犊牦牛腹泻诊断

罗雪，李然，阿比克哈莫，汤承，岳华

（西南民族大学生命科学与技术学院，四川 成都 610041）

腹泻是犊牛的常发疾病，其既可由细菌、病毒、寄生虫等引起，也可由营养因素、环境因素引发，一般病原微生物感染是引发犊牛腹泻的主要原因。腹泻严重影响犊牛成活率，幸存犊牛的生长发育和生产性能也会受到影响。

1 临床症状

某养殖户的4头犊牦牛发生以急性腹泻为特征的疾病。病牛精神沉郁、被毛粗糙、呼吸短促，水样腹泻，粪便呈灰白色，其中3头牛的粪便混有鲜血。

2 实验室检测

2.1 粪便处理及核酸提取 采集病牛粪便按1∶5（V/V）加入生理盐水制成悬液，-80℃反复冻融3次，5000r/min离心10min，按照和酚-氯仿法提取DNA，按照Trizol法提取RNA，并参照反转录试剂盒说明合成cDNA。

2.2 PCR检测 检测牛轮状病毒（BRV）、牛冠状病毒（BCV）、牛病毒性腹泻/黏膜病病毒（BVDV）、大肠杆菌K99、沙门菌的特异性PCR，以粪便DNA和cDNA为模板，参照相关文献方法进行PCR扩增和凝胶电泳鉴定。

3 诊断

PCR从4份粪便样本中扩增出4个BRV的特异条带和2个BCV的特异性条带，与阳性对照条带大小一致。未检出BVDV、大肠杆菌K99和沙门菌。

根据临床症状，结合实验室检测，确诊犊牦牛腹泻是由BRV、BCV混合感染所致。

4 小结

细菌和病毒感染是导致犊牛腹泻的常见原因，临床上常见两种及两种以上的病原混合感染。本实验对患牛粪便中BRV、BCV、BVDV、大肠杆菌K99、沙门菌5种常见病原进行了检测，结果显示牦牛腹泻由BRV、BCV混合感染所致。

BRV是常见的导致犊牛腹泻的病原，BCV也是引起犊牛腹泻的主要病原，且可引起成年牛冬痢和呼吸道疾病。