马来酸噻吗洛尔滴眼液中有关物质的测定及杂质定性研究

刘荷英 程奇珍 周敏 易巧

摘 要 目的：建立測定马来酸噻吗洛尔滴眼液中有关物质的方法，并对其杂质进行定性。方法：采用高效液相色谱法测定有关物质的含量，色谱柱为ACES C18，流动相为甲醇与4.32 g/L辛烷磺酸钠溶液（冰醋酸调pH至3.0）的混合溶液（50 ∶ 50，V/V）-甲醇（梯度洗脱），流速为1.0 mL/min，检测波长为295 nm，柱温为30 ℃，进样量为20 μL。采用制备液相色谱法制备杂质纯品，色谱柱为YMC-PACK ODS-A，流动相为甲醇-0.01%三氟乙酸（40 ∶ 60，V/V）和甲醇-0.01%三氟乙酸（20 ∶ 80，V/V），流速为8 mL/min，检测波长为295 nm，柱温为20 ℃，进样量为0.8 mL。采用液相色谱串联质谱法进行结构推测，色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C18，流动相为甲醇-5 mmol/L甲酸铵溶液（含0.05%甲酸）（梯度洗脱），流速为0.2 mL/min，柱温为20 ℃，进样量为2 μL；采用电喷雾离子源，以质谱全扫描模式检测母离子，以子离子扫描模式检测碎片离子。采用氢谱、碳谱进行结构确证和推测。结果：马来酸噻吗洛尔检测质量浓度线性范围为0.501～10.02 μg/mL（r=0.999 9）；定量限为3.012 ng，检出限为1.004 ng；精密度试验的RSD为0.2%，稳定性和重复性试验的RSD均小于5%。确证了杂质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的结构，并推测了杂质Ⅳ和Ⅴ的结构。结论：该方法快速、准确、专属性好，可用于马来酸噻吗洛尔滴眼液的质量控制。

关键词 马来酸噻吗洛尔；有关物质；降解杂质；高效液相色谱法；制备液相色谱；液相色谱串联质谱法；氢谱；碳谱；测定；结构推测

中图分类号 R927.1 文献标志码 A 文章编号 1001-0408（2018）16-2208-07

ABSTRACT OBJECTIVE： To establish a method for the determination of related substances in Timolol maleate eye drops， and to conduct qualitative analysis of its degradation impurities. METHODS： HPLC method was adopted for determination of related substance. The determination was performed on ACES C18 column with mobile phase consisted of the mixed solution of methanol and 4.32 g/L sodium octane sulfonate （pH adjusted to 3.0 with glacial acetic acid）（50 ∶ 50，V/V）-methanol （gradient elution） at flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 295 nm， and column temperature was 30 ℃. The sample size was 20 μL. Preparative LC method was used to prepare pure impurities. The determination was performed on YMC-PACK ODS-A column with mobile phase consisted of methanol-0.01% trifluoroacetic acid （40 ∶ 60，V/V） and methanol-0.01% trifluoroacetic acid （20 ∶ 80，V/V） at flow rate of 8 mL/min. The detection wavelength was set at 295 nm， and column temperature was 20 ℃. The sample size was 0.8 mL. LC-MS/MS method was adopted. The determination was performed on Waters ACQUITY UPLC BEH C18 column with mobile phase consisted of methanol-5 mmol/L ammonium formate （0.05% formic acid） （gradient elution） at flow rate of 0.2 mL/min. The column temperature was 20 ℃. The sample size was 2 μL. The electrospray ionization source was conducted， detecting patient ion by MS full scan and fragment ion by daughter ion scan. The structure was confirmed and speculated by 1H-NMR and 13C-NMR. RESULTS： The linear range of timolol maleate was 0.501-10.02 μg/mL （r=0.999 9）. The limit of quantitation was 3.012 ng， and the limit of detection was 1.004 ng. RSD of precision test was 0.2%. RSDs of stability and reproducibility tests were all lower than 5%. The structures of impurityⅠ， Ⅱ and Ⅲ were confirmed， and those of impurity Ⅳ and Ⅴ were speculated. CONCLUSIONS： The method is rapid， accurate and specific. It can be used for the determination of related substance in Timolol maleate eye drops.

KEYWORDS Timolol maleate； Related substance； Degradation impurity； HPLC； Preparative LC； LC-MS/MS； 1H-NMR； 13C-NMR； Determination； Structure speculation

马来酸噻吗洛尔滴眼液是治疗原发性开角型青光眼及无晶状体眼性青光眼的药物。该滴眼液及其原料药的现行标准均收载于2015年版《中国药典》（二部）[1]，滴眼液标准中无有关物质检查项，原料药标准中采用薄层色谱法控制有关物质，而该方法灵敏度和专属性均较差。2017年版《英国药典》[2]中马来酸噻吗洛尔滴眼液及其原料药标准均设置了有关物质检查项，以高效液相色谱法（HPLC）测定杂质B、C、D、E、F和其他杂质，并收载了杂质A、B、C、D、E、F、G、H、I、J的结构。《美国药典》（40版）[3]中仅对马来酸噻吗洛尔原料药标准设置了有关物质检查项，也以HPLC法测定杂质B、C、D、E、F和其他杂质，但色谱条件与2017年版《英国药典》[2]不同。《日本药典》（17版）[4]中仅收载了马来酸噻吗洛尔原料药标准，该标准采用HPLC法，以主成分自身对照法计算单个杂质和总杂质的含量。《欧洲药典》（9.0版）[5] 中仅收载了马来酸噻吗洛尔原料药标准，其有关物质测定方法与2017年版《英国药典》[2]完全一致。目前，国内外有关文献[6-10]报道的马来酸噻吗洛尔滴眼液或原料药中有关物质的测定方法均为HPLC法。有研究将系统适用性试验中通过碱破坏后的样品与《欧洲药典》（9.0版）[5]对比以确定杂质B、D、G[6]；另有研究采用HPLC法测定了马来酸噻吗洛尔滴眼液中主成分和3个可能的降解杂质（其结构与杂质B、D、G结构一致）[10]。此外，未见其他有关马来酸噻吗洛尔降解杂质的报道。有研究认为，马来酸噻吗洛尔进入人体后，噻吗洛尔吗啉环上的碳原子首先被羟化，而后进一步代谢为噻吗洛尔乙醇胺[11]。目前，国内企业生产的马来酸噻吗洛尔滴眼液中添加的抑菌剂有4种，分别为羟苯乙酯、苯扎溴铵、硫柳汞和醋酸苯汞[12]，有关物质测定时需排除抑菌剂的色谱峰干扰。本课题组参考2017年版《英国药典》[2]马来酸噻吗洛尔原料药标准中有关物质测定的色谱条件，建立了马来酸噻吗洛尔滴眼液中有关物质的测定方法，同时通过强制降解试验考察了马来酸噻吗洛尔滴眼液中的主要降解杂质，并以液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）、氢谱（1H-NMR）、碳谱（13C-NMR）对杂质的结构进行了确证或推测，旨在为其质量控制提供参考。

1 材料

1.1 仪器

U3000型HPLC仪，包括U3000四元泵、U3000柱温箱、U3000二极管阵列检测器（DAD）等（美国戴安公司）； LC-6AD型LC仪，包括LC-6AD二元泵、SIL-20A自动进样器、CTO-20A柱温箱、SPD-M20A DAD、FRC-10A馏分收集器（日本岛津公司）；Xevo TQ-S型液相色谱-串联三重四级杆质谱仪，包括Acquity UPLC自动进样器、Acquity UPLC 四元泵、Acquity UPLC 柱温箱、Acquity UPLC DAD（美国沃特世公司）；Bruker 600 MHz核磁共振谱仪（德国布鲁克公司）；MS105型电子分析天平（瑞士梅特勒-托利多公司）。

1.2 药品与试剂

马来酸噻吗洛尔滴眼液[武汉五景药业有限公司，批号：16050101、16040105、16040106，规格：5 mL ∶ 25 mg（按噻吗洛尔计）]；马来酸噻吗洛尔原料药（武汉五景药业有限公司，批号：150207，纯度：>99%）；噻吗洛尔系统适用性对照品（《欧洲药典》（9.0版），欧洲药品质量管理局，ID：001EI2，规格：5 mg/支，含马来酸噻吗洛尔和杂质B、C、D、F的混合物）；辛烷磺酸钠（离子对色谱用试剂，北京百灵威科技有限公司）；甲醇、甲酸、三氟乙酸、甲酸铵均为色谱纯，冰醋酸等其他试剂均为分析纯，水为纯化水。

2 方法与结果

2.1 有关物质测定的HPLC色谱条件

色谱柱：ACES C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：甲醇与4.32 g/L辛烷磺酸钠溶液（冰醋酸调pH至3.0）的混合溶液（50 ∶ 50，V/V）（A）-甲醇（B），梯度洗脱（0～14 min，97.5% A；14～15.5 min，97.5% A→70% A；15.5～25 min，70% A；25～25.5 min，70% A→97.5% A；25.5～32 min，97.5% A）；流速：1.0 mL/min；检测波长：295 nm；柱温：30 ℃；进样量：20 μL。

2.2 制备杂质纯品的LC色谱条件

色谱柱：YMC-PACK ODS-A（250 mm×20 mm，5 μm）；流动相：甲醇-0.01%三氟乙酸溶液（40 ∶ 60，V/V）（流动相①）和甲醇-0.01%三氟乙酸溶液（20 ∶ 80，V/V）（流动相②）；流速：8 mL/min；检测波长：295 nm；柱温：20 ℃；进样量：0.8 mL。

2.3 杂质结构推测的LC-MS/MS条件

2.3.1 色谱条件 色谱柱：Waters ACQUITY UPLC BEH C18（50 mm×2.1 mm，1.7 μm）；流动相：甲醇（A）-5 mmol/L甲酸铵溶液（含0.05%甲酸）（B），梯度洗脱（0～5 min，20% A→35% A；5～8 min，35% A→60% A；8～8.1 min，60% A→20% A；8.1～11 min，20% A）；流速：0.2 mL/min；柱溫：20 ℃；进样量：2 μL。

2.3.2 质谱条件 离子源：电喷雾离子源（ESI）/大气压化学离子源（APCI），正离子化（ESI+）；去溶剂温度：400 ℃；干燥气流量：8 L/h；毛细管电压：1.5 kV；锥孔电压：40 V；母离子扫描模式：质谱全扫描模式检测母离子，扫描范围：m/z 100～1 000；碰撞能量：30 V；子离子扫描模式：子离子扫描模式检测碎片离子，扫描范围根据母离子质荷比而定。

2.4 溶液的制备

2.4.1 供试品溶液 精密量取马来酸噻吗洛尔滴眼液样品适量，加水稀释制成每1 mL中含马来酸噻吗洛尔2.5 mg的溶液，经0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。

2.4.2 自身对照溶液 精密量取供试品溶液1 mL，置于100 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL，置于50 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，即得。

2.4.3 空白辅料溶液 按马来酸噻吗洛尔滴眼的制备工艺制备不含马来酸噻吗洛尔的阴性样品，取适量按“2.4.1”项下方法制备空白辅料溶液。

2.4.4 系统适用性溶液 取噻吗洛尔系统适用性对照品1支，精密加入“2.1”项下流动相（A）2 mL溶解，摇匀，即得。

2.5 系统适用性试验

分别量取“2.4”项下供试品溶液、自身对照溶液、空白辅料溶液、系统适用性溶液各20 μL，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，详见图1。由图1可知，杂质峰之间、主成分与杂质峰之间均能达到基线分离，分离度均大于1.5，空白辅料对测定无干扰。

2.6 强制降解试验

2.6.1 碱破坏 精密量取马来酸噻吗洛尔滴眼液样品和阴性样品各5 mL，分别置于10 mL量瓶中，加2 mol/L氢氧化钠溶液2 mL，置于100 ℃水浴上加热1 h，放冷后加2 mol/L盐酸溶液2 mL中和，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液20 μL，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，详见图2A、图2B。

2.6.2 氧化破坏 精密量取马来酸噻吗洛尔滴眼液样品和阴性样品各5 mL，分别置于10 mL量瓶中，加30%过氧化氢溶液2 mL，室温放置1 h，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液20 μL，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，详见图2C、图2D。

2.6.3 酸破坏 精密量取马来酸噻吗洛尔滴眼液样品和阴性样品各5 mL，分别置于10 mL量瓶中，加2 mol/L盐酸溶液2 mL，置于100 ℃水浴上加热1 h，放冷后加2 mol/L氢氧化钠溶液2 mL中和，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液20 μL，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，详见图2E、图2F。

2.6.4 光照破坏 精密量取马来酸噻吗洛尔滴眼液样品和阴性样品各5 mL，分别置于10 mL量瓶中，于4 500 lx紫外灯下照射24 h，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液20 μL，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，详见图2G、图2H。

2.6.5 高温破坏 精密量取马来酸噻吗洛尔滴眼液样品和阴性样品各5 mL，分别置于10 mL量瓶中，置于100 ℃水浴上加热1 h，放冷后加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液20 μL，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录色谱图，详见图2I、图2J。

由图2可知，马来酸噻吗洛尔滴眼液样品在碱破坏条件下可降解出杂质Ⅰ和杂质Ⅱ，相对于噻吗洛尔峰的保留时间分别为0.24和0.63；在氧化破坏条件下降解出杂质Ⅲ和杂质Ⅳ，相对于噻嗎洛尔峰的保留时间分别为0.11和0.32；在酸破坏条件下主要降解出杂质Ⅴ，相对于噻吗洛尔峰的保留时间为0.50；在光照和高温破坏条件下均降解出杂质Ⅱ和杂质Ⅲ。阴性样品经上述破坏后均发生降解，但其降解产物的色谱峰不干扰杂质Ⅰ～Ⅴ的测定。

2.7 线性关系考察

精密称取马来酸噻吗洛尔原料药10.02 mg，置于100 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取0.5、1.0、2.5、5.0、10.0 mL，置于100 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，得质量浓度分别为0.501、1.002、2.505、5.010、10.02 μg/mL的线性关系考察系列溶液。精密量取上述线性关系考察系列溶液各20 μL，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。以马来酸噻吗洛尔质量浓度（x，μg/mL）为横坐标、峰面积（y）为纵坐标进行线性回归，得回归方程为y=0.388x-0.002（r=0.999 9）。结果表明，马来酸噻吗洛尔检测质量浓度线性范围为0.501～10.02 μg/mL。

2.8 定量限与检出限考察

精密称取马来酸噻吗洛尔原料药25.10 mg，置于10 mL量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1 mL，置于100 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取5 mL，置于50 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，分别精密量取3、1 mL，置于50 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，得马来酸噻吗洛尔质量浓度分别为150.60、50.20 ng/mL的溶液。分别量取上述溶液20 μL，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，并计算定量限（信噪比为10 ∶ 1）、检出限（信噪比为3 ∶ 1）。结果，马来酸噻吗洛尔的定量限为3.012 ng，检出限为1.004 ng。

2.9 精密度试验

取“2.4.2”项下自身对照溶液（批号：16050101）20 μL，按“2.1”项下色谱条件连续进样测定6次，记录峰面积。结果，马来酸噻吗洛尔峰面积的RSD为0.2%（n=6），表明本方法精密度良好。

2.10 稳定性试验

取“2.4.1”项下供试品溶液（批号：16050101）适量，分别于室温下放置0、2、4、8、10、12、24 h时按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。结果，杂质Ⅱ、杂质Ⅲ、其他杂质1、其他杂质2峰面积的RSD分别为2.8%、2.1%、3.6%、2.9%（n=7），表明供试品溶液在室温下放置24 h内基本稳定。

2.11 重复性试验

取马来酸噻吗洛尔滴眼液样品（批号：16050101）适量，按“2.4.1”和“2.4.2”项下方法分别制备供试品溶液和对照溶液，各6份，分别精密量取两种溶液各20 μL，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，并按不加校正因子的主成分自身对照法计算样品中各杂质的含量。结果，杂质Ⅱ、杂质Ⅲ、其他杂质1、其他杂质2的平均含量分别为0.02%、0.05%、0.01%、0.03%，峰面积的RSD分别为3.4%、3.0%、4.8%、3.8%（n=6），表明本方法重复性良好。

2.12 样品有关物质测定

取3批马来酸噻吗洛尔滴眼液样品各适量，按“2.4.1”和“2.4.2”项下方法分别制备供试品溶液和对照溶液，各3份，再按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，并按不加校正因子的主成分自身对照法计算样品中各杂质的含量，结果见表1。

2.13 杂质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的结构确证

取马来酸噻吗洛尔原料药0.1 g，置于10 mL量瓶中，加1 mol/L氢氧化钠溶液1 mL，置于100 ℃水浴上加热6 h，放冷后加1 mol/L盐酸溶液1 mL中和，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，得滤液①（续滤液）。量取滤液①0.8 mL，按“2.2”项下色谱条件进样，采用流动相①进行分离，分别收集杂质Ⅰ、Ⅱ的流出液。取马来酸噻吗洛尔原料药0.1 g，置于10 mL量瓶中，加30%过氧化氢溶液1 mL，室温放置4 h，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，得滤液②（续滤液）。量取滤液② 0.8 mL，按“2.2”项下色谱条件进样，采用流动相②进行分离，收集杂质Ⅲ的流出液。将杂质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的流出液分别于40 ℃水浴上旋转蒸发至干，残渣加少量水复溶，冻干，得杂质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的纯品。采用 LC-MS/MS法对杂质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的结构进行初步推测（分别取杂质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的纯品适量，加水溶解，制成杂质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ质量浓度均为1 μg/mL的溶液，按“2.3”项下色谱与质谱条件进样分析，得质谱扫描的母离子和子离子信息），并采用1H-NMR和13C-NMR对杂质Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ的结构进行确证（溶剂为氘代二甲基亚砜），结果见表2。

2.14 杂质Ⅳ的结构推测

笔者在试验中发现，杂质Ⅳ不稳定，在制备纯品过程中极易发生降解，很难制备其纯品，因此仅通过LC-MS/MS法进行结构推测。精密量取“2.6.3”项下经氧化破坏的马来酸噻吗洛尔滴眼液样品溶液1 mL，置于10 mL量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液2 μL，按“2.3”项下色谱与质谱条件进样分析（为避免污染离子源，通过阀切换将0～1.2 min、2.8～4.6 min的样品溶液切换到废液，不进MS仪），根据各色谱峰的DAD光谱图判断杂质Ⅳ的峰位（色谱图见图3，总离子流图见图4）。杂质Ⅳ在该LC-MS/MS条件下分裂为两个峰，两个峰的DAD光谱图与一级质谱以及二级质谱图完全相同（杂质Ⅳ的DAD光谱图见图5，全扫描质谱图见图6，子离子扫描质谱图见图7），推测两个峰为旋光异构体。由图6、图7可知，杂质Ⅳ的母离子为m/z 333.4，推测为[M+H]+峰；子离子分别为m/z 260.1、214.2、173.2、161.1、130.2、117.1、112.1、74.0，推测杂质Ⅳ为噻吗洛尔噻唑环上的硫原子氧化产物，为l-（叔丁氨基）-3-[（4-吗啉基-1，2，5-噻二唑-1-氧-3-基）氧]-2-丙醇。因其2位碳原子为手性原子，推测其质谱裂解途径见图8。

2.15 雜质Ⅴ的结构推测

由于杂质Ⅴ含量较低，试验中发现对酸破坏条件进行优化后仍无法提高其含量，很难制备其纯品，因此仅通过LC-MS/MS法进行结构推测。同时，马来酸噻吗洛尔滴眼液样品经酸破坏后，辅料羟苯乙酯峰与杂质Ⅴ峰保留时间相近，为避免干扰，用原料药进行酸破坏后分析。称取马来酸噻吗洛尔原料药约10 mg，置于10 mL量瓶中，加2 mol/L盐酸溶液2 mL，置于100 ℃水浴上加热1 h，放冷后加2 mol/L氢氧化钠溶液2 mL中和，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液20 μL，按“2.1”项下色谱条件进样，结果原料药经酸破坏后产生的主要杂质峰与马来酸噻吗洛尔滴眼液样品经酸破坏后产生的主要杂质峰的保留时间和DAD光谱图一致，均为杂质Ⅴ。再量取上述续滤液2 μL，按“2.3”项下色谱与质谱条件进样分析（为避免污染离子源，通过阀切换将0～1.5 min、4.0～9.0 min的样品溶液切换到废液，不进MS仪），根据各色谱峰的DAD光谱图判断杂质Ⅴ的峰位和推测结构（色谱图见图9，总离子流图见图10，杂质Ⅴ的DAD光谱图见图11，全扫描质谱图见图12，子离子扫描质谱图见图13）。由图12、图13可知，杂质Ⅴ的母离子为m/z 313.4，子离子分别为m/z 184.1、152.1、130.2、74.1，推测杂质Ⅴ为噻吗洛尔吗啉环脱氢产物，可能为1-（叔丁基氨基）-3-{[4-（4H-1，4-噁嗪-4-基）-1，2，5-噻二唑-3-基]氧}-2-丙醇，推测其质谱裂解途径见图14。

3 讨论

国外仅有1篇文献报道了噻吗洛尔的核磁数据[13]；虽然2017年版《英国药典》[2]和《美国药典》（40版）[3]中均收载了其多个已知杂质，但均无噻吗洛尔降解杂质的核磁数据。本研究中，经1H-NMR和13C-NMR确证，碱破坏产生的杂质Ⅰ和Ⅱ结构分别与2017年版《英国药典》[2]中的杂质B和D一致，杂质B化学名为3-[（1，1-二甲基乙基）氨基]-2-{[4-（吗啉-4-基）-1，2，5-噻二唑-3-基]氧基}丙烷-1-醇，杂质D化学名为4-（吗啉-4-基）-1，2，5-噻二唑-3-醇；氧化破坏产生的杂质Ⅲ结构与2017年版《英国药典》[2]中的杂质G一致，化学名为4-（吗啉-4-基）-1，2，5-噻二唑-3（2H）-1-氧化物。

对于样品中含量较低或不稳定的杂质，可采用LC-MS/MS法进行结构推测，本研究即采用LC-MS/MS法推测了杂质Ⅳ、Ⅴ的结构。目前已有多篇文献报道了LC-MS/MS法用于杂质的结构推测[14-16]，但该法仅通过质谱推测结果可能产生偏差。对于降解杂质的定性研究，一般可通过强制降解试验来加速药物降解，以提高降解杂质的含量，药物经破坏后杂质含量若能达到20%以上，则易通过制备LC法来分离和纯化杂质，得到杂质纯品后可经核磁、红外、紫外等方法进行结构确证，准确度较高。

马来酸噻吗洛尔滴眼液在氧化破坏、碱破坏、酸破坏条件下均可发生较明显的降解，其中在氧化破坏和碱破坏条件下降解较快、降解率较高。马来酸噻吗洛尔氧化破坏时硫原子首先发生氧化破坏，生成杂质Ⅳ，后醚键水解生成杂质Ⅲ；碱破坏时易生成杂质Ⅰ，后醚键水解生成杂质Ⅱ；酸破坏时加热后吗啉环脱氢生成杂质Ⅴ。其中，杂质Ⅳ、Ⅴ均为未知杂质，且均为首次报道。

综上所述，本方法快速、准确、专属性好，可为马来酸噻吗洛尔滴眼液的质量控制提供参考。

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（收稿日期：2018-02-14 修回日期：2018-06-15）

（编辑：陈 宏）