麻痹)、角弓反张 (链球菌转圈、水肿病半昏迷趴卧不动)(脑干受损)、个别猪触摸反应激烈 (神经末梢受损或并发脑膜炎)、死亡率几乎100%、顽固性拉人样稀粪；断奶以后仔猪：发病率20%～40%，死亡率10%～20%，表现为神经症状、拉稀、呕吐。一耳向前一耳向后，或两耳紧贴脑后，属第五对三叉神经和第六对外展神经机能障碍；中、大猪：临床无症状或类感冒症状，但发生混感时是其中主要潜在病原，起帮凶作用。

伪狂犬基因缺失疫苗注射动物后，动物不能产生针对缺失蛋白的抗体，通过相应缺失蛋白建立的血清学方法可以将感染野毒的血清学阳性猪与基因缺失疫苗猪区分开来。伪狂犬病目前已完成全基因组测序，多种与毒力和免疫原性相关的基因均已被定位，如TK、gG、gE、gB、gC、gD、gI等，其中TK为该病毒主要的毒力基因，目前Bartha、Buk毒株 (缺失gE基因)使用较多。代表疫苗：猪伪狂病活疫苗 (K61株)天然基因缺失弱毒苗，是一种gI、gE双基因缺失弱毒疫苗，保留TK基因，该基因缺失阻断弱毒株回复毒力的可能性，安全性高、产生免疫力快。本次2个试验场均使用扬州威克生物工程有限公司生产的伪狂犬活疫苗Bartha-K61株。

本试验目的拟在综合国内外净化和根除猪场伪狂犬病科技与实践成果的基础上，立足六合区内现有条件和技术，并结合本地实际情况进行技术集成和现场试验示范，以期探索并制订一整套符合六合区实际情况、可操作性强的猪场伪狂犬病控制净化方案，为六合区规模化养猪场实施伪狂犬病控制净化乃至根除规范的制定提供技术支撑。

1 试验材料与方法

本试验于2015年7月至2017年4月，对试验中所选择2个种猪场进行PRV-gE抗体监测，每次样品的采集、检测、阳性猪的隔离处理都10d内完成。

1.1 试验材料

1.1.1 疫苗

猪伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗（Barth-k61弱毒株），国药集团扬州威克生物工程有限公司生产。

1.1.2 试剂

猪伪狂犬病gE/gBELISA检测试剂盒，法国IDvet公司生产，按照 《伪狂犬诊断技术》（GB/T18641-2002）中规定的酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测。

1.1.3 试验动物

2个规模化养猪场（A猪场种母猪约60头、B猪场种母猪约50头）的种猪群，这2个养猪场在2015年1～2月期间进行猪伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗免疫。这2个规模化养猪场的猪群均进行口蹄疫、猪瘟和高致病性猪蓝耳病的正常免疫。

1.2 试验方法

1.2.1 猪伪狂犬病PRV-gE野毒感染抗体与gB免疫抗体检测

首次检测是对全部种猪和后备猪作一次伪狂犬病PRV-gE抗体野毒感染检测，阴性者留作种用。PRV-gE抗体阳性者及时淘汰，或立即免疫gE基因缺失疫苗进行隔离饲养，间隔4～6周后加强免疫1次并检测gB免疫抗体，作为商品猪出栏。二次监测是在首次监测3个月再次进行一次PRV-gE抗体检测，再次淘汰/隔离阳性猪，同时检测gB免疫抗体。第三次监测在连续2次检测结果均为阴性者，每6个月进行一次抽检，每次每群抽检30～60头份，不足30头者全部检测PRV-gE抗体，同时检测gB免疫抗体，若抽检出现PRV-gE抗体阳性，则全群检测并淘汰/隔离阳性猪。连续2次抽检结果均为gE抗体阴性且gB免疫抗体合格率≥70%，则该猪群为净化猪群；否则按照净化步骤循环进行。

1.2.2 猪伪狂犬病gE基因缺失弱毒疫苗免疫

本试验于2015年7月至2017年4月，对试验中所选择2个种猪场进行PRV-gE抗体监测，每次样品的采集、检测、阳性猪的隔离处理都在5d内完成。集中所有的阴性猪只，按照严格的管理措施和生物安全措施饲养，定期免疫、抽检，观察猪群PRV-gE抗体情况。对猪场内所有种猪、后备猪及种猪场内70～80日龄的育成/育肥猪均注射伪狂犬病gE基因缺失弱毒苗，种猪3次/年，即每4个月免疫1次；后备猪配种前免疫2次，育肥/育成猪免疫1次。

1.2.3 饲养管理

严格执行防疫制度，科学制定免疫病种、免疫程序，建立免疫档案；制定隔离制度，坚持自繁自养，严格引种，商品猪实行全进全出，生产区禁止饲养其他动物；根据生产实际，制定消毒计划和程序，全面做好清洁和消毒，落实消毒责任；严格执行生物安全管理措施，实行人员进出控制隔离制度；规范饲养管理行为，加强监测预警。

2 结果与分析

2个猪场不同类别猪群猪伪狂犬病的PRV-gE抗体检测结果见附表。

每个猪场分6次检测，2015年7月首次检测，前4次间隔3个月，共检测380头份，淘汰伪狂犬病阳性猪14头。随着检测次数的增加，猪群伪狂犬病的阳性率不断下降，到第3次检测时全部为阴性，第4次检测时也全部为阴性。连续2次检测阴性后，每隔6个月在2个猪场各抽检50头份，至2017年4月抽检200头份样品，伪狂犬野毒抗体gE均为阴性，免疫抗体合格率gB≧70%，表明2个猪场伪狂犬病达到净化阶段。

3 讨论与结论

全球临床实践均已证实，猪伪狂犬病是一种可以扑灭和净化的疫病。目前美国及欧盟部分国家已经做到了伪狂犬病的净化。本次在六合区开展2个试验种猪场控制和净化猪伪狂犬病的研究结果说明使用gE基因缺失苗进行免疫，试验应用gEELISA方法跟踪监测免疫种群，淘汰伪狂犬病阳性猪，在2个试验场均达到净化伪狂犬病的目的，试验证明，依照我们的技术路线，按照 “检测→淘汰/分群→免疫→检测→淘汰-净化”的程序，采取对野毒感染猪群进行淘汰，对假定阴性猪群实施高密度免疫，同时加强消毒和提高综合饲养管理水平等措施开展猪伪狂犬病净化工作，可以达到净化甚至根除伪狂犬病的目的。

附表 2个猪场不同类别猪群的PRV-gE抗体检测结果