乳品中硫氰酸钠的含量测定

赵俊英，赵俊明

(1.陇东学院 化学化工学院，甘肃 庆阳 745000；2.山东华宇工学院，山东 德州 253000)

硫氰酸钠是生乳中天然存在的一种活性抗菌体系，少量的硫氰酸钠对乳品起到保鲜作用。国际乳联(IDF)公报234号指出，牛乳中的硫氰酸钠含量是不稳定的，可以达到10～15 mg/kg，但通常的浓度范围是2～7 mg/kg。硫氰酸钠的检测方法有高效液相色谱法[1]、离子色谱法[2]、分光光度法[3]、动力学光度法、红外光谱法等。于超等人采用高效液相色谱法测定乳品中硫氰酸钠的含量[1]，该方法对乳及乳制品中硫氰酸钠有较高的提取率，回收率均在80%以上，该法分析成本较高，而且耗时。陈基耘采用离子色谱法测定乳品中硫氰酸钠的含量[2]，硫氰酸钠质量浓度在0.10～4.00 mg/L范围内与色谱峰面积呈良好的线性，该方法的检出限为0.01 mg/L，但样品的处理过程较为复杂。 本文采用分光光度法测定乳品中硫氰酸钠的含量，操作简单，重现性好，回收率高，特别适用于乳品企业对硫氰酸钠的快速检测[4]。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂

紫外可见分光光度计SPECORD50(德国耶拿公司) 、电子分析天平FA2004N、三氯乙酸(A.R.)、硫氰酸钾(A.R.)、硝酸铁(A.R.)、市售纯牛奶(蒙牛、伊利、特仑苏、夏进)。

1.2 样品处理

准确吸取20.00 mL市售纯牛奶与三角瓶中，为除去牛奶中的蛋白质、脂肪等杂质，边振摇边加入三氯乙酸溶液(200 mg/L)5 mL待混合均匀后静置15min。用定量滤纸过滤于干净的三角瓶中，滤液待用。

2 结果与分析

2.1 吸收波长的确定

取上述含硫氰酸根浓度为10 mg/L的标准溶液，在紫外可见分光光度计中进行全波长扫描。主要数据见表1，以波长为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制的曲线见图1。由图1可以看出，波长在340～450 nm范围内，标准溶液的吸光值逐渐增大，在460～540 nm范围内，标准溶液的吸光值逐渐减小。因此，本文采用的测定波长为450 nm。

表1 吸收波长的确定数据

图1 最大波长的确定

2.2 绘制标准曲线

配制一系列含硫氰酸根浓度为0、2、5、10、15、20、25和30 mg/L的待测溶液。准确吸取5.00 mL硝酸铁溶液(16 g/L)于盛有含硫氰酸根浓度为5 mg/L的25 mL容量瓶中，加入蒸馏水定容至刻度，摇匀待测。测得的数据见表2，以硫氰酸根浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制的标准曲线见图2。由图2可以看出，在硫氰酸根浓度为0～30 mg/L、波长为450 nm时，测得的吸光度和硫氰酸根浓度呈良好线性关系，回归方程为y=0.0258x+0.0976，相关系数为0.9965。当硫氰酸根浓度大于30 mg/L时，绘制的曲线偏离了标准曲线，不适用改曲线计算样品中硫氰酸根的含量。

表2 含硫氰酸根浓度梯度溶液的吸光值数据

图2 硫氰酸根标准曲线

2.3 样品测定

选取蒙牛、伊利、特仑苏、夏进等市售纯牛奶按上述方法进行测定，经多次测定生鲜乳本底吸光值(生乳硫氰酸根为阴性时的吸光值)为0.0854±0.0047，本实验计算中选用0.0901，测定结果表3。

测得样品的净吸光值以及从标准曲线计算出样品中硫氰酸钠含量的数据如下表所示，符合卫生部对乳品中硫氰酸钠含量的规定。由表3可以看出，蒙牛、伊利、特仑苏、夏进等市售纯牛奶中硫氰酸钠的含量分别为0.5581、1.6202、2.1899、3.0078 mg/L，符合国际乳联(IDF)公报中，国内外科学界研究的健康牛奶中硫氰酸钠含量为0.4～22 mg/L的成果。

表3 样品中硫氰酸根含量测定结果

2.4 回收率试验结果

对于以上4种样品(2.3)进行加标回收试验，按上述试验方法1.2制取4种样品的乳清液，分别置于4个标有蒙牛、伊利、特仑苏、夏进的干净锥形瓶中，以备待用。准确吸取10.00 mL 蒙牛、伊利、特仑苏、夏进等市售纯牛奶的乳清液于25 mL容量瓶中，再向其中加入1.00 mL含硫氰酸根浓度为1.0、1.5、2.0、2.5 mg/L的加标溶液，然后准确吸入5.00 mL硝酸铁溶液(16 g/L)用蒸馏水定容至刻度，摇匀待测。

按上述2.3试验方法测定，测得回收率试验结果见表4。由表4可以看出，蒙牛、伊利、特仑苏、夏进等市售纯牛奶的回收率分别为90.6%、96.8%、91.8%、96.4%，满足回收率在80%～120%的要求，表明该方法准确度较高。

表4 回收率试验结果

2.5 干扰测定

以免滤液中含有的三氯乙酸干扰实验，须进行干扰测定。取三氯乙酸溶液5.00 mL于干净的容量瓶中，再加入5.00 mL硝酸铁溶液(16 g/L)，加蒸馏水定容并摇匀，使用紫外分光光度计测定其吸光值。

按上述方法，对样品蒙牛、伊利、特仑苏、夏进等市售纯牛奶进行干扰测定，测定结果见表5。由表5可以看出，干扰测定结果为0.0854±0.0047，本实验计算中选用0.0901。

表5 干扰测定结果

2.6 重现性试验结果

取市售蒙牛纯牛奶五份，按1.2方法制备乳清液，再按2.3方法测定其硫氰酸根含量，测定结果见表6。由表6可以看出，市售纯牛奶蒙牛(1)～(5)的含量分别为0.5775、0.5796、0.5814、0.5849、0.5871 mg/L，且RSD=0.7%，表明紫外分光光度法重现性较高。

表6 重现性试验结果

3 结论

本文采用紫外分光光度法测定硫氰酸钠的含量。在硫氰酸根浓度为0～30 mg/L、波长为450 nm时，测得的吸光度和硫氰酸根浓度呈良好线性关系，回归方程为y=0.0258x+0.0976，相关系数为0.9965，测得蒙牛、伊利、特仑苏、夏进等乳品中硫氰酸根的含量分别为0.5581、1.6202、2.1899、3.0078 mg/L，加标回收率为90.6%～96.8%。结果表明，硫氰酸钠的含量在正常范围内，因此蒙牛、伊利、特仑苏、夏进等乳品不存在任何风险。而且本方法具有操作简便、回收率高、成本低、分析周期短、灵敏度高等优点。非常适合中小企业对乳品中硫氰酸钠含量进行快速检测。