辣椒碱母药气相色谱分析方法研究

昝宏强，武 鹏，姜宜飞＊

（1.贵州省流通环节食品安全检验中心，贵州 贵阳550002；2.农业部农药检定所，北京100125）

1 前言

辣椒碱英文名称：Capsaicin，CAS号：404-86-4，分子式：C18H27NO3，化学名称：［（4-羟基-3-甲氧基苯基）-甲基］-8-甲基-（反）-6-壬烯酰胺。辣椒碱属生物碱类的新型生物农药。辣椒碱对害虫的作用主要体现在干扰新陈代谢，膜损伤，导致神经系统紊乱，主要作用方式为触杀与驱避作用［1］。

目前国内有关辣椒碱母药的分析方法未见公开报道。本文所分析辣椒碱母药是从辣椒干果中提取得到的产品。本文采用气相色谱法，对辣椒碱母药进行定量分析，该方法操作简便、快速、准确，分离效果好，准确度和精密度均能达到定量分析的要求。

2 试验部分

2.1 试剂和溶液 丙酮（色谱纯）；辣椒碱标样，已知质量分数97.5％（由农业部农药检定所提供）；试样：辣椒碱母药（由某公司提供）；内标物：邻苯二甲酸二戊酯，已知质量分数98.01％，不应含有干扰分析的杂质。

2.2 主要仪器 气相色谱仪：Agilent 7890A，具有氢火焰离子检测器和自动进样器；Agilent色谱工作站；色谱柱：30m×0.25mm（id）×0.25μm DB-1701毛细管色谱柱。

2.3 气相色谱操作条件 柱室：50℃，保留1min，以15℃／min升至270℃保留11min；气化室温度：250℃，检测室温度：250℃，载气（N2）：1.0mL／min；氢气：30mL／min，空气：300mL／min，进样体积：1μL，分流比：5∶1，保留时间：邻苯二甲酸二戊酯约：15.2，辣椒碱约20.1min。

辣椒碱标样和母药的气相色谱图（图1、2）。

图1 辣椒碱标样气相色谱图

图2 辣椒碱母药气相色谱图

2.4 测定步骤

2.4.1 内标溶液的配制 称取邻苯二甲酸二戊酯标样0.025g（精确至0.000 2g），置于250mL容量瓶中，加入丙酮溶解，超声10min，恢复至室温后用丙酮稀释至刻度，摇匀。

2.4.2 标样溶液的配制 称取辣椒碱标样0.02g（精确至0.000 2g），置于25mL容量瓶中，用移液管准确加入5mL内标溶液，加入丙酮溶解，超声10min，恢复至室温后用丙酮稀释至刻度，摇匀。

2.4.3 试样溶液的配制 称取含辣椒碱0.02g的试样（精确至0.000 2g），置于25mL容量瓶中，用移液管准确加入5mL内标溶液，加入丙酮溶解，超声10min，恢复至室温后用丙酮稀释至刻度，摇匀。

2.4.4 测定 在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻2针标样溶液的响应值相对变化＜1.5％后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

2.4.5 计算 此辣椒碱标样中含有辣椒碱与二氢辣椒碱，含量计算时将二者加和，以辣椒碱计。辣椒碱保留时间为19.9min，二氢辣椒碱约20.2min。将测得的2针试样溶液和试样前后2针标样溶液中的辣椒碱与内标物峰高之比，分别进行平均。试样中辣椒碱的质量分数ω（％），按下式计算：

式中：

r1──标准溶液中辣椒碱与内标物峰高比的平均值；

r2──试样溶液中辣椒碱与内标物峰高比的平均值；

m1──辣椒碱标样的质量，g；

m2──试样的质量，g；

P──标准品中辣椒碱的质量分数，％。

3 结果与讨论

3.1 色谱条件的选择 辣椒碱为脂溶性物质，故选择丙酮作为样品溶剂。当选择弱极性的HP-5毛细管色谱柱进行分离时色谱峰形较差，改为中等极性DB-1701毛细管色谱柱进行分离后峰形改善。为了得到更好的分离效果和峰形，在DB-1701色谱柱上最终确定使用如下程序升温条件：柱室：50℃，保留1min，以15℃／min升至270℃，保留11min。在此条件下有效成分与杂质能得到很好的分离，峰形对称，基线平稳，能在短时间能得到满意的分析结果。

3.2 分析方法的线性相关性试验 称取辣椒碱标样0.26g（精确至0.000 2g），置于250mL容量瓶中，用丙酮稀释至刻度，摇匀，作为储备液待用。用移液管分别移取该储备液1.25、2.50、3.75、5.00、12.5mL于25mL容量瓶中，用移液管分别准确加入内标溶液5mL，用丙酮稀释至刻度，摇匀。在上述色谱操作条件下进行分析，以辣椒碱与内标溶液质量比为横坐标，相应的峰高比为纵坐标，绘制校正曲线。试验测得辣椒碱线性方程为y＝0.186 9x-0.056 9，相关系数为0.999 1。结果表明辣椒碱在测试的质量浓度范围内线性关系良好。

3.3 分析方法的精密度试验 从同一产品中准确称取5个试样，在上述色谱操作条件下进行分析，测得辣椒碱的标准偏差为0.21，变异系数为2.44％（表1）。

表1 分析方法的精密度试验结果

3.4 分析方法的准确度试验 从已知质量分数的辣椒碱（8.6％）中称取5个试样，从3.2中配制的储备液各取5mL于5个样品中，在上述色谱操作条件下进行分析，测得辣椒碱的平均回收率为100.83％（表2）。

表2 分析方法的准确度试验结果

4 结论

试验建立了气相色谱法检测辣椒碱中有效成分的分析方法。试验结果表明，辣椒碱在测试浓度范围内线性关系良好，方法准确度和精密度较高，具有操作简便、快速的特点，是产品质量控制和应用研究中较为理想的分析方法。