气相法检测α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯的含量

袁晓路，黄齐华，李凯，张 涛

（安徽国星生物化学有限公司，安徽省杂环化学实验室，安徽马鞍山243000）

α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯是合成农药杀菌剂丙硫菌唑的重要中间体。丙硫菌唑主要用于防治谷类、麦类和豆类等作物的病害，其以杀菌活性强、高药效、低毒性、低残留的优点吸引了研究人员的广泛关注。随着丙硫菌唑专利即将在欧美到期，国内掀起了一股建设生产丙硫菌唑的热潮。因此建立丙硫菌唑的中间体α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯的检测方法十分必要。

1 实验部分

1.1 实验仪器

色谱仪：气相色谱岛津GC-2014C;检测器:氢火焰离子化（FID）检测器；色谱工作站：N2000双通道色谱工作站；色谱柱：10%SE-30（45 m×0.32 mm×0.5μm）非极性填充柱。

1.2 气相色谱操作条件

色谱柱的柱温为80℃～230℃程序升温，初始温度80℃的停留时间为5.0 min，升温速率为15.0℃/min，当气化室温度为230℃，停留时间是15 min，检测器的温度为 260℃。色谱柱总压力（N2）200 kPa，载气（N2）压力为 80 kPa；助燃气（空气）60 kPa；燃气（H2）55 kPa，分流比为1∶1。进样体积为2.0μL；保留时间：丙酮约为4.3 min，α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯约为13.0 min。丙酮和α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯的试样色谱图如图1。

1.3 试剂

α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯（99.5%）标准样品；α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯自制样品；丙酮（99.9%）溶剂。

图1 α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯试样色谱图

1.4 测定步骤

（1）制备标准溶液

称取0.05 g（精确至0.0002 g）α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯标准样品置于100 mL容量瓶中，用丙酮溶解并稀释至刻度，摇匀。

（2）制备试样溶液

称取0.01 g（精确至0.0002 g）α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯自制样品置于100 mL容量瓶中，用丙酮溶解并稀释至刻度，摇匀。

（3）不同标准样品的配制

用移液管分别移取 1.0、3.0、6.0、8.0、10.0 mL 标准液于10.0 mL容量瓶中，用丙酮溶剂稀释，摇匀，静置，编号顺序依次为1号、2号、3号、4号、5号。

（4）测定

在上述操作条件不变和色谱基线平稳的状态下，连续注入标准样品溶液，直至连续两针标准溶液的响应值峰面积小于1.5%后，按照样品顺序1～5号，依次从低到高浓度进样。待测样品试样溶液最后连续注入数次，直至试样溶液的连续两次图谱峰面积小于1.5%。

（5）计算

将标准溶液和试样溶液的α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯图谱峰面积分别取平均值，试样中的α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯质量分数ω（%）按下式计算：

式中：A1为α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯标准溶液峰面积的平均值；A2为α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯样品溶液峰面积的平均值；m1为α-乙酰基-α-氯 -γ-丁内酯标样质量，g；m2为 α-乙酰基-α-氯 -γ-丁内酯试样质量，g；φ 为 α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯标样的质量分数。

2 结果与讨论

2.1 色谱柱的选择

本实验首先对非极性SE-30、弱极性SE-54、强极性HP-50三种不同极性的填充柱选取：由于α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯的极性较强，导致在强极性HP-50柱上的保留能力严重，无峰形出现，无法进行测定；在弱极性SE-54柱上虽有峰形出现，但具有少量的拖尾现象，可能会影响检测结果的准确性；在非极性SE-30柱上，峰形较好，无拖尾峰、小杂峰，样品与溶剂能分离完全。因此选用10%SE-30柱作为本实验的色谱柱。

2.2 校准曲线的绘制

采用外标法定量，依次在气相色谱仪GC-2014C注入1～5号不同质量浓度（c）的标样溶液，按照上述操作方法测定，以α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯的质量浓度为横坐标，对应图谱峰面积（А）为纵坐标（如表1），对二者数据进行回归分析，得到的线性回归方程（如图 2）：А=117 116.8c+102.684 2，R2=0.999 23，由此可知：α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯的质量浓度为0.05～0.50 g/L时，线性关系良好。

表1 校准曲线数据

2.3 精密度测定

图2 校准曲线

表2 实验精密度结果

在上述线性范围内，按照上述操作方法，准确称取α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯6个试样品并分别对其测定，实验结果如表2，α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯的标准偏差为0.019 72，变异系数为0.021%。

2.4 准确度测定

表3 实验准确度结果

在5个α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯已知试样中分别加入一定量的α-乙酰基-α-氯-γ-丁内酯的标样，配成一定质量浓度的样品溶液，按照上述操作方法进行测定（如表3），测得平均回收率为99.9%。