CIK细胞联合加味二陈汤治疗化疗耐药的晚期NSCLC的临床研究

丁 倩，李亚玲，王莉娟，蔡 蕊，吕盼盼，丁浩平，熊绍权

[关键字] CIK；加味二陈汤；肺癌；脾虚痰湿证

化疗作为晚期NSCLC主要治疗方法，自上世纪90年代确立了第3代含铂方案为一线标准治疗的地位以来，由于其不良反应、耐药性以及肿瘤患者免疫力低下等因素，其疗效已达到一个平台，患者获益受到限制，中位PFS为4～6个月，中位总生存期为8～10个月[1]，总生存率提高约 4%[2]。因此，迫切需要寻找化疗耐药后的新治疗策略。细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）是一种肿瘤过继免疫治疗，该方法有副反应少、提高生存质量、延长生存期等优点[3-4]。本研究以CIK细胞联合加味二陈汤治疗化疗耐药的晚期NSCLC患者取得了较好疗效，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 病例资料 选择2013年1～11月在成都中医药大学附属医院肿瘤科自愿接受CIK细胞或联合加味二陈汤治疗的化疗耐药晚期NSCLC患者57例，在充分知情告知的情况下，由患者自行选择不同的CIK治疗方案，根据治疗方案的不同，将患者分为治疗组（n=34）和对照组（n=23），两组一般资料比较无显著差异（P＞0.05，表1）。

1.2 病例选择标准 纳入标准：（1）符合晚期NSCLC病理诊断；（2）已接受一线或二线化疗方案，并耐药；（3）Karnofsky 功能状态评分（KPS）≥60 分，预期生存时间≥6个月；（4）不伴脑转移；（5）中医辨证符合脾虚痰湿证。排除标准：（1）用药间断时间持续＞2 w；（2）观察中合用分子靶向药物等其他抗肿瘤方法；（3）合并心脑血管、肝肾等严重疾病。

1.3 CIK细胞制备及检测 采集外周静脉血50 ml，用血细胞分离机采集单个核细胞（PBMC），淋巴细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化，无菌生理盐水洗涤 2 次后，将 PBMC 按照（1～2）×106/ml的浓度悬浮于无血清培养基中，37℃、5%CO2环境下加入重组干扰素 -γ（IFN-γ，1000 U/ml）培养，24 h 后加入CD3 单克隆抗体（50 ng/ml）和白细胞介素 -2（IL-2，300 U/ml）诱导细胞生长增殖，每3 d半量换液或扩瓶一次，并补充IL-2（300 U/ml）。在第14 d收获CIK细胞，并用流式细胞仪采用荧光抗体法检测T细胞亚群（CD3+、CD56+，即CIK主要效应细胞）比例。 检测病原学阴性、内毒素＜5 Eu后，制备成细胞悬液。

表1 两组基线资料比较

1.4 治疗方法 对照组只接受CIK治疗，治疗组接受加味二陈汤治疗2 w后，联合CIK治疗。

1.4.1 CIK治疗 制备的CIK细胞悬液洗涤后，悬于生理盐水150 ml，用输血器1～2 h内输完，1次/2 d，5次为1个疗程，每疗程间隔3～4 w，所有患者均治疗3个疗程。

1.4.2 中药治疗 加味二陈汤组方：法半夏15 g，天南星 15 g，陈皮 15 g，川芎 10 g，苍术 10 g，茯苓10 g，甘草5 g。合并其他证型者加减用药：如气虚者，加黄芪、人参等益气；血虚者，加阿胶、当归等补血。用法：水煎服，每日一剂，连续用药直至观察达到终点。

1.5 观察指标 （1）无进展生存期（PFS）：为治疗第1 d至出现肿瘤进展、临床进展证据或者因任何原因导致患者死亡的时间。（2）生活质量：在治疗前后，采用KPS评分评价患者生活质量，评分提高≥10分为改善，下降≥10分为降低，提高或下降＜10分为稳定。

1.6 统计学方法 应用SPSS21.0统计软件分析，计数资料采用χ2检验，计量资料采用t检验，等级资料采用ridit检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组PFS比较 治疗组与对照组中位PFS分别为 3.8个月、2.9个月（P＜ 0.05，图 1）。

图1 两组PFS比较

2.2 两组生活质量比较 治疗组的生活质量改善率显著高于对照组（P＜0.05，表2）。

表2 两组生活质量比较[n（%）]

2.3 不良反应 治疗期间未发现明显中药相关消化道反应，如恶心、呕吐等，以及肝肾功损害等不良反应。

3 讨论

目前，肺癌的发病率和死亡率居恶性肿瘤的首位，其中NSCLC占80%以上，5年生存率仅8%～10%[5]，大部分患者确诊时已失去手术机会，一线标准化疗疗效已达平台期，二线化疗有效率一般低于10%，患者难以从中进一步获益[6]。随着分子靶向的研究发展，一部分患者可以从基于表皮生长因子受体（EGFR）基因突变和间变性淋巴瘤激酶（ALK）重排的靶向治疗中获益，但该类治疗也终将耐药，部分患者将恢复化疗。因此，探讨化疗耐药后的治疗策略尤为重要，CIK免疫及中药治疗是重要的选择。

CIK是具有抗肿瘤活性的免疫效应细胞，正常组织中含量极少，能在体外诱导大量增殖，其副作用少、安全性高、杀瘤谱广、肿瘤杀伤活性强、回输后无需外源因子维持等[7]。有报道表明，CIK用于肝癌、胃癌等多种恶性肿瘤可提高临床疗效、增强免疫、降低不良反应等[8-10]，在晚期NSCLC辅助或维持治疗中也取得了类似效果[11-12]。

二陈汤出自《太平惠民和剂局方》，其主要成分半夏、茯苓等，具有理气健脾、燥湿化痰之功效。多项研究提示[13-14]，以二陈汤为主的中药对晚期NSCLC可减轻症状、提高生活质量、降低化疗毒性等，具有抗肿瘤、抑制转移、增强免疫等效应[15-16]。

本研究以CIK细胞联合加味二陈汤治疗化疗耐药的晚期NSCLC，结果显示，治疗组中位PFS（3.8个月）显著长于对照组（2.9个月）（P＜ 0.05），提示加味二陈汤可进一步增强CIK细胞抗肿瘤、延长生存期效果。对治疗前后患者生存质量改善的分析结果显示，治疗组的生活质量改善率显著高于对照组（58.82%vs 30.43%，P＜0.05），与其他研究报道结果一致[17]。安全性分析显示，治疗期间，治疗组未发现有明显中药相关的不良反应，提示CIK联合加味二陈汤治疗安全性好。

综上所述，CIK细胞联合加味二陈汤治疗化疗耐药的晚期NSCLC，可延长患者生存期，提高生活质量，且安全性好，值得进一步研究。