王袁斐懿 ,王晨曦 ,蒲锋 ,吕雯婷 ,徐志文
(1.四川农业大学动物医学院,四川 温江 611130;2.四川省南部县火峰乡畜牧兽医站,四川 南部 637300)
猪流行性腹泻(PED)是猪的一种急性、高度传染性肠道传染病,其致病因子为猪流行性腹泻病毒(PEDV)。猪PED的临床症状包括严重腹泻、呕吐、厌食、脱水和体重减轻等。
本病各品种、各生长阶段的猪均可感染,尤以哺乳仔猪发病最为严重,其死亡率可达100%,即使耐过,也生长缓慢、料重比增高。
PED一年四季均可发生,每年12月至次年3月是高发期。猪通过直接接触及间接接触被感染,本病还可通过哺乳等途径传播。粪便和乳汁为PED的主要传播物,主要经“粪-口”或“奶-口”等消化道途径感染。
PED传播速度快、传播范围广,感染率高。多种PEDV变异毒株的出现、与其他病毒的混合感染、与猪传染性胃肠炎(TGE)等疾病相似的流行病学和临床特征导致本病诊断困难,给PED的防治造成了困难。
2.1 疫苗免疫
2.1.1 传统疫苗 1993年有学者通过人工感染仔猪并收集其肠内容物和组织制备出PED灭活组织疫苗,随后利用Vero细胞成功传代弱化CV777毒株,制备出PEDV氢氧化铝佐剂灭活疫苗。该疫苗通过后海穴针刺免疫后,仔猪主动及被动免疫保护率超过85%。
1998年有学者证实CV777减毒株适用于制备弱毒疫苗,其制备并使用第90代的毒株开发了PEDV弱毒疫苗,疫苗通过后海穴针刺免疫后保护率达85%以上,其开发的TGEV和PEDV二联弱毒苗在控制PEDV和TGEV感染中发挥着重要作用。在TGEV和PEDV二联弱毒苗的基础上制备了TGEV,PEDV和PRoV三联苗,疫苗试验结果表明,实验场猪病毒性腹泻发病率由8%~12%降至了3%~5%。
2.1.2 基因工程疫苗 黏膜免疫在病毒性腹泻病的免疫中起重要作用,由肠黏膜分泌的免疫球蛋白A(sIgA)可防御病原体入侵。口服疫苗可刺激黏膜免疫产生效应,产生IgA,是预防肠道感染性疾病的有效方法。
2007年,Hou等构建了能表达PEDV-N蛋白的乳杆菌,其可激活sIgA和针对PEDV N蛋白的IgG产生。Ge等发现,经口服免疫后,表达PEDVN蛋白及S蛋白核心中和抗原表位(COE)的重组乳酸杆菌疫苗可刺激肠道产生局部免疫应答及全身免疫应答。Liu等构建了能表达PEDV N基因或S基因S1区域的重组乳杆菌,口服免疫结果表明,表达N蛋白的重组乳杆菌可增强表达S蛋白S1片段的重组乳酸杆菌介导的黏膜和全身免疫应答。PEDV S蛋白可介导中和抗体的产生,常被选作疫苗研究靶标,2013年Meng等构建了表达PEDV S基因的重组真核质粒,作为新型DNA疫苗,其在接种后能有效地激活细胞介导的免疫,并立即在免疫动物中产生较高水平的抗体。Liang等在构建表达PEDV S基因S1区的重组真核质粒的基础上,进一步构建了沙门氏菌弱毒菌株。
2.1.3 免疫途径 通过不同免疫途径免疫将产生不同的免疫效果。有学者通过对比口服和肌注相同剂量的同种PEDV弱毒疫苗后猪血清中的抗体水平,发现口服疫苗比肌注疫苗产生的抗体水平更高,还有研究证实后海穴免疫可起免疫放大作用。另有学者分别采用注射、口服、滴鼻及口服加滴鼻方式对产前40 d母猪进行免疫,结果发现对血液中IgG的含量影响不大,但滴鼻免疫明显提高了乳汁中IgG及IgA含量,产生了较好的免疫效果。
由于PEDV主要通过黏膜感染动物,所以血液中的抗体IgG不能提供足够的保护,而仔猪主要通过初乳及乳汁获得PEDV的被动免疫保护,所以对妊娠母猪进行PED疫苗免疫有助于减少仔猪PED的发生,降低猪场PED的严重程度,且黏膜免疫是仔猪获得免疫保护的最佳途径。
2.2 卵黄抗体防治 卵黄免疫球蛋白(IgY)是指禽类受到特定抗原免疫刺激后,血液中IgG进入卵黄,并成为卵黄中唯一的免疫球蛋白。
由于猪与禽类的亲缘关系较远,IgY能识别猪体内不能识别的抗原决定簇,能对猪源病原体产生较强免疫应答。
2003年有学者制备了抗PEDV高免卵黄抗体应用于腹泻仔猪,结果减轻了腹泻症状。2012年有学者制备出抗TGEV和PEDV二价高免卵黄抗体,其临床治愈率达88%。
2.3 中药治疗 许多中药具有抑菌及杀毒功效,可阻断病毒的复制,或通过提高机体免疫力间接抑制病毒复制。
针对PED主要以益气健脾、淡渗利湿为主,可选择的中药主要有党参、柴胡、黄芪、三七、白头翁、板蓝根、女贞子、穿心莲等。
2.4 加强管理 生猪养殖管理好坏影响着PED的防治效果。猪场应加强饲养管理,保持舍内通风,清洁、干燥,并实行全进全出,防止交叉感染。进出猪场的物品、车辆及人员均应严格消毒,严防病原入侵。一旦发生病情应及早隔离病猪并严格消毒。
2.5 其他措施
2.5.1 返饲 返饲是指用病猪肠管及内容物喂食产前母猪,以通过母源抗体对仔猪起保护作用。
采用此法前须确定PEDV为喂养物中的唯一病原体,否则存在散毒风险,非反复发生PED的猪场一般不提倡使用此法。
2.5.2 喷雾干燥血浆的使用 喷雾干燥血浆(SDP)是从健康动物的血液中获得的高蛋白产品,其保留了大部分的生物活性。
SDP可增强肠道屏障功能,并通过调节派尔集合淋巴结及肠相关淋巴组织的免疫效应,减轻腹泻的发生。