CysC与RBP联合检测对脑动脉瘤早期诊断的应用探讨

杨秀静，高 勇，王兴业，孙士明，周亚丹，才奇博，朱月平

(齐齐哈尔医学院附属第三医院 检验科，黑龙江 齐齐哈尔161000)

脑动脉瘤(Cerebral aneurysm,CA)是由于局部血管异常改变导致的脑血管瘤样突起，是引发脑出血的常见病因。据统计，每年发生的脑出血病例中有三分之一是由脑动脉瘤破裂引起的[1,2]。CA的死亡率、致残率较高，是危害人类健康的严重疾病。研究表明：CA的发生与多种因素有关。其中高血压、动脉硬化被认为是主要危险因素[3,4]。血清胱抑素C(Cystain C,CysC)是一种低分子量蛋白质，属于第二家族半胱氨酸蛋白酶抑制家族。相对分子质量为13 kD，由120个氨基酸组成[5]。CysC的表达失衡是动脉粥样硬化、高血压、动脉瘤发生发展的重要因素。且有研究表明CysC可以做为预测CA发生及程度变化的诊断指标[6,7]。视黄醇结合蛋白(retinol binding protein,RBP)是在体内负责结合并转运维生素A视黄醇类活性代谢物的一类蛋白质[8]。研究表明：在单纯性高血压、肥胖性高血压、妊娠期高血压患者中RBP表达量明显升高[9-11]。同时高血压是CA发生的重要危险因素。因此对于CA患者血清中RBP和CysC的含量是否会发生变化以及CysC和RBP联合检测对于早期诊断CA是否有临床意义，仍需进一步研究。

1 对象与方法

1.1研究对象观察组随机选择2015年09月至2017年09月在齐齐哈尔医学院附属第三医院神经外科住院经CTA或MRA或DSA确诊的CA患者108例，年龄47±17岁，对照组随机选择同期健康体检者90例，年龄50±20岁。

观察组入选标准应符合如下条件：1)没有任何影响检测结果的生理指征；2)在检测前一周内未服用药物或饮食治疗；3)身体发育及精神正常，无肝脏疾病、内分泌疾病、泌尿系疾病、营养及代谢性疾病、肾脏疾病；4)近半年内没有输血和手术史；5)无酗酒史，无节食、素食、特殊饮食习惯；6)无急慢性感染。

1.2样本采集及检测方法受试对象清晨空腹采集静脉血3.5 ml置生化采血管中，放置20 min，3 000 r/min离心5 min，剔除不合格标本(溶血、脂血和黄疸)，血清保存备用。采用胶乳免疫比浊法测定CysC和RBP水平。CysC参考区间为0.00-1.03 mg/L，RBP参考区间为36.0-72.0 mg/L。

1.3仪器与试剂检测仪器为美国贝克曼AU5800全自动生化分析仪，CysC和RBP检测试剂、校准品和质控品均为北京九强生物公司生产。

1.4质量控制美国贝克曼AU5800全自动生化分析仪由厂家每年校准一次，精密度、准确度、分析测量范围等检测均按照行业标准严格执行。参加国家卫生计生委临床检验中心及黑龙江省临床检验中心的室间质量评价及能力验证均合格。每日按要求进行室内质量控制，室内质控的变异系数在允许范围内方进行试验。

2 结果

2.1血清CysC与RBP的检测结果水平比较及单一检测项目阳性率与联合检测阳性率比较

将受试对象血清检查结果进行统计分析，血清CysC与RBP的数据符合正态分布，对比发现，观察组患者CysC和RBP水平与对照组比较明显增高，统计学具有显著差异(P<0.01)，见图1。观察组CysC和RBP浓度大部分均高于正常高值之上，而对照组CysC和RBP浓度大部分落在0.80 mg/L和60 mg/L附近，处于正常参考值范围内。

图1 血清CysC与RBP的检测结果水平比较

两者联合检测阳性(即联合检测时其中一项为阳性时即判定为联合检测阳性)，将CysC和RBP联合检测其阳性率75%,单独CysC检测或者单独一项RBP检测其阳性率在60%附近，明显低于联合检测的阳性率，统计学具有显著差异(P<0.05)。见表1。

表1 观察组与对照组2项结果比较

与对照组比较:*P<0.01;与联合检测阳性率比较:#P<0.05

根据表2判断，联合检测CysC和RBP可以提高CA检出率的灵敏性。因此，联合检测CysC和 RBP水平对于筛选脑动脉瘤的发生有一定的临床意义。

表2 联合检测对脑动脉瘤检测的价值

将对照组与观察组共198例患者的基本信息进行统计，结果如表3。发现观察组的女性比例，有吸烟史者比例均高于对照组(P<0.05),因此，考虑性别、吸烟是CA发生的危险因素。

表3 两组性别、吸烟情况比较[n(%)]

与对照组相比，#P<0.05；观察组间性别相比，**P<0.01

3 讨论

CA是蛛网膜下腔出血的最常见病因。研究结果证实性别、高血压及吸烟史是引发CA发生的危险因素。女性发生CA的危险度是男性的2倍左右，高血压同时伴有吸烟史的患者CA发病率显著增多。另外，已被证实动脉硬化症是动脉瘤的主要危险因素。动脉硬化的发展包括脂质浸润、血小板活化、血栓形成、内膜损伤、炎性反应、氧化应激、血管平滑肌细胞激活、选择性基质代谢及血管壁重构等过程。其中，炎性反应在动脉硬化的发生与发展中起了重要作用，当血管壁损伤时炎性细胞因子增加，炎性反应介质的刺激促进血管平滑肌细胞分泌组织蛋白酶S及K等，使得这类具有促弹性组织解离特性的半胱氨酸蛋白酶在动脉弹力蛋白损伤处过度表达[12]。而CysC可以强烈地抑制这些半胱氨酸蛋白酶表达。因此，当动脉粥样硬化发生时，CysC可应激性增高[13]。同时CysC 与其组织蛋白酶表达失衡就会促进动脉瘤形成，进而促使动脉瘤增长，甚至破裂[14,15]。因此，CysC水平可在一定程度上反应动脉瘤发生的可能性。统计数据也证实这一理论基础，超过60%的CA患者有CysC水平增加的现象。RBP是体内的一种重要的转运蛋白,以往一直被认为只是结合一转运视黄醇维生素的载体蛋白。近年来发现,它还是一种参与胰岛素抵抗的重要脂肪因子，与肥胖、糖尿病及多种心血管危险因素密切相关[16]。它可以抑制内皮细胞的胰岛素活性，导致血管舒张依赖的一氧化氮水平减弱，促进血管内皮功能的紊乱。通过炎症反应及血管内皮功能失调参与动脉粥样硬化发生[17]，进而导致动脉瘤产生。

通过统计数据，发现也有60%CA患者的RBP水平增高。同时发现有75%的脑动脉瘤患者存在CysC或RBP单一阳性水平，显著高于非脑动脉瘤患者，大大提高脑动脉瘤检出的灵敏度。在临床诊疗过程中，遇到高血压且伴有CysC 和(或)RBP增高的患者，在排除高血压性肾脏损伤后，可高度怀疑CA的发生。因此，联合检测CysC和RBP水平可一定程度上提高脑动脉瘤检出率，为脑动脉瘤的早期诊断提供一定的帮助。本研究的局限性：本实验为回顾性分析，收集的是患有脑动脉瘤的血清标本，没有对入组个体脑动脉瘤的数量及大小进行研究，由于本实验入组标准严格，使得样本收集数量不足，缺少大样本统计分析，存在偶然误差。

综上所述，在脑动脉瘤高危人群中可以通过联合检测CysC 和RBP的浓度水平，早期提示临床医生注意患者脑动脉瘤的发生，也可以作为广大人群的筛查项目，无创风险小，简单快速，经济压力小，值得推广普及。