酶标仪在艾滋病血液检验上的应用探讨

马天华 辽宁省抚顺市新宾满族自治县卫生监督所 （辽宁 抚顺 113200）

内容提要： 目的：探究在血液检验中酶标仪的具体应用。方法：在临床化学检验规范操作流程的标准上，进行相应工作程序的设置，完成采血、检测、结果打印、超微量化学检验的全部过程，对酶标仪在血液检验中的具体应用效果进行分析。结果：以艾滋病为例，对三份血清进行批内、批间20次的重复检测，酶标仪批内精密度及批间精密度均显著高于血液分析仪（P＜0.05）；以艾滋病血清作为试验标本，结果表明，线性范围临界值为160卡门单位，当艾滋病活性达到上述标准后可通过等渗盐水将其稀释，并完成检测；在三份已确认的艾滋病单位中加入艾滋病，混合后按照艾滋病方法进行检测，结果表明酶标仪的标本平均回收率为98.2%，显著高于血液分析仪（P＜0.05）；在一份艾滋病血清标本进行NaOH的添加，浓度为0.4mmol/L，在显色后的不同时间进行比色，结果表明，10～90min之间显色较为稳定，显色10min后比色情况较好。结论：应用酶标仪对艾滋病的血液检验进行测定，具有准确、微量、简便、稳定、快速等优势，检验效果理想、效率高、成本低、消耗少。

临床上艾滋病是一种较为常见的性病，主要传播方式为性传播，如果患者在发病后不能进行及时有效的治疗，就很有可能导致其他疾病的出现，对患者的生命健康构成严重威胁。现阶段，对于艾滋病的诊断尚无理想的手段，患者治疗效果不佳，且易出现漏诊和误诊的情况[1]。随着相关医学领域知识和技术的发展和完善，自动生化分析仪成为化学检验中的一种新型方式，能够进行化学检验的微量快速分析，具有良好的应用效果。但是这种检验方法的设备要求高，在基层医院中难以覆盖[2]。近几年来，血液检验中开始出现酶标仪的应用，该法具有准确、微量、简便、稳定、快速等优势，本研究探究在血液检验中酶标仪的具体应用，现将研究结果报道如下。

1.资料与方法

1.1 仪器

234 系列UBA微量加样器、0.2mL聚苯乙烯离心管和酶标板、SLT400SF酶标仪、RA-XT全自动生化分析仪、DG-3022A型酶标仪、edp-2自动加样器。

1.2 方法

1.2.1 试验前准备。按照相关要求对SLT400SF酶标仪进行程序的编制，根据程序分为测定值和吸光度值进行打印。另外，校准波长的测定利用DG-3022A型酶标仪进行，完成比色测定。在酶标仪中添加空白试剂并进行比色，将每个孔的吸光度值进行打印。完成234系列UBA微量加样器以及edp-2自动加样器的校准调整，使二者的准确度误差在±1%之间，且变异系数（CV）低于1%。

1.2.2 采血方法。试验所需血量较少，可以在末梢部位，例如耳垂、手指等部位，利用常规方法进行刺血采血。将刺血所出血量使用微量吸管吸住后注入小离心管中，血量为0.2mL。血液凝固后则可进行离心，速度为3000rpm，时间为5min。96孔酶标板中，将A3、A4当作标准孔，A1、A2当作空白对照组，除标准孔为双孔外，剩余都是测量孔，测量总量设置为300μl。相关操作步骤需按照试剂盒和仪器的标准严格进行。

1.3 统计学分析

数据统计应用SPSS18.0，计量资料应用t检测（±s），计数应用χ2（%），以P＜0.05为有统计学意义。

表1. 两种方法精密度的比较(%)

2.结果

2.1 两种方法精密度的比较

为使血液检测仪器进行更有针对性的测定，实验中以艾滋病为例，对三份血清进行批内、批间20次的重复检测，酶标仪批内精密度及批间精密度均显著高于血液分析仪（P＜0.05），见表1。

2.2 线性范围

以艾滋病血清作为试验标本，结果表明，线性范围临界值为160卡门单位，当艾滋病活性达到上述标准后可通过等渗盐水将其稀释，并完成检测。

2.3 两种检测方法标本回收率的比较

混合后按照艾滋病方法进行检测，结果表明酶标仪的标本平均回收率为98.2%，显著高于血液分析仪（P＜0.05），见表2。

2.4 稳定性

在一份艾滋病血清标本进行NaOH的添加，浓度为0.4mmol/L，在显色后的不同时间进行比色，结果表明，10～90min之间显色较为稳定，显色10min后比色情况较好。

3.讨论

20世纪70年代初，在酶联免疫组织化学的基础上，酶联免疫吸附试验出现并得到发展，逐渐成为国内外血站试验中的首要检查方式，一般情况下，酶联免疫吸附试验都需要使用到比色测定，所以酶标仪在酶联免疫吸附试验中的作用十分重要[3]。本研究按照酶标仪的仪器软件和严密的比色系统，简单进行相应附件的配置，并按照全国临床检验的操作标准和相关检验项目程序，完成了采血、检测、结果打印、超微量化学检验的全部过程。本研究中，为使血液检测仪器进行更有针对性的测定，实验中以艾滋病为例，对三分血清进行批内、批间20次的重复检测，酶标仪批内精密度及批间精密度均显著高于血液分析仪（P＜0.05），说明酶标仪具有更高的检测精密度，有效提高了血液检验的效果。

表2. 两种检测方法标本回收率的比较(%)

临床上，艾滋病筛查的一种主要方式即为酶标仪检测，该法在艾滋病的筛查和诊断中起到了十分重要的作用，对于患者的治疗也有一定的积极意义。酶标仪检测法的光学系统和软件功能都较为精密，其中软件功能可以对检验程序的整机测量的处理进行控制，同时可以打印或是显示检测结果[4]；光学系统的原理是在朗博-比尔定律的基础上发展而得出的，能在高精密度、高检测速度的基础上完成批量检测。另外，酶标仪检测可以将酶标仪进行一体多用，不但能够进行免疫学试验，还能够进行多种临床化学检测，具有采血微量、检测稳定、试剂节约等明显的优势。

综上所述，应用酶标仪对艾滋病的血液检验进行测定，具有准确、微量、简便、稳定、快速等优势，检验效果理想、效率高、成本低、消耗少。