三阴乳腺癌患者临床病理特征及免疫组织化学指标临床意义分析

党秋红 曹 静 张欢欢 曾宪旭 靳耀锋

乳腺癌是严重危害女性生命健康的肿瘤疾病，随着近年来发病率逐渐提高，已成为最常见的恶性肿瘤之一[1]。三阴乳腺癌(triple negative breast cancERβ,TNBC)是一种特殊的乳腺癌类型，具有发病早、进展快、预后差的特点[2-3]。因其特殊性，传统的治疗方法对于TNBC的病情治疗效果较差。免疫组织化学(immunohistochemistry，IHC)是1种利用免疫学基本原理，对组织细胞进行定位、定性、定量的新技术，是临床上鉴定、诊断恶性肿瘤的有效手段，近年来得到了广泛应用[4-5]。目前，关于TNBC临床病理特征及相关免疫组织化学指标表达与预后相关性的报道较少，基于此，本研究将分析三阴乳腺癌患者临床病理特征及免疫组织化学指标意义，为临床上对于三阴乳腺癌患者的治疗提供参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2010年2月至2016年2月郑州大学第三附属医院收治的三阴乳腺癌患者共110例，为研究组，选取同时期收治的非三阴乳腺癌患者共110例，为对照组，两组患者均为女性，年龄25～76岁，平均年龄(54.3±10.8)岁。纳入标准：临床病理资料完善的患者；全程在郑州大学第三附属医院治疗的患者；术前未接受过化疗或放疗；自愿加入本次研究的患者。排除标准：临床病理资料不完善的患者；因病情特殊，不能配合本次治疗的患者；不愿加入本次研究的患者。

1.2 研究方法

分别对两组患者的患病年龄、月经状态、组织学分级、病理类型、淋巴结状态、临床分期、肿瘤直径大小等临床病理特征进行记录，并比较分析两组患者的差异；采取IHC PV6000二步法[6]，分别检测两组患者ERβ、P-gp、Ki-67的表达情况并进行比较，分析三阴乳腺癌患者免疫组织化学指标表达对临床病理特征的意义。操作方法简述如下：分别取研究组和对照组患者新鲜癌组织标本，经中性10%福尔马林固定24 h,石蜡包埋，连续切片(4 μm),脱蜡，水化，清除活性，滴加二抗(常温0.5 t)，滴加DAB液，自来水冲洗，苏木精复染，0.1%HCL分化，二甲苯透明，中性树胶封固切片，显微镜观察。

1.3 IHC染色评分标准

ERβ染色评分标准：以细胞核呈现棕黄色颗粒为阳性细胞，阳性细胞数<10%，为ERβ阴性；阳性细胞数>10%，为ERβ阳性；P-gp染色评分标准：以细胞呈现棕色或褐色颗粒为阳性细胞，阳性细胞数<10%，为P-gp阴性；阳性细胞数>10%，为P-gp阳性；Ki-67染色评分标准：以细胞核呈现棕黄色颗粒为阴性细胞，阳性细胞数<10%，为Ki-67阴性；阳性细胞数>10%，为Ki-67阳性[7-8]。

1.4 统计学方法

应用SPSS 19.0软件进行统计学分析，计数资料采用χ2检验及精准概率FishERβ检验，生存曲线制作及生存率计算采用Kaplan-MeiERβ方法，单因素生存分析采用Log-rank检验。P<0.05(双侧)为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者临床病理特征

研究组的患病年龄、组织学分级、肿瘤直径大小、分化程度、淋巴结状态、病理类型与对照组有明显差异，差异有统计学意义(P<0.05)；研究组的月经状态相对于对照组，差异无统计学意义(P>0.05)，具体见表1、表2。

表1 两组临床病理特征比较(例，%)

表2 两组患者临床病理特征比较(例，%)

2.2 两组患者预后情况

研究组复发率为19.2%，死亡率为28.1%；对照组复发率为6.4%，死亡率为11.9%。两组比较，研究组复发率、死亡率均高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。通过Log-rank分析法，检测、比较两组患者的总体生存率、无复发生存率，结果显示，研究组总体生存率、无复发生存率均低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，具体见图1、图2。

图1 两组患者总体生存率比较

图2 两组患者无复发生存率对比

2.3 两组患者免疫组织化学指标差异

ERβ在两组患者的阳性表达率分别为62.7%、75.5%，ERβ在研究组的阳性表达明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；Ki-67在两组患者的阳性表达率分别为86.4%、56.4%，P-gp在研究组的阳性表达率明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)；P-gp在两组患者的阳性表达率分别为47.3%、53.6%，两组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表3。

2.4 研究组免疫组织化学指标表达水平与临床病理特征的关系

ERβ阳性表达与患病年龄、组织学分级、肿瘤直径大小显著相关(P<0.05)；P-gp、Ki-67阳性表达与组织学分级显著有关，(P<0.05)；P-gp、Ki-67阳性表达与患病年龄、肿瘤直径大小无相关性(P>0.05)，具体见表4、表5、表6。

3 讨论

乳腺癌是1种特异性较高的恶性肿瘤，不同种族临床病理特征及预后情况存在较大差异，近年来全球患乳腺癌的女性人数显著增多[9]。TNBC是1种常见的乳腺癌类型，因为其特殊的生物学特征，导致治疗药物靶点作用较少，预后情况较差，复发率及死亡率较高，近年来，逐渐成为乳腺癌临床研究的热点和难点[10]。ERβ是1种新型雌激素受体，研究资料显示其对于乳腺癌的发生、治疗和预后情况有重要价值[11]。P-gp是1种重要的耐药蛋白，在体内分布广泛，已有研究显示其水平与乳腺癌化疗效果呈现负相关，从而可用于预测化疗效果。Ki-67是1种非组蛋白，可用于检测增殖，研究表明其能反映乳腺癌恶化程度。

有资料显示，TNBC病理类型主要为浸润性导管癌，患病年龄偏低，且组织学分级多为Ⅲ级，肿瘤体积较大，复发率及死亡率较高[12]。本研究结果显示，TNBC患病年龄低于40岁以下的占17.3%，低于非TNBC患者，浸润性导管癌占TNBC全部病理类型的84.5%，组织学分级为Ⅲ级的占52.7%，肿瘤直径大于2 cm的占75.5%，TNBC总体生存率、无复发生存率均低于非TNBC患者，差异有统计学意义(P<0.05)，研究结果与资料显示相同。国外研究显示，女性绝经前更易患TNBC[13]。本研究结果显示，TNBC患者与非TNBC患者月经状态差异不大，无统计学意义(P>0.05)，与国外报道不一致，这是因为TNBC在不同种族、不同国家之间患者临床病理特征存在较大差异。临床资料显示，ERβ的表达与组织学分级有关[14]。本研究显示，ERβ在TNBC组阳性表达率显著低于非TNBC组，且阳性表达与患病年龄、组织学分级、肿瘤直径大小有关联性，证实了国外研究结果，另外，ERβ阳性表达率较低，也说明TNBC患者预后较差与ERβ的表达存在一定关联，在一定程度上证明了ERβ可作为预测TNBC预后的重要指标。本研究结果显示，P-gp在TNBC与非TNBC组的差异不大，差异无统计学意义(P>0.05)，这与李雯等的研究相似[10]。本研究结果显示，P-gp阳性表达与组织学分级存在显著差异，差异有统计学意义(P<0.05)，与患病年龄、肿瘤直径大小差异不明显，差异无统计学意义(P>0.05)，这与Trock的研究相似，说明通过检测P-gp指标，能反映TNBC病情严重程度，可作为预测预后的指标之一。有研究显示，Ki-67的高表达对于TNBC的预后不利。本研究显示，Ki-67在TNBC组阳性表达率显著大于非TNBC组，差异有统计学意义(P<0.05)，证实了上述观点。研究结果显示Ki-67与组织学分级存在显著差异，表明其能反映TNBC病情严重程度，可作为预测预后的指标之一。另外，本研究显示，Ki-67与患病年龄、肿瘤直径大小差异并不明显，这可能是因为本研究所选TNBC病例较少，且预后情况记录时间较短有关。

表3 两组患者免疫组织化学指标水平比较(例，%)

表4 ERβ表达与临床病理特征的关系(例，%)

表5 P-gp表达与临床病理特征的关系(例，%)

表6 Ki-67表达与临床病理特征的关系(例，%)

综上所述，TNBC的临床病理特征为：患病年龄偏低、组织学分级多为Ⅲ级，肿瘤直径较大，淋巴结转移较易发生，病理类型多为浸润性导管癌，分化程度较低，预后情况较差，ERβ阳性表达较低，Ki-67阳性表达较高。ERβ、P-gp、Ki-67等免疫组织化学指标可作为预测TNBC预后情况的参考指标。