一例猪瘟和猪伪狂犬病的鉴别诊断

滕金玲 李 清 陈为峰 刘 鹏 陈忠霞 谭善杰

（1山东省莒南县动物疫病预防控制中心，山东临沂 276600；2山东省临沂市畜牧兽医检测中心，山东临沂 276003；3山东省临沂市动物疫病预防控制中心，山东临沂 264205；4山东省临沂市畜牧站，山东临沂 276600）

1 发病情况

某猪场饲养21头母猪，产后20日龄左右仔猪出现腹泻、高热、偶有呕吐或盲目运动。抗生素药物治疗无效，同窝死亡率达100%，怀疑患有伪狂犬病。后又出现3窝发病，养猪场主电话求诊。通过了解情况得知该猪场未做任何疫苗免疫，之前生产状况稳定。

1.1 临床观察

3窝发病仔猪为25～30日龄，已隔离。患病仔猪排黄色或黄褐色粘稠稀便，消瘦，食欲减少或废绝，四肢无力，走路摇摆，眼屎增多，眼窝下陷，浑身被粪便污染脏腻。测量体温大都在40.5℃以上，呼吸快，耳尖稍紫，个别病猪呕吐或有神经症状。

1.2 剖检观察

每窝各剖检1头病死仔猪，剖检症状基本相似。死猪肌肉干燥，脱水严重，血液稀薄，肺脏、肾脏呈点状出血，肠内容物为黄色或褐色，淋巴结肿大出血，胃空瘪，其中1头膀胱有零星出血点，其他脏器无病变。

2 实验室检测

对3窝猪进行前腔静脉采血，每窝采集母猪血液和2头患病活仔猪血液，共采9份，编号为1～9号。第一窝：母猪1号，仔猪2号，仔猪3号；第二窝：母猪4号，仔猪5号，仔猪6号；第三窝：母猪7号，仔猪8号，仔猪9号。将9份血样2 000转/分钟离心5分钟后，取出血清备用。

2.1 猪瘟病毒抗体检测

猪瘟病毒抗体检测试剂盒采用美国（IDEXX）生产的ELISA检测试剂盒。具体操作步骤按说明书进行。使用前，所有试剂和微量包被反应板在22℃室温下放置2小时，并通过轻轻涡旋、旋转混匀。

2.1.1 判定方法

阴性对照平均OD450nm＝1.076＞0.500，阳性对照阻断率＝86.2%＞50%，试验成立。

计算被检样本阻断率＝（阴性对照平均OD450nm－样本OD450nm）/阴性对照平均OD450nm×100%。

如果被检样本的阻断率≤30%，该样本被判为阴性，无猪瘟抗体存在；被检样本阻断率＞40%，该样本被判为阳性，有猪瘟抗体存在；如果被检样品阻断率在30%～40%之间，该样本判为可疑。

2.1.2 检测结果

由表1可知，母猪在没有免疫猪瘟疫苗的情况下，猪瘟抗体阻断率分别达到94%、93%、92%，应视该抗体为野毒抗体，该母猪为猪瘟病毒带毒猪。6头患病仔猪的猪瘟病毒抗体阻断率很低，均在30%以下，且均为负值，说明患病仔猪猪瘟抗体阴性，无猪瘟抗体存在，猪瘟感染风险性大。

2.2 猪瘟病毒抗原检测

猪瘟病毒抗原检测试剂盒采用美国（IDEXX）的ELISA检测试剂盒。使用前，所有试剂和微量包被反应板在22℃室温下放置2小时，并通过轻轻涡旋、旋转混匀。整个试验过程严格操作程序，且不同的样本和试剂使用不同的吸头。2.2.1 判定方法

阳性对照OD的平均值（1.000）与阴性对照OD的平均值（0.085）之差为0.915，大于0.150；阴性对照OD的平均值为0.085，小于0.250，试验成立。计算S－N值，即样品S（OD450nm）与阴性对照N（OD450nm）的平均值之差。被检样本S－N值≤0.100判为阴性；被检样本S－N值＞0.300判为阳性，即为感染猪瘟；被检样本0.100＜S－N值＜0.300，判为可疑。

2.2.2 检测结果

2号、3号、5号、6号、8号、9号6头患病仔猪的猪瘟病毒抗原S－N值均很高，大于0.3（见表2）。表明6头患病仔猪都感染了猪瘟病毒，并且已呈现出明显的临床症状，说明6头患病仔猪均在猪瘟感染发病期（病毒血症期）。

2.3 猪伪狂犬病毒gE抗体检测

猪伪狂犬病毒 gpI（gE） 抗体检测采用美国（IDEXX）检测试剂盒。使用前，所有试剂和微量包被反应板恢复至室温（18～26℃），并通过轻轻涡旋、旋转或颠倒混匀。整个实验过程严格操作程序，且不同的样本和试剂使用不同的吸头。

2.3.1 判定方法

阴性对照N（OD650nm）的平均值（0.879）减去阳性对照P（OD650nm）的平均值（0.169）等于0.71，大于0.300，试验成立。计算S/N值，即样品S（OD650nm）与阴性对照N（OD650nm）的平均值之比。被检样本S/N值≤0.60判为阳性，即被伪狂犬野毒感染；被检样本S/N值＞0.60判为阴性；被检样本0.60＜S/N值≤0.70，判为可疑，过一段时间后需要重新检测。

2.3.2 检测结果

1～9号9头猪伪狂犬病毒gE抗体S/N值均为阴性，且gE抗体水平基本一致，表明均未感染猪伪狂犬病毒（表3）。

2.4 猪伪狂犬病毒gB抗体检测

猪伪狂犬病毒gB抗体检测采用美国（IDEXX）ELISA试剂盒。使用前，所有试剂和微量包被反应板一律恢复至室温（18～26℃），并通过轻轻涡旋、旋转或颠倒混匀。

表1 猪瘟病毒抗体阻断率

表2 猪瘟病毒抗原S-N值

2.4.1 结果有效性

阴性对照N（OD650nm）的平均值（1.315）减去阳性对照P（OD650nm）的平均值（0.101）等于1.214，大于0.300，试验成立。计算S/N值，即样品S（OD650nm）与阴性对照N（OD650nm）的平均值之比。结果判定：被检样本S/N值≤0.60判为PRV抗体阳性；被检样本S/N值＞0.60判为PRV抗体阴性；被检样本0.60＜S/N值≤0.70，判为可疑，过一段时间后需要重新检测。

表3 伪狂犬病毒gE抗体S/N值

表4 伪狂犬病毒gB抗体S/N值

2.4.2 检测结果

9头猪伪狂犬病毒gB抗体S/N值均为阳性，且gB抗体水平基本一致，说明1～9号猪伪狂犬病毒抗体状况稳定（表4）。

3 诊断结论

由以上结果分析得出，该猪场发病猪为猪瘟感染病例，而非伪狂犬病病例。

4 总结

4.1 猪瘟和猪伪狂犬病临床相似点

体温高（40.5℃以上）、眼分泌物多、呼吸快、组织末梢发紫，皮下有出血点，呕吐，出现神经症状，拉黄色稀便，肾脏和肺脏呈点状出血，有扁桃体出血、坏死等症状。

4.2 猪瘟和猪伪狂犬病临床不同点

⑴病原不同：猪瘟病毒是黄病毒科、瘟病毒属、RNA病毒；猪伪狂犬病毒是疱疹病毒科、水痘病毒属、DNA病毒。

⑵临床症状不同：猪瘟呈现全身皮下出血点或斑，甚至大面积融合性出血，重者全身呈“紫罗兰”色。猪瘟表现全身组织、器官泛性出血，后期皮肤苍白或黄染，高热稽留，仔猪腹泻，粪便起初黄色粘稠，后期褐色，中大猪尿液为黄褐色，粪便干稀交替，甚至血便等。

猪伪狂犬病呈现腹下或腹股沟皮下出血点，少数病例会出现皮肤坏死，仔猪呕吐、腹泻、拉黄白色稀便、转圈等盲目运动，叫声嘶哑，耳朵直立，目光呆直，趋暗避光，中大猪顽固性咳嗽，后躯麻痹；母猪流产、木乃伊胎，屡配不孕不发情或情期不规律；公猪睾丸、精液质量下降等。

⑶剖检病变不同：猪瘟以出血为主。典型猪瘟病例呈现全身组织器官的广泛性出血，包括心、肝、脾、肺、肾、肠、胃、膀胱、肋骨、肌肉、脂肪等，喉头出血，淋巴结周边出血，脾脏出血性坏死，回盲结处钮扣状溃疡灶，血凝不良等。

猪伪狂犬病以坏死为主。某些器官心、肝、脾、肺、肾等出现白色、颗粒状、凝固性、米粒至豆粒大小的坏死灶，淋巴结肿大坏死、质地坚硬、红白相间；扁桃体、喉头气管坏死，颌下、胃部、肠系膜水肿等。

4.3 小结

猪瘟和猪伪狂犬病分别是由不同的病毒引起的病毒性疾病，但是在临床发病中，很多时候表现出相似的临床症状和剖检变化，凭经验和肉眼难以做出诊断。因此，必须采用实验室诊断方法才能进行确诊。实践中，采用血清学ELISA方法进行猪瘟抗原、猪瘟抗体和猪伪狂犬病毒gE抗体检测，进行鉴别性诊断；或采集相应病料用PCR方法进行猪瘟和猪伪狂犬病的病原学检测加以确诊，这两种方法可操作性强，结果精准，是兽医实验室检测猪病的常用方法。