长春地区网织红细胞血红蛋白含量参考区间的建立

赵丽娟，王 言，肖贺欣，王 莹，赵凤莲

(吉林大学第二医院 检验科，吉林 长春130041)

网织红细胞血红蛋白含量(Ret-He)反映了骨髓前体红细胞中血红蛋白的合成，能够间接反映过去3到4天内新生红细胞内铁含量。因此，Ret-He下降被认为是早期铁缺乏的指标[1-3]，为缺铁性贫血的早期诊断提供了依据。绝大多数检验项目的参考区间是参照其他国家已建立的参考区间或由体外诊断试剂厂家提供[4]，缺乏实用性和准确性。使用进口仪器及配套试剂检测Ret-He时，应建立符合本地区实验室的Ret-He参考区间。

1 资料与方法

1.1一般资料参照卫生行业标准[5]和美国临床实验室标准化协会(CLIS)C28-A3[6]标准，选取2017年2月-6月在吉大二院体检中心经问诊，体格检查、实验室检查、腹部超声均正常的健康成人480例。其中男性228名，女性252名，年龄20-60岁。排除标准：1)近期未服用铁剂；2)三个月之内未献血；3)无哺乳及妊娠期妇女。本研究经医院伦理委员会批准，所有受试者均签署知情同意书。

1.2仪器与试剂Sysmex-XN2000是新一代用于检测Ret-He的全自动血细胞分析仪。所有试剂、质控品及校准品均由Sysmex公司提供。

1.3方法

1.3.1Sysmex-XN2000全自动血液分析仪检测系统每半年进行一次校准，并进行校准后验证。每日标本检测前采用低、中、高三个浓度水平质控品进行室内质量控制，确保检测的精密度。

1.3.2安静状态下，按照静脉采血的标准操作程序所有受试者均采集EDTA-K2抗凝静脉血2 ml，轻轻颠倒混匀8次，在SysmexXN2000全自动血液分析仪CBC+DIFF+RET通道下测定Ret-He，所有样本在2小时内检测完毕。

2 结果

2.1Ret-He分布参考个体的年龄为37.0(30-49)岁(95%CI,37.9-40.0)，男性比例为47.5%，女性比

例为52.5%。经Kolmogorov-Smirnov正态性检验，本组数据Ret-He为偏态分布(P<0.05)，如图1。

图1 健康成人Ret-He的分布频率

2.2Ret-He在不同性别组的结果男性、女性Ret-He中位数分别为33.5pg、32.5pg，男性高于女性。经非参数两个独立样本Mann-Whitney U检验，组间差异有统计学意义(Z=-7.308，P=0.000)。因此，应将男女分组。

2.3Ret-He在不同性别和年龄组的结果同性别各年龄组的均数经非参数多个独立样本Kruskal-Wallis检验，男(P=0.196)、女(P=0.085)各年龄组间差异均无统计学意义，相同年龄组不同性别间差异均有统计学意义。

2.4长春地区Ret-He参考区间的确立长春地区健康男性Ret-He参考区间为(30.2-36.0)pg，健康女性Ret-He参考区间为(29.1-35.4)pg。见表1。

2.5参考区间的验证选择长春市不同区域3家医院对已建立的Ret-He参考区间进行验证，分别是吉林大学第一医院(朝阳区)，吉林大学中日联谊医院(二道区)，吉林省人民医院(朝阳区)。三家医院均使用Sysmex-XN系列全自动血液分析仪，在尽量保证分析前、分析中因素与参考区间提供实验室相一致的基础上，根据筛选标准分别选择健康男女标本各20例，采集标本在本实验室进行测定，检测结果均落在参考范围之内。因此，本研究建立的Ret-He参考区间适用于长春地区。见表2。

表1 健康成人不同性别、年龄组的Ret-He的水平

表2 男性、女性Ret-He水平及参考区间

3 讨论

Ret-He作为评价骨髓红系增生程度指标，对临床血液病的诊断与治疗具有重要意义，尤其是铁缺乏症的早期诊断和监测治疗[7-10]。Mireille等[7]研究了1024名荷兰成人Ret-He值和传统铁状态参数的关系，发现Ret-He的检测不受炎症影响，并且在铁缺乏早期即可出现降低。我们回顾性研究了30例在本院确诊为缺铁性贫血患者的资料，得到的Ret-He值为(23.5±5.5)pg，明显低于健康人，两者之间的差异有统计学意义(Z=-8.501，P<0.05)。由于检验项目的参考区间受种族、年龄、性别、生长发育、检测仪器等众多因素的影响而有差异[11]，建立本地区Ret-He正常参考区间的意义尤为重要。

有研究表明[12]随着海拔高度和年日照时数的不断增大，不同年龄红细胞计数和血红蛋白测定正常参考值也在不断增大；同时随着年平均相对湿度、年平均气温、年降水量的逐渐增大，不同年龄血红蛋白和红细胞参考值反而在减小。厂家提供的Ret-He参考区间为(27.0-32.6)pg，未按性别分组。因此，本研究建立了长春地区Ret-He正常参考区间，并按性别分组，男性为(30.2-36.0)pg、女性为(29.1-35.4)pg，与试剂厂商提供的参考区间相比，明显右移。梁琴[13]等研究兰州地区成人Ret-He参考区间为男性(37.00-47.11)pg，女性(35.45-45.35)pg，显著高于本地区的参考区间，归因于兰州地处北方高原，海拔高于本地区，含氧稀薄，外周血中红细胞数和血红蛋白量代偿性增加。唐玉凤[14]等人研究的北京地区成人Ret-He参考区间为男(29.25-33.83)pg，女(26.52-30.04)pg，低于本地区的参考区间。刘小敏[15]等人研究的深圳地区成人Ret-He参考区间为男(32.96-39.28)pg，女(31.11-36.99)pg。这充分说明，不同人群由于地理环境、饮食习惯、气候、湿度等差异，从而导致机体内Ret-He含量的不同，进一步说明不同地区实验室应建立各地区健康人群的Ret-He参考区间。本研究建立的Ret-He正常参考区间适用于长春地区，为临床铁缺乏及铁利用障碍相关疾病的诊断和疗效判断提供可靠依据。