不同修复剂对二氯喹啉酸致害烟株及其土壤微生物和酶活性的影响

周小会 舒然 黄化刚 代园凤 杨森 龙友华 刘文涛 尹显慧

摘要：【目的】探討不同修复剂对二氯喹啉酸致害烟株的修复效果及其对土壤微生物数量和酶活性的影响，为预防和修复二氯喹啉酸污染土壤及其致害烟株提供参考。【方法】以云烟87为试验材料，采用盆栽试验，探究不同浓度二氯喹啉酸土壤残留对植烟土壤真菌、细菌和放线菌数量的影响;模拟植烟土壤二氯喹啉酸残留浓度0.200 mg/kg进行致害烟株修复试验，待烟株出现典型药害症状后，施入不同修复剂或组合配方，测定不同处理烟草农艺性状及其根际土壤微生物数量和酶活性。【结果】二氯喹啉酸土壤残留对烟草根际土壤微生物数量有明显影响，烟苗移栽15 d—30 d—45 d—60 d后，细菌数量主要呈抑制—激活—抑制—激活的态势，真菌数量主要呈抑制—激活—激活—激活的态势，放线菌数量主要呈抑制—抑制—激活—抑制的态势;不同修复剂处理中以T2（0.135%赤霉酸+0.0031%云苔素内酯+格芙）处理对二氯喹啉酸致害烟株的修复效果最佳，对烟株株高、叶长、叶宽和茎围的抑制率最低，分别为9.40%、8.86%、1.71%和7.19%;与药剂对照处理（CK2）相比，不同修复剂对土壤中微生物数量和酶活性有较好的改善作用，其中T2处理可显著增加二氯喹啉酸残留土壤中的细菌数量（P<0.05，下同），并显著增加致害烟株根际土壤脲酶、过氧化氢酶和蔗糖酶活性。【结论】0.135%赤霉酸+0.0031%云苔素内酯叶面喷施+格芙200倍液灌根可增加二氯喹啉酸致害烟株根际土壤的微生物数量，提高土壤酶活性，对二氯喹啉酸致害烟株有较好的修复效果。

关键词： 植物生长调节剂：二氯喹啉酸;烟草;土壤微生物;土壤酶活性;修复

中图分类号： S572                                      文献标志码：A 文章编号：2095-1191（2018）11-2210-08

Effects of different remediate agents on tobacco plants caused phytotoxicity by quinclorac and its soil microorganisms and enzyme activities

ZHOU Xiao-hui1， SHU Ran1， HUANG Hua-gang2， DAI Yuan-feng2， YANG Sen1，

LONG You-hua1， LIU Wen-tao1， YIN Xian-hui1*

（1Institute of Crop Protection，Guizhou University， Guiyang  550025， China; 2Bijie Branch， Guizhou Tobacco

Company， Bijie， Guizhou  551700， China）

Abstract：【Objective】The remediation effects of different remediate agents on tobacco plants which were caused phytotoxicity by quinclorac and the effects on soil microorganisms and enzyme activities were explored in order to provide scien-tific reference for preventing and remediating soil and tobacco plants which were contaminated and caused phytotoxicity byquinclorac. 【Method】Yunyan 87 tobacco was used as tested material in pot experiments to investigate the effects of different concentrations of quinclorac residues in soil on the quantity of fungi， bacteria and actinomycetes in tobacco-growing soil. The repairing test on tobacco plants which were caused phytotoxicity was conducted and the simulated concentration of quinclorac residues in tobacco-growing soil was 0.200 mg/kg. After the typical symptoms of phytotoxicity occurred in tobacco plants， different remediate agents and combination formulas were used to determine the agronomic traits of tobacco plants and the quantity of microorganisms and enzyme activities in rhizosphere soil of tobacco plants in different treatments. 【Result】The quinclorac residuesin soil had relativelygreat effects on the quantity of microorganisms in rhizosphere soil of tobacco plants. After 15 d-30 d-45 d-60 d of tobacco seedling transplanting， the quantity of bacteria mainly exhibited a state of inhibition-activation-inhibition-activation， the quantity of fungi showed a state of inhibition-activation-activation-activation， and the quantity of actinomycetes exhibited a state of inhibition-inhibition-activation-inhibition.Among different remediate agents treatment，T2 treatment（0.135% gibberellic acid+0.0031% brassinolide+Gefu）had the best remediation effect on tobacco plants which were caused phytotoxicity by quinclorac.Under T2 treatment， inhibition rate of the plant height， leaf length， leaf width and stem girth of tobacco plants were the lowest and were 9.40%， 8.86%，1.71% and 7.19% respectively.Compared with agent control treatment（CK2）， different remediate agents all had ameliorative effects on the quantity of soil microorganisms and enzyme activities. Among them， T2 treatment had significantly（P<0.05， the same below）increased the quantity of bacteriain soil with quinclorac residues， and it also significantly increased the urease， catalase and sucrase enzyme activities in rhizosphere soil of tobacco plants which were caused phytotoxicity.【Conclusion】Foliage spray（0.135% gibberellic acid+0.0031% brassinolide） +root-irrigation of 200 times Gefu can increase the quantity of microorganisms in the rhizosphere soilof tobaccoplants which were caused phytotoxicity by quinclorac，and improve soil enzymes activities. Sofoliage spray（0.135% gibberellic acid + 0.0031% brassinolide）+root-irrigation of 200 times Gefu has fine remediation effect on tobacco plants which are caused phytotoxicity by quinclorac.

Key words： plant growth regulator; quinclorac; tobacco; soil microorganisms; soil enzyme activity; remediation

0 引言

【研究意义】二氯喹啉酸（Quinlorac）是20世纪80年代德国BASF公司开发的一种激素型喹啉酸类除草剂，对水稻田稗草有特效，具有用量少、持效期长、价格低廉等优点（Grossmann，2010），因而备受农户青睐。但二氯喹啉酸在土壤中自然降解十分缓慢（孙扬等，2017），半衰期长（张倩等，2013a），且不易被吸附而容易造成环境污染（王静等，2007;Chahil et al.，2011）。近年来，随着农业生产的发展，土地耕作制度也逐渐发生改变，烤烟与稻、玉米和高粱轮作模式在许多地区推广（何京亮等，2016;杨晶等，2016），但因前茬作物使用二氯喹啉酸不当而导致后茬烟草产生药害的现象频繁发生（李儒海和褚世海，2013），严重影响烟叶的质量和产量（王静等，2007），给烟农带来了较大的经济损失。因此，研究二氯喹啉酸对烟草根际微生物的影响，筛选出二氯喹啉酸致烟株药害的有效修复剂或组合配方，初步从微生物特性方向摸清不同修复剂对二氯喹啉酸污染土壤及其致害烟株的修复机理，对烟草除草剂药害的预防和修复具有重要意义。【前人研究进展】前人针对二氯喹啉酸致害烟株的修复已进行了大量研究。陈泽鹏等（2007）研究发现，生石灰和活性炭对二氯喹啉酸致烟草畸形生长有很好的缓解作用。郑雄志等（2013）通过盆栽和田间试验研究了几种解毒剂对烟田二氯喹啉酸次生药害的修复效果，发现使用赤霉酸（0.135%）+吲哚乙酸（0.0052%）+云苔素内酯（0.0031%）能使二氯喹啉酸药害烟株的叶宽、叶长和株高均显著高于药剂对照，对致畸烟株有较好的缓解效果。刘华山等（2014）报道于二氯喹啉酸污染土壤中加入复合微生物菌剂可增加土壤微生物数量，促进相关土壤酶活性的提高。【本研究切入点】生物法修复除草剂土壤残留致烟草药害具有绿色安全且无二次污染的优点。目前，微生物菌剂与植物生长调节剂配施对二氯喹啉酸土壤残留致烟株药害及其污染土壤的修复效应鲜有报道。【拟解决的关键问题】采用盆栽试验，研究不同修复剂或组合配方对二氯喹啉酸土壤残留致烟株药害的修复作用及其对烟草根际微生物数量和土壤酶活性的影响，筛选出对二氯喹啉酸致害烟株及土壤微生物数量有较好修复和改善效果的修复剂或组合配方，为不同轮作烟区预防和修复除草剂污染土壤及其致害烟株提供参考。

1 材料与方法

1. 1 试验材料

供试烟草品种为云烟87，由贵州省毕节市烟草公司林泉烟草科技园惠赠;50%二氯喹啉酸可湿性粉剂为江苏快达农化股份有限公司产品;锌硼肥为贵州毕节丰灵复肥有限公司产品;二氯喹啉酸标准品（99.07%，国家农药质量监督检验中心）;腊状芽孢杆菌（Bacillus cereus LY05）由贵州大学农产品质量与安全教研室提供;天达2116为山东天达生物股份有限公司产品;0.135%赤霉酸WP和0.0031%芸苔素内酯WP均为德国阿格福莱农林环境生物技术股份有限公司产品;格芙微生物菌剂由东北农业大学土壤肥料专家崔正忠教授研制和提供;富必来微生物酶制剂由中国农业大学潘灿平教授惠赠。

细菌培养基为牛肉膏蛋白胨培养基，含牛肉膏5.00 g/L、蛋白胨10.00 g/L、NaCl 5.00 g/L，用4 mol/L NaOH调节pH至7.2～7.4;放线菌和真菌培养基分别用高氏一号培养基和孟加拉红培养基，制备工艺参考张世敏等（2012）的方法。

1. 2 试验方法

1. 2. 1 二氯喹啉酸对致害烟草根际土壤微生物数量的影响 试验于2017年4月在贵州大学南校区农药试验基地进行。试验土壤采自贵阳市花溪区，前茬为荒地，暴晒1个月后经高效液相色谱法（HPLC）检测无二氯喹啉酸残留后使用。二氯喹啉酸土壤残留浓度设9个处理，每处理称取6 kg土壤装于花盆中（宽×高=32.0 cm×20.9 cm），参照张倩等（2013b）的方法，分别向各处理已配好的药液中加入300 mL水后缓慢均匀灌浇供试盆栽土壤，使土壤二氯喹啉酸残留浓度分别为0（不施二氯喹啉酸，即清水对照）、0.001、0.005、0.010、0.050、0.100、0.200、0.500和1.000 mg/kg。每处理重复10次。1 d后选取长势基本一致的健壮烟苗进行移栽，每盆1株。分别在烟苗移栽15、30、45和60 d后取样测定土壤中的细菌、放线菌和真菌数量。

1. 2. 2 不同修复剂对二氯喹啉酸致害烟株及其根际土壤微生物特性的修复效果 参考杨森等（2018a）报道的植烟土壤二氯喹啉酸残留浓度0.200 mg/kg对烟株有明显影响，结合1.2.1的试验结果，本研究修复效应试验在模拟土壤残留二氯喹啉酸浓度0.200 mg/kg（厂家推荐常规用量的2倍）的环境下进行，每盆装土10 kg，1 d后每盆移栽1株长势基本一致的健康烟苗，每处理10次重复;设8个处理（表1）。烟苗移栽后，观察烟苗初步出现二氯喹啉酸典型药害症状（烟叶新叶变厚且具有明显毛绒状、生长点被抑制或叶片黄化）后，立即采用不同修复剂或组合配方对受害烟株进行處理，随后分别测定不同处理烟草根际土壤微生物数量（施药后15和30 d）、土壤酶活性和烟草农艺性状（施药后30 d）。水肥管理按当地田间烟苗优质生产管理进行。

1. 3 测定项目及方法

1. 3. 1 微生物数量测定 取盆栽烟株0～20 cm土层土壤，除去草根及石块等杂物，采用平板稀释培养法测定土壤中的微生物数量。细菌数量测定：称取10 g土样放入装有90 mL无菌水的三角瓶中，振荡1 h左右使微生物细胞分散，静置20～30 s，然后逐级10倍稀释至1×10-4 g/L，无菌条件下吸取100 mL的1×10-4 g/L稀释液至细菌培养基中，用涂布器将稀释液涂抹均匀，封口膜封口后放入37 ℃恒温箱倒置培养24～48 h后计数，每处理3次重复。放线菌和真菌测定稀释方法同上，放线菌取100 mL的1×10-3 g/L稀释液接种至高氏一号培养基中，于28～30 ℃恒温箱倒置培养96～120 h后计数;真菌取100 mL的1×10-2 g/L稀释液接种至孟加拉红培养基中，于28 ℃恒温箱倒置培养72～120 h后计数。

1. 3. 2 土壤酶活性测定 施入修复剂30 d后，各处理取0～20 cm土层土壤，风干后过3 mm筛，各取30 g分别测定其土壤脲酶、蔗糖酶和过氧化氢酶活性。其中，土壤脲酶测定参考苯酚钠—次氯酸钠比色法，过氧化氢酶活性测定参考高锰酸钾滴定法，土壤蔗糖酶活性测定参考3，5-二硝基水杨酸比色法（关松荫，1986）。

1. 3. 3 烟草农艺性状测定 施用不同修复剂30 d后，测量各修复处理烟株株高、叶长、叶宽（烟株至顶叶下第4片有效叶）、茎围和叶片数，计算株高、叶长、叶宽和茎围抑制率。

1. 4 统计分析

采用Excel 2010和DPS v7.05进行数据统计分析，利用Duncans新复极差法对试验结果进行差异显著性分析。

2 结果与分析

2. 1 不同浓度二氯喹啉酸对烟草根际土壤微生物数量的影响

2. 1. 1 对烟草根际土壤细菌数量的影响 由表2可知，不同浓度二氯喹啉酸对土壤中的细菌数量有一定影响。煙苗移栽15 d后，0.010～1.000 mg/kg二氯喹啉酸浓度处理的细菌数量受到明显抑制，且与清水对照（CK）存在显著差异（P<0.05，下同）;至移栽30 d后，除0.005 mg/hg处理外，其他二氯喹啉酸处理的细菌数量有一定增加趋势，但0.200 mg/kg处理的细菌数量仍低于CK，较CK少67.67%;至移栽45 d后，各处理土壤细菌数量除0.050 mg/kg处理外均低于CK;至移栽60 d后，除高浓度（1.000 mg/kg）处理对植烟土壤细菌数量有明显抑制作用外，其他处理的细菌数量均高于CK。总体来看，烟苗移栽15、30、45和60 d后，二氯喹啉酸土壤残留对植烟土壤细菌数量的影响主要呈抑制—激活—抑制—激活的态势。

2. 1. 2 对烟草根际土壤真菌数量的影响 由表3可知，烟苗移栽15 d后，不同浓度二氯喹啉酸处理的真菌数量均显著少于CK，说明二氯喹啉酸对土壤中真菌数量有明显影响;移栽30 d后，除0.010和1.000 mg/kg处理外，其他浓度处理的真菌数量均少于CK;移栽45 d后，除高浓度（1.000 mg/kg）处理的真菌数量显著高于CK外，其余浓度处理与CK差异不显著（P>0.05，下同）;至移栽60 d后，不同浓度处理的真菌数量均高于CK，但差异不显著。从二氯喹啉酸最高浓度（1.000 mg/kg）处理来看，烟苗移栽15、30、45和60 d后，土壤中的真菌数量呈抑制—激活—激活—激活的态势。

2. 1. 3 对烟草根际土壤放线菌数量的影响 由表4可知，烟苗移栽15和30 d后，除移栽30 d时0.001 mg/kg二氯喹啉酸处理外，其余浓度处理植烟土壤中的放线菌数量均低于CK，其中移栽15 d后高浓度（0.500和1.000 mg/kg）处理未分离出放线菌，说明二氯喹啉酸对植烟土壤放线菌有明显影响;移栽45 d后，除0.100和0.500 mg/kg处理外，其余浓度处理的放线菌数量均高于CK;至移栽60 d后，除0.010 mg/kg处理外，其余浓度处理的放线菌数量均低于CK。可见，烟苗移栽15、30、45和60 d后，二氯喹啉酸土壤残留对植烟土壤中的放线菌数量主要呈抑制—抑制—激活—抑制的态势。

2. 2 不同修复剂对二氯喹啉酸致害烟株农艺性状的影响

由表5可知，二氯喹啉酸土壤残留易导致烟株畸形生长，施用修复剂30 d后，药剂对照（CK2）处理的烟株株高、叶长和叶宽均受到抑制，抑制率分别为30.76%、32.91%和42.73%，其中二氯喹啉酸土壤残留对烟株叶宽抑制较明显。经不同修复剂处理30 d后，各处理中以T2处理的修复效果最佳，烟株的株高、叶长、叶宽和茎围的抑制率最低，分别为9.40%、8.86%、1.71%和7.19%，表明0.135%赤霉酸+0.0031%云苔素内酯叶面喷施+格鞭200倍液灌根对二氯喹啉酸致害烟株具有良好的修复效果。

2. 3 不同修复剂对二氯喹啉酸致害烟株根际土壤微生物特性的影响

2. 3. 1 对土壤中微生物数量的影响 由表6可知，二氯喹啉酸土壤残留对烟草根际土壤微生物数量有一定影响，而施入修复剂后对植烟土壤微生物数量及其多样性有促进和改善作用。施用修复剂15 d后，植烟土壤中真菌数量最多的为T3处理，较CK2增加了266.50%，差异达显著水平;细菌数量最多的为T2处理，为68.67×104 CFU/g，其次为T3处理，二者差异不显著。施用修复剂30 d后，植烟土壤真菌数量除T4处理增多外，其余处理均逐渐减少，其中以CK2的真菌数量最多，达1.50×102 CFU/g，说明随时间延长二氯喹啉酸对土壤真菌繁殖起到刺激作用，以促其数量增加;植烟土壤细菌数量除T6处理、CK1和CK2外，其他处理均较修复15 d时减少;放线菌的数量较稳定，变化不明显。

2. 3. 2 不同修复剂对二氯喹啉酸致害烟株根际土壤酶活性的影响

2. 3. 2. 1 对脲酶活性的影响 如图1所示，不同修复剂处理对二氯喹啉酸致害烟株根际土壤脲酶活性存在显著影响。施入修复剂30 d后，各修复剂处理脲酶活性均显著高于CK2，各处理脲酶活性排序为T3>T2>T5>T4>T1>T6>CK1>CK2，其中以T3处理的土壤脲酶活性最高，为0.3765 mg/g，显著高于其他处理。

2. 3. 2. 2 对过氧化氢酶活性的影响 由图3可知，不同修复剂处理对二氯喹啉酸致害烟株根际土壤过氧化氢酶活性存在一定影响，其中以T2处理的过氧化氢酶活性最高，显著高于CK1、T6和CK2处理，与T1、T3、T4和T5处理差异不显著。可见，除T6处理外，其余修复剂处理对二氯喹啉酸致害烟株根际土壤过氧化氢酶活性均有一定的促进作用。

2. 3. 2. 3 对蔗糖酶活性的影响 由图3可知，不同修复剂处理对二氯喹啉酸致害烟株根际土壤蔗糖酶活性存在一定影响，其中以T2处理的蔗糖酶活性最高，为14.6850 mg/g，显著高于其他处理;T1、T3、T4和T5处理的蔗糖酶活性也显著高于CK2，但T6与CK2处理差异不显著。表明T2处理对二氯喹啉酸致害烟株根际土壤蔗糖酶活性具有显著的促进作用，T1、T3、T4和T5对二氯喹啉酸致害烟株根际土壤蔗糖酶活性也有一定的促进作用。

3 讨论

二氯喹啉酸对稻田稗草有较好的防除效果，且不易对当茬作物产生药害，备受农户喜爱，但由于在前茬作物防治杂草过程中不合理或不规范使用，易造成土壤除草剂残留，常致后茬作物烟草产生药害，因此修复二氯喹啉酸污染土壤及其致害烟株对烟草产业可持续发展具有重要意义。目前，修复二氯喹啉酸污染土壤的方法有物理、化学和生物修复（滕春红和苏少泉，2006;杨森等，2017），其中生物修复对环境友好，不易产生二次污染，应用更广泛（黄国联等，2014）。Gardner等（2011）研究認为，土壤微生物多样性与土壤酶活性存在密切关系，部分土壤酶活性能象征土壤肥力水平和受污染程度（Pascual et al.，2000;张丽莉等，2003;Kalam et al.，2004），土壤微生物数量也能反映土壤受农药污染程度，故二者均能作为评价土壤生态质量的重要指标（Kalam et al.，2004;陈泽鹏等，2007;张妤，2013）。

本研究结果表明，不同浓度二氯喹啉酸对烟草根际土壤微生物数量具有不同程度的影响，其中烟草移栽15、30、45和60 d后，二氯喹啉酸土壤残留对植烟土壤细菌数量的影响随时间延长呈抑制—激活—抑制—激活的态势，真菌数量呈抑制—激活—激活—激活的态势，放线菌数量呈抑制—抑制—激活—抑制的态势。可见，当植烟土壤施入二氯喹啉酸后，短时间内土壤中细菌、真菌和放线菌响应较激烈，其数量迅速下降，均处于被抑制状态，说明二氯喹啉酸对土壤微生物数量及其多样性具有明显的负影响。随时间的延长，二氯喹啉酸土壤残留对植烟土壤中不同微生物的影响不同（抑制或激活），可能是不同微生物间功能性差异所致。

张国宾等（2016）研究发现，二氯喹啉酸对烟草具有明显的致畸作用。本研究发现，二氯喹啉酸土壤残留可致烟株叶片卷缩、叶片黄化、植株矮小等，施用修复剂30 d后，0.135%赤霉酸+0.0031%云苔素内酯叶面喷施+格芙200倍液灌根处理对受害烟株有较好的修复效果，受害烟株的株高、叶长、叶宽和茎围抑制率最低，基本恢复到正常水平。

土壤中微生物数量和酶活性共同影响土壤物质的转化和养分循环，多数土壤酶也主要来源于微生物和植物根系分泌物，二者间存在一定的相关性（杨森等，2018b）。本研究结果表明，0.135%赤霉酸+0.0031%云苔素内酯+格芙200倍液可显著增加二氯喹啉酸污染植烟土壤细菌数量。土壤酶活性反映了土壤质量及土壤养分转化能力，其中过氧化氢酶与土壤有机质含量有关;蔗糖酶可水解蔗糖，反映了土壤有机碳的转化能力;脲酶可水解氮素，影响土壤氮素代谢，其酶促产物是植物氮源之一（吴小虎等，2015）。郑雄志等（2013）、刘华山等（2014）报道二氯喹啉酸污染土壤中加入复合菌剂能增加土壤微生物量，相关土壤酶活性也得到提高。本研究结果显示，二氯喹啉酸污染土壤施入修复剂后，土壤中过氧化氢酶、脲酶和蔗糖酶活性较CK2增加，其中0.135%赤霉酸+0.0031%云苔素内酯+格芙配方组合和单施格芙微生物菌剂处理的效果较好，与毛官杰等（2014）报道生物菌肥与菌剂混合使用可提高二氯喹啉酸胁迫下土壤中微生物量和酶活性的结果一致。

综合来看，0.135%赤霉酸+0.0031%云苔素内酯+格芙200倍液（T2）组合配方可改善二氯喹啉酸污染土壤的生物多样性，对二氯喹啉酸污染土壤具有良好的修复作用，使致害烟株畸形生长得到较好的修复。究其原因可能是赤霉酸和芸苔素内酯促进了致害烟叶的细胞分化和生长，增强了致害烟株的抗逆性，加上格芙微生物菌剂有效降解了二氯喹啉酸，为细菌提供良好的栖息地，致其数量显著增加，随后其与格芙微生物菌剂协同作用于二氯喹啉酸，加快了二氯喹啉酸的降解，而促进污染土壤生态环境的恢复。本研究利用植物生长调节剂和微生物菌剂的共同作用效果，拓展了对二氯喹啉酸污染土壤及其致害烟株的生物修复方法，但本研究仅从烟草农艺性状、植烟土壤微生物数量和酶活性方面初步揭示不同修复剂对二氯喹啉酸污染土壤及其致害烟株的修复机制，至于修复剂对致害烟叶保护酶活性和烟叶超微结构的影响、土壤酶活与土壤微生物间的相关性及其降解功能菌等方面均待进一步探究。

4 结论

0.135%赤霉酸+0.0031%云苔素内酯叶面喷施+格芙200倍液灌根可增加二氯喹啉酸致害烟株根际土壤的微生物数量，改善其微生物多样性，提高土壤脲酶、过氧化氢酶和蔗糖酶活性，促进致害烟株生长，有效缓解二氯喹啉酸致害烟株的畸形症状。

参考文献：

陈泽鹏，邓建朝，万树青，王静，詹振寿. 2007. 二氯喹啉酸致烟草畸形的解毒剂筛选与解毒效果[J]. 生态环境，16（2）：453-456. [Chen Z P，Deng J C，Wan S Q，Wang J， Zhan Z S. 2007. Detoxication of some chemicals for deformity of tobacco by Quinclorac[J]. Ecology and Environment， 16（2）：453-456.]

关松荫. 1986. 土壤酶及其研究法[M]. 北京：农业出版社：274-323. [Guan S Y.1986. Soil Enzymes and the Research Method of Soil Enzymes[M]. Beijing： Agriculture Press：274-323.]

何京亮，徐三玲，贺荣华. 2016. 宁远县烟稻轮作模式下优质晚稻栽培技术[J]. 湖南农业科学，（3）：16-17. [He J L， Xu S L， He R H. 2016. Cultivation techniques ofhigh qualitylatericeundertobacco-ricerotationmodein NingyuanCounty[J]. Hunan Agricultural Sciences， （3）：16-17.]

黄国联，张顺，许家来，杨清林，李斌，李宏光，陈德鑫. 2014. 烟田二氯喹啉酸污染的修复技术研究进展[J]. 安徽农业科学，42（6）：1678-1680. [Huang G L， Zhang S， Xu J L， Yang Q L， Li B， Li H G， Chen D X. 2014. Advance in restoration technology of quinclorac pollution in tobacco plots[J]. Anhui Agricultural Sciences，42（6）：1678-1680.]

李儒海，褚世海. 2013. 二氯喹啉酸对水稻后茬作物的安全性研究[J]. 湖北农业科学，52（23）：5749-5752. [Li R H， Chu S H. 2013. Studies on the safety of quinclorac for succee-ding crops of paddy rice[J]. Hubei Agricultural Sciences， 52（23）：5749-5752.]

刘华山，张志勇，韩锦峰，徐淑霞，毛官杰，袁仕豪，易建华. 2014. 复合菌剂对二氯喹啉酸胁迫下烟草根际土壤微生物及酶活性的影响[J]. 中国烟草学报，41（2）：65-69.[Liu H S，Zhang Z Y，Han J F，Xu S X，Mao G J，Yuan S H，Yi J H. 2014. Effects of compound microbial agents on soil microbe and enzyme activities of tobacco rhizosphere under quinclorac stress[J]. Acta Tobacaria Sinica， 41（2）：65-69.]

毛官杰，孟南，刘华山，潘光伟，韩锦峰，袁士豪，蒲文宣. 2014. 不同微生物制剂对二氯喹啉酸胁迫下烟草根际土壤生物活性的影响[J]. 江西农业学报，26（5）：25-28.[Mao G J， Meng N， Liu H S， Pan G W， Han J F， Yuan S H， Pu W X. 2014. Effects of various microbial preparations on activity of microorganism in rhizospheric soil of tobacco under quinclorac stress[J]. Acta Agricultural Jiangxi， 26（5）：25-28.]

孙扬，徐会娟，李晓晶，李永涛，赵丽霞. 2017. 二氯喹啉酸对农田生态系统的影响及其微生物降解研究进展[J]. 浙江大学学报（农业与生命科学版），43（6）：727-733. [Sun Y， Xu H J， Li X J， Li Y T， Zhao L X. 2017. Research progress in farmland ecological effects and microbial degradation of quinclorac[J]. Journal of Zhejiang University （Agricultural and Life Sciences）， 43（6）：727-733.]

滕春紅，苏少泉. 2006. 除草剂在土壤中的微生物降解及污染土壤的生物修复[J]. 农药，45（8）：505-507. [Teng C H， Su S Q. 2006. Herbicide microbial degradation in soil and bioremediation of contaminated soils[J]. Agrochemicals， 45（8）：505-507.]

王静，陈泽鹏，万树青，邓建朝. 2007. 二氯喹啉酸在烟草水培液中的消解动态及对烟苗生长的影响[J]. 广东农业科学，（2）：59-61. [Wang J，Chen Z P，Wan S Q，Deng J C. 2007. Study on degradation dynamic of quinclorac in water and inhibting activity to tobacco[J]. Guangdong Agricultural Sciences，（2）：59-61.]

吴小虎，徐军，董丰收，刘新刚，郑永权. 2015. 5种除草剂对土壤蔗糖酶和脲酶活性的影响[J]. 农药学学报，17（2）：179-184. [Wu X H，Xu J， Dong F S， Liu X G， Zheng Y Q. 2015. Effects of five herbicides on activities of soil invertase and urease[J]. Chinese Journal of Pesticide Scien-ce， 17（2）：179-184.]

杨晶，谷子寒，王元元，唐利忠，裴晓东，李帆，黎娟，易镇邪. 2016. 长沙烟稻轮作区烤烟正常与推迟采收条件下的适宜晚稻品种筛选[J]. 中国农学通报，32（21）：11-17.[Yang J， Gu Z H， Wang Y Y，Tang L Z，Pei X D，Li F， Li J，Yi Z X. 2016. Optimal late rice variety screening under normal and delayed harvest of flue-cured tobacco in tobacco-rice rotation region of Changsha[J]. Chinese Agricultural Science Bulletin， 32（21）：11-17.]

杨森，黄化刚，龙友华，尹显慧，王英. 2017. 除草剂土壤残留致烟草药害及其修复技术[J]. 山地农业生物学报，36（3）：61-67. [Yang S， Huang H G， Long Y H， Yin X H，Wang Y. 2017. Tobacco phytotoxicity caused by soil herbicide residues and the remediation techniques[J]. Journal of Mountain Agriculture and Biology， 36（3）：61-67.]

杨森，尹显慧，黄化刚，龙友华，吴小毛，王英，代园凤，陈雪，申燕，刘文涛. 2018a. 微生物菌剂对二氯喹啉酸土壤残留致烟草药害的修复效应[J]. 中国生物防治学报，34（5）：779-790. [Yang S，Yin X H，Huang H G，Long Y H，Wu X M，Wang Y，Dai Y F，Chen X，Shen Y，Liu W T. 2018a. Remediation effects of microbial agents in soil on tobacco plants phytotoxicity caused by soil quinclorac residues[J]. Chinese Journal of Biological Control， 34（5）：779-790.]

杨森，尹显慧，龙友华，黄化刚，代园凤，陈雪，刘文涛. 2018b. 竹炭配施有机肥对砜嘧磺隆胁迫下土壤微生物特性及烟草生长的影响[J]. 河南农业科学，47（9）：68-76. [Yang S，Yin X H，Long Y H，Huang H G，Dai Y F，Chen X，Liu W T. 2018b. Effects of combined application of bamboo charcoal and organic fertilizers on soil microbial properties and growth of tobacco plants under rimsulfuron stress[J]. Journal of Henan Agricultural Sciences，47（9）：68-76.]

张国宾，冯秀杰，周星洋，邓松清，钟秋瓒，万树青. 2016. 稻田除草剂残留对后茬作物烟草农艺性状和生理代谢的影响[J]. 华南农业大学学报，37（1）：41-45. [Zhang G B， Feng X J，Zhou X Y，Deng S Q，Zhong Q Z，Wan S Q. 2016. Effects of paddy herbicide residues on agronomic traits and physiological metabolism of tobacco[J]. Journal of South China Agricultural University，37（1）：41-45.]

张丽莉，陈利军，刘桂. 2003. 污染土壤的酶學修复研究进展[J]. 应用生态学报，14（12）：2342-2346. [Zhang L L， Chen L J，Liu G. 2003. Advance in enzyme logical remedition of polluted soils[J]. Chinese Journal of Applied Eco-logy， 14（12）：2342-2346.]

张倩，郭伟，宋超，管志坤，王金亮，牟山，王刚，李义强. 2013a. 二氯喹啉酸在不同土壤中的降解规律及其影响因子[J]. 中国烟草科学，34（6）：83-88. [Zhang Q，Guo W，Song C，Guan Z K，Wang J L，Mou S，Wang G，Li Y Q. 2013a. Degradation dynamics of quinclorac and its influencing factors in four soils[J]. Chinese Tobacco Science， 34（6）： 83-88.]

张倩，宋超，相振波，刘少云，闫晓阳，杨立强，李义强. 2013b. 四种典型稻田除草剂对烟草生长的影响[J]. 中国烟草学报，19（5）：82-88. [Zhang Q，Song C，Xiang Z B，Liu S Y，Yan X Y，Yang L Q，Li Y Q. 2013b. Effects of 4 typical paddy herbicides on growth of tobacco[J]. Acta Tabacaria Sinica，19（5）：82-88.]

张世敏，刘晓霞，徐淑霞，吴坤，刘华山，韩锦峰. 2012. 二氯喹啉酸对土壤微生物的影响[J]. 江苏农业学报，28（3）：538-541. [Zhang S M，Liu X X，Xu S X，Wu K，Liu H S，Han J F. 2012. Effects of quinclorac on soil microbes[J]. Jiangsu Journal of Agricultural Sciences，28（3）：538-541.]

张妤. 2013. 二氯喹啉酸对土壤微生物群落和酶活性的影响[D]. 武汉：华中农业大学. [Zhang Y. 2013. Effect of quinclorac on soil microbial community structure and enzyme activity[D]. Wuhan：Huazhong Agricultural University.]

鄭雄志，李宏光，龙世平，曾维爱. 2013. 几种解毒剂对烟田二氯喹啉酸次生药害的修复效果[J]. 南方农业学报，44（3）：426-430. [Zheng X Z， Li H G，Long S P，Zeng W A. 2013. Remediation effects of different antidotes on phytotoxicity of quinclorac residue in tobacco soil[J]. Journal of Southern Agricultural Sciences，44（3）：426-430.]

Chahil G S，Singh G，Bhardwaj U，Takkar R. 2011. Degradation dynamics of quinalphos on cabbage under subtropical conditions of Ludhiana，Punjab，India[J]. Orbital the Electronic Journal of Chemistry， 3（1）：104-111.

Gardner T，Acosta-Martinez V，Senwo Z，Dowd S E. 2011. Soil rhizosphere microbial communities and enzyme activities under organic farming in Alabama[J]. Diversity， 3（3）：308-328.

Grossmann K. 2010. Auxin herbicides：current status of me-chanism and mode of action[J]. Pest Management Science， 66（2）：113-120.

Kalam A，Tah J，Mukherjee A K. 2004. Pesticide effects on microbial population and soil enzyme activities during vermicomposting of agricultural waste[J]. Journal of Environmental Biology， 25（2）：201-208.

Pascual J A，Garcia C，Hernandez T，Moreno J L，Ros M. 2000. Soil microbial activity as a biomarker of degradation and remediation processes[J]. Soil Biology & Biochemistry，32（13）：1877-1883.