怀化市屠宰场常见病毒隐性感染情况的监测与分析

丁美月，舒思传，杨爱梅，杨谨慈，舒晓亮

（怀化市动物疫病预防控制中心，湖南 怀化 418000）

1 试验方法

1.1 扁桃体样本采集

1.1.1 采集地点和时间 样品来自怀化市内2个生猪定点屠宰场，2017年3月至2018年2月，每月在其中一个屠宰场采集不同来源猪群30份扁桃体。

1.1.2采样方法 利用扁桃体采样器采样。采样器使用前均须用3%氢氧化钠水溶液消毒后经清水冲洗。采取扁桃体样品后，用灭菌牙签挑至灭菌离心管并做标记。

1.2 检测试剂

核酸提取试剂盒（磁珠法）购自杭州爱康生物技术有限公司；口蹄疫病毒通用型实时荧光RTPCR检测试剂盒、猪繁殖与呼吸综合征病毒（NSP2 1 594～1 680变异株）实时荧光RT-PCR检测试剂盒购自北京世纪元亨；口蹄疫病毒核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）、猪瘟病毒/猪蓝耳病病毒/伪狂犬病病毒/猪圆环病毒2型四通道核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）、猪瘟/高致病性蓝耳病/口蹄疫核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法）购自中山大学达安基因股份有限公司。

1.3 检测方法

核酸提取和荧光RT-PCR，严格按照试剂盒说明书进行操作。

2 监测结果

2.1 时间分布

对这360份猪扁桃体进行了常见病原学监测，结果显示在外观健康猪群中猪圆环病毒2型（PCV2）一年四季均有较高的带毒率，共298份样品呈PCV2阳性，阳性率达到了82.78%，除9月和2月平均带毒率在26%左右外，其他时间段的带毒率都达到了90%以上；其次分别是猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒（HP-PRRSV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、口蹄疫病毒（FMDV）；猪瘟病毒（CSFV）全部为阴性。PRV 在1、4、5、7、8 和 9 月未检出；PRRSV 和 HP-PRRSV 仅在 11 月未同时检出阳性，FMDV 在 5、8、9、10 月有检出。具体监测结果见表1。

表1 不同月份外观健康猪群监测结果

2.2 地域分布

360份猪扁桃体样品中215份来自怀化本地，其余来自湖南省内湘潭、娄底等地区和重庆、贵州等地。经过分析发现，不同地区的病原分布差异不明显，PCV2的带毒率都较高，其中怀化地区的最高为87.14%，除来自湘潭的样品未监测到FMDV，来自重庆的样品未监测到FMDV、PRV外，其他地区都有一定的病原感染率。不同地域样品的检测阳性率见表2。

表2 不同地域样品的检测阳性率

2.3 混合感染情况

监测结果显示，外观健康猪群的混合感染情况主要是PRRSV和PCV2，其次是HP-PRRSV和PCV2、PRV和PCV2。PCV2与PRRSV、HP-PRRSV、FMDV、PRV等2～3种病原混合感染率达到16.39%。混合感染情况统计结果见表3。

2.4 总体情况

2017年3月至2018年2月，混合感染样品占阳性样品的18.83%，除混合带毒的样品外，PCV2、PRRSV、HP-PRRSV、PRV、FMDV 的单一病种带毒率分别为66.39%、5%、0.56%、0.56%、0.56%；检测全部为阴性的样品为10%。

表3 不同月份外观健康猪群扁桃体样品混合感染检出情况

3 分析与讨论

近年来，随着我国养猪业的发展，猪病也日趋复杂，免疫失败、新老疫病的混合感染时有发生，在流行特点上以多重感染、继发感染、免疫抑制、繁殖障碍症候、呼吸道病症候等为主要表征[1-4]。PCV2是一个基因保守的猪病原体[5]，作为单一病原致病性不高，常作为免疫抑制性条件病原与其他病原混合感染。据报道[4]，猪圆环病毒2型持续存在，一是污染面大，二是个体阳性率呈上升趋势，三是流行毒株类型多。猪蓝耳病近年出现感染反弹，感染毒株类型复杂，混合感染情况严重。从每个月的病原阳性检出率来看，PCV2、PRRSV和HP-PRRSV在外观健康猪群中一年四季均有一定的带毒率，表明外观健康猪群中存在主要疫病病原的带毒感染，与目前国内疫病的流行形势一致[6-8]。猪伪狂犬病疫情呈上升趋势，净化存在一定难度[4，8]。FMDV在外观健康猪群中仍有检出，其中10月份有7份阳性，经调查有可能与当月屠宰场将不同猪群过夜混养造成相互感染有关。CSFV的阳性率为0，主要可能是多年来对猪瘟的强制免疫有效地控制了猪瘟疫情乃至可能一些场达到了免疫净化[4]，但由于CSF已于2017年退出强制免疫，CSFV是否会再次在猪群中流行有待于长期监测。从此次扁桃体检出病原的季节分布来看，冬春季节健康猪群的病原带毒率较高，具有一定的示病意义。