紫薯脱毒苗的组培快繁技术研究

张 迪，张星辰，姜孟琪，刘兆辉，刘新元，郑世英

（德州学院生态与园林建筑学院，山东德州 253000）

紫薯（Ipomoea batatas(L.)Poir.）旋花科（Convolvulaceae）番薯属，又叫黑薯，薯肉呈紫色至深紫色。其富含蛋白质、淀粉、果胶、纤维素、氨基酸、维生素及多种矿物质，同时还富含硒元素和花青素[1]。紫薯营养丰富具特殊保健功能，其中的蛋白质氨基酸都是极易被人体消化和吸收的。其中富含的维生素A可以改善视力和皮肤的粘膜上皮细胞，维生素C可使胶元蛋白正常合成,防治坏血病的发生,花青素是天然强效自由基清除剂[2]。在实际生产中，影响紫薯品质和产量的主要因素是病毒[3]。通过组培方法繁育脱毒紫薯苗是目前防治紫薯病毒的有效途径。本试验利用不同类别的培养基和植物生长调节物质对紫薯品种泰中11号（由泰安农业科学研究院繁育）脱毒试管苗组培快繁进行研究，为泰中11号脱毒苗的生产提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 供试材料

供试紫薯为泰中11号，置于28±2℃温室中进行培养。

1.2 试验方法

1.2.1 试验材料的处理。取紫薯泰中11号植株，除掉大部分叶片、叶柄，用0.1%的洗衣粉液洗涤后,再用蒸馏水清洗干净，放置于超净工作台上进行灭菌处理。具体操作步骤是先在75%酒精中浸泡30 s,再用0.1%的HgCl2溶液消毒20 min,用无菌水进行清洗。在超净工作台上将泰中11号脱毒苗修剪成段,截成1～2 cm带1-2个腋芽的小段，按形态学方向在设计好的培养基上进行接种。每瓶接种6个外植体,观察其生长状况。

1.2.2 培养基设计。根据配方培养基设计为3种：（1）基本培养基分别为：MS、N6和B5。（2）分别添加NAA 0.1、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mg/L 的 MS 培养基。（3）分别添加 6-BA 0.1、0.5、1.0、2.0、3.0mg/L 的 MS培养基。

所有培养基，pH值5.8～6.0,蔗糖含量3.0%，琼脂0.7%。每处理接种10瓶，每瓶接种2株。接种后,置于28～30℃ ,光强 2000～2500Lx，光照 11h/d 条件下培养。每隔3d统计试管苗的生根和出芽，30d后测量株高、单株叶片数，单株根长和根数。

2 结果与分析

2.1 基本培养基对紫薯试管苗生长的影响

由表1可以看出，不同培养基对紫薯脱毒苗的生根率、平均根长、单株平均根数、单株平均叶片数、株高等均有明显影响。其中MS培养基有利于提高紫薯脱毒苗的成苗率。

表1 基本培养基对泰中11号脱毒苗生长的影响（30d）

2.2 生长调节剂对泰中11号脱毒苗生长的影响

2.2.1 NAA对脱毒苗生长的影响。从表2可以看出，随着NAA处理浓度的不断增加，在含有NAA的MS培养基中，试管苗的出芽时间、生根时间、生根数、根长、叶片数和株高均有不同的变化。当NAA浓度为0.50mg/L时，接种后5.8d产生根原基，8.5d开始出芽，30d株高可达5.2cm，叶片数达4片，新生根数9条，平均根长4.0cm，生根、出芽比平均7.91d和10.8d分别快2.11d和2.3d.。当NAA浓度高于1.0mg/L时，根和芽的诱导时间均延长，并且根数、根长及叶片数也降低。所以，当NAA浓度为0.5～1.0 mg/L时，能有效促进泰中11号紫薯脱毒试管苗的生长发育。

表2 不同浓度的NAA对泰中11号脱毒苗生长的影响（30d）

2.2.2 6-BA对脱毒苗生长的影响。由表3可以看出，MS培养基中加入6-BA的浓度对试管苗生根、生芽、根数、根长、叶片数、株高等均有影响。当6-BA浓度为1.0mg/L时，试管苗出芽时间为7.2d，比平均出芽时间缩短2.02d；生根时间4.5d，比平均生根时间缩短1.13d；单株根数3.8条，单株叶数4.3个。当6-BA浓度为0.1mg/L时，根长为5.5cm，当6-BA浓度为0.5 mg/L时，株高生长最快为5.3cm。当6-BA浓度为2.0mg/L或更高时，抑制了根的形成，所有处理均未产生幼根，茎叶影响较小。说明当6-BA浓度为0.1～1.0 mg/L时，更有利于泰中11号紫薯脱毒试管苗的快速生长。

表3 不同浓度的6-BA对泰中11号脱毒苗生长的影响（30d）

3 讨论

N6、B5、MS 培养基的生根株数分别是 10、9、18株，生根率分别为50%、45%、90%，根数分别为4.5、5.1和7.2条，根长分别为2.1、3.2和4.8cm，成苗数分别为10、8 和 19 个，片数分别为 4.5、4.1、和 7.8 片，株高分别为3.9、4.2和6.8cm，成苗率分别为 50%、40%和95%。MS培养基最有利于泰中11号紫薯试管苗的生长。

在含有NAA的MS培养基中，当NAA浓度为0.1和0.25mg/L时，出芽时间分别为9.8和9.7d；生根时间分别为7.8和7.6d；根数分别为5.4和3.6条；根长分别为4.7和4.5cm；叶片数分别为3.8片和2.片；株高分别为 6.4和 5.7cm。当 NAA浓度为 1.5、2.0和2.5mg/L时，出芽时间分别为11.5、12.3和14.6 d；生根时间分别为7.7、9.2和11.8d；根数分别为5.5、4.3和5.8条；根长分别为4.7和4.5cm；叶片数分别为3.8和2.7片；株高分别为6.4和5.7cm。所以，当NAA浓度为0.5～1.0mg/L时，能有效促进泰中11号紫薯脱毒试管苗的生长发育。

在含有6-BA的MS培养基中，当6-BA浓度为0.1、0.5、1.0mg/L 时，出芽时间分别为 9.8、8.2 和 7.2 d；生根时间分别为6.8、5.6和4.5 d；根数分别为2.8、3.0和3.8条；根长分别为5.5、4.8和4.5cm；叶片分别为3.2、3.5和4.0片；株高分别为5.0、5.3和5.2cm。

当6-BA浓度大于1.0mg/L时，不能生根。所以，6-BA浓度为0.1～1.0mg/L时，能促进泰中11号紫薯脱毒试管苗的生长发育。