P16自身抗体在宫颈高级别鳞状上皮内病变诊断及预后判断中的价值

张 琳，闫 莉，王家雯，汪靖园*

(西安医学院附属宝鸡医院 1.检验科;2.妇产科，陕西 宝鸡721006)

宫颈癌(cervical cancer)是女性最为常见的恶性肿瘤之一，居女性恶性肿瘤发病率的第二位[1]。随着西方文化对我国社会生活的影响，性生活过早、过频繁及人乳头瘤病毒(HPV)的人群携带率增高，均促进了宫颈癌发病率的增加[2,3]。宫颈癌的发病具渐进性过程， HPV感染宫颈鳞状上皮-宫颈上皮内病变(由低级向高级发展)-宫颈癌。随着我国妇女健康普查及宣教工作的不断深入，多数患者在病程进展至上皮内病变时即可获得明确诊断。其中宫颈高级别鳞状上皮内病变(HSIL)在旧版病理诊断标准中被列为“原位癌”，是一种具有高度倾向发展为宫颈癌的癌前病变状态[4]。然而HSIL的诊断需要宫颈活检，是一种有创操作。HSIL一经诊断可采用宫颈环形电切术(LEEP)[5]。但LEEP术后如何评判及预估预后仍然有待于研究。P16新近被证实为宫颈癌肿瘤标志物，其自身抗体P16 IgG可在宫颈HSIL患者外周血中被检测出[6]。本研究分析外周血P16 IgG对宫颈HSIL的辅助诊断价值及对LEEP术后的预后判断价值。

1 对象与方法

1.1研究对象

2015年8月至2016年8月在我院接受LEEP手术治疗的宫颈HSIL患者为观察组。纳入标准：患者经病理检查明确诊断为宫颈HSIL；患者年龄大于等于18岁；患者无合并生殖系统其他器质性病变；患者无性传播疾病。排除标准：合并严重肝肾功能障碍；合并严重凝血功能障碍；合并严重营养不良；合并自身免疫性疾病；临床资料缺失。同期健康体检女性作为对照组。其中观察组41例，对照组45例。两组一般临床资料比较未见显著差异(P>0.05)，见表1。

表1 两组患者一般临床资料的比较

1.2方法

所有观察组患者均接受同一组医生施行的LEEP手术。观察组治疗前及治疗后1个月、对照组于体检时分别抽取外周血5 ml，检测如下指标：P16 IgG、鳞状细胞癌相关抗原(SCCAg)及金属蛋白酶-9(MMP-9)。P16 IgG的检测采用改良ELISA法，选用玉米多肽抗原作为内参，选择特异性结合指数(SBI)作为P16 IgG的检测值(避免非特异吸收信号的干扰)[7]。对每位患者进行为期1年的随访，记录HSIL复发或恶变并列为疾病进展。

1.3统计学方法

2 结果

2.1两组HPV感染率的比较

观察组患者HPV感染率为100%，显著高于对照组(100.00%,41/41 vs 35.56%,16/45;χ2=39.87,P<0.01)。

2.2两组外周血指标检测结果比较

如表2，观察组患者术前及术后P16 IgG水平均高于对照组(P<0.05)，但术后P16 IgG水平较术前显著降低(P<0.05)。观察组术前MMP-9水平显著高于对照组(P<0.05)，术后观察组MMP-9水平显著降低(P<0.05)且与对照组比较无显著差异(P>0.05)。观察组患者手术前后及与对照组之间在SCCAg上的比较均未见显著差异(P>0.05)。

表2 两组外周血指标检测结果比较

注：▼P与组内术前比较<0.05；▽P与对照组比较<0.05。

2.3各指标对宫颈HSIL诊断价值的ROC曲线分析

ROC曲线分析发现： P16 IgG诊断宫颈HSIL的曲线下面积为0.88，诊断截点值为1.22，敏感性为88.89%，特异性为70.73%，优于MMP-9。

表3 各指标对宫颈HSIL诊断价值的ROC曲线分析

2.4P16IgG对宫颈HSIL患者的预后判断价值

以观察组患者术后P16 IgG水平的中位数为界(1.10)将患者分为低水平组(<1.10，n=21)及高水平组(≥1.10，n=20)，高水平组术后1年疾病进展(复发或恶变)率显著高于低水平组(45.00%,9/20 vs 14.29%,3/21;Log-rankχ2=4.987,P=0.026)。

3 讨论

宫颈癌是临床上最为常见的妇科肿瘤之一，发病机制仍然在探讨之中，从流行病学角度分析宫颈癌的高危人群为HPV感染、性生活不节及不洁[8]。宫颈癌的发生发展是一个慢性渐进性过程，一般可经历慢性炎症、糜烂及上皮内瘤变等过程，最终演变为恶性肿瘤[9,10]。发病年龄年轻化是当前宫颈癌最为突出的流行病学特征，威胁了多数妇女的生命健康，因此早期诊断早期治疗宫颈癌尤为重要。宫颈癌的诊断标准主要依靠病理学检查，在患者宫颈HSIL时期就可确诊[11]。患者一旦确诊为宫颈癌，LEEP手术则成为宫颈HSIL患者的主要治疗方法。但事实上LEEP并不能使得所有患者得到满意的治疗效果，相当一部分患者在术后仍然具有复发的可能[12]，因此寻找一个指标辅助判断宫颈癌患者的LEEP预后尤为重要。近年来P16 IgG已成为多数学者的研究热点，且已证实其对多种肿瘤的早期诊断有重要的作用。

图1 各指标对宫颈HSIL诊断价值的ROC曲线分析

图2 P16 IgG对宫颈HSIL患者的预后判断价值

本文结果显示，观察组患者HPV感染率显著高于健康体检者。这提示HPV感染是宫颈病变的一个主要因素，这与既往报道相吻合[13]。我们的研究进一步对宫颈癌患者的血液学指标进行分析，结果发现，观察组患者术前P16 IgG水平及术后P16 IgG水平均高于对照组，但术后水平较术前显著降低。P16基因通过调控细胞周期使得细胞停滞在G1期而抑制细胞增殖。P16调控肿瘤细胞增殖的早期过程，因而使得其具有一定的早期诊断价值；P16的水平升高可诱发机体产生P16 IgG，并可通过ELISA法检测出来[14,15]。这提示P16 IgG对宫颈HSIL具有一定的诊断价值。同时，本研究显示即便是接受过LEEP手术的患者，其P16 IgG水平仍然高于正常人群，可能的原因为宫颈慢性炎症或HPV感染同样可导致P16基因表达增加[16]。此外，我们的数据还显示：虽然术前观察组患者MMP-9水平高于正常人群，但其在术后水平显著下降并与对照组无显著差异。HSIL状态虽然并未在新版的病理诊断标准中列为癌的范畴，但该种组织学改变具有一定恶性肿瘤的生物学行为，其中MMP-9水平升高可能是病变细胞侵袭性增高的一种反映。LEEP术后MMP-9水平降低至正常，这可能是完整切除病变组织的结果。我们采用ROC曲线对P16 IgG的诊断价值进行分析显示，以1.22为截点值，P16 IgG诊断宫颈HSIL的敏感性及特异性均超过70%，这提示P16 IgG对宫颈HSIL具有较优的诊断价值。我们的研究为探讨P16 IgG是否对LEEP预后的判断具有价值，发现观察组患者术后P16 IgG高水平组术后1年疾病进展率显著高于低水平组。但由于本研究样本量有限，仍然需要进一步扩大样本量进行研究验证。