猪对功能性饲料黄腐酸的耐受性评价研究

白会新 ，王靓靓 ，翟宝库，陈立伟，董玉龙

（1.大庆市畜牧技术推广站，黑龙江 大庆 163311；2.大庆市动物卫生监督所，黑龙江 大庆 163311；3.大庆市动物疫病预防与控制中心，黑龙江 大庆 163311）

随着抗生素类药物逐渐被限制在饲料中使用，开发可替代抗生素类的饲料添加剂已成为饲料领域的研究热点和追求方向。非营养性资源的开发，已经打破了饲料资源短缺窘境，腐殖酸类物质是动植物残骸经微生物分解形成的有机物，广泛存在于煤炭、湖泊、土壤等自然环境中[1]，大量研究已经表明其具有抗菌、解毒、消炎的作用，并且能促进动物生长，提高饲料利用效率，增强免疫力，调节畜禽生产环境，提高经济效益[2]。前期试验已证实黄腐酸作为天然有机酸腐殖酸的主要成分，能够有效地提高生长育肥猪的生产性能、胴体性状、免疫能力和抗氧化能力[3-5]，作为一种有效的绿色环保功能型饲料资源被应用于动物饲料领域。本试验依据前期试验确定的0.6%的黄腐酸合理添加剂量，对育肥猪饲喂高剂量（6%黄腐酸）日粮来观测对育肥猪的生产性能、血液指标及组织病理学影响，以确定黄腐酸对育肥猪的安全用量范围和承受能力，为黄腐酸在育肥猪应用推广中提供一定的实际理论依据。

1 试验材料与方法

1.1 试验材料

1.2 试验设计和分组

本试验采用单因素完全随机试验设计，选取平均体重为60±2.5 kg的外三元育肥猪30头，随机分为3个组，每个组10头。第1组为玉米-豆粕型基础饲粮（对照组），第2组和第3组分别为基础饲粮+0.6%黄腐酸和基础饲粮+ 6%黄腐酸。试验猪体重达到90～100 kg时，试验结束。

1.3 试验日粮

试验日粮参照NY/T 33-2004和NRC（1998）配制，日粮组成及营养含量见表1。

1.4 饲养管理

按照猪场常规管理进行。当体重达到90 kg以上出栏体重时，每组各屠宰4头。

1.5 试验测定指标与方法

1.5.1 生产性能

试验期内每天观察试验动物临床表现、采食和饮水情况、生长情况；详细观察和记录不良反应。试验结束每组称重，计算平均日增重，并统计计算平均采食量、饲料转化率。

1.5.2 血液学指标检测

试验结束，各组随机屠宰3头，采血，抗凝管中存放。

血液常规指标：白细胞计数（WBC）、红细胞计数（RBC）、血红蛋白（HGB）、红细胞压积（HCT）、血小板计数（P LT）等。采血，自然析出血浆，在3 000 r/min离心机中离心10 min，上清液分装于1.5 mL eppendof管中，置-30 ℃冰箱保存待用。

各类用户在该操作系统的使用权限各不相同，具体分为以下几种权限：（1）教师的权限为输入、查询与输出自己的个人信息；（2）评价部门管理者的权限为审核教师上传到由本部门考核栏目的相关信息，以及在全校范围内结合部门考核对教师的综合考核结果进行排序等；（3）超级用户（校长或经学校授权者）具有增减考核栏目（板块）、评价要素的权限，修改各板块评价要素权重的权限，以及对全校教师进行综合评价和某一单项评价的权限。本调查研究团队成员邱健筠为“教师专业发展评价系统”架构的操作系统如图3所示[4]。

基本生化指标：谷氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、谷丙转氨酶（GPT）、谷草转氨酶（GOT）、总蛋白（TPRO）、白蛋白（ALB）、尿素氮（SUN）、肌酐（CRE）、血糖（GLU）、总胆红素（TBILI）等指标。采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒，在全自动生化分析仪上测定。

表1 基础日粮组成及营养含量

表2 黄腐酸对生长育肥猪生产性能的影响

表3 育肥猪出栏血常规指标

表4 生长育肥猪出栏血液生化指标

1.5.3 组织病理学检查

试验结束，各组称重后，屠宰的猪只观测高剂量组及尸检异常动物的主要器官进行称重，计算脏器比，同时进行系统的组织病理学检查，详细检查的器官和组织包括：心、肝、肾等组织制作切片。采用常规石蜡切片，HE染色，组织切片制作。

1.6 数据统计分析

试验数据采用SPSS 18.0统计软件进行方差分析， 用Duncan’s进行多重比较。试验数据采用“平均值±标准误”表示。

2 结果与讨论

2.1 生产性能

由表2可知，各组猪只的平均日增重、平均日采食量和料重比均无显著差异（P＞0.05）。黄腐酸组较对照组有较大的促生长作用，0.6%黄腐酸组与对照组相比平均日增重提高48 g。各组猪只临床表现正常。

2.2 血常规指标

由表3可知，黄腐酸组血液中各个指标都有增加趋势。6%黄腐酸组的血液白细胞数量显著高于对照组（P＜0.05）。

2.3 血液生化指标

由表4可知，黄腐酸对猪各项血液生化指标无显著影响（P＞0.05）。屠宰前，日粮中6%黄腐酸组与照组相比，ALT、GOT、ALP、GRE、ALB有 升高趋势；SUN、TBIL、TP有降低趋势；GLU无明显变化。

2.4 脏器比重

表5 黄腐酸对育肥猪脏器官比重的影响

从表5中可知，6%黄腐酸组各脏器官与对照组相比，差异不显著（P＞0.05）。各器官重量没有发生较明显变化。

2.5 组织病理切片

2.5.1 心脏

组织样品采样时可发现各组猪心肌色泽正常，无坏死灶。组织病理切片（图1-图3）可见心肌纤维清晰，排列紧密，规则，无结缔组织增生，无炎性细胞浸润，心肌纤维短柱状，互相连接成网状，各组之间的形态学比较无差异（HE染色，100×）。

图1 对照组心肌切片，100×

图2 0.6%黄腐酸组心肌切片，100×

图3 6%黄腐酸组心肌切片，100×

2.5.2 肝脏

采集样品时可见肝脏表面光滑，无出血和渗出。由图4-图6（HE染色，100×）可知：对照组肝细胞排列整齐，未见异常；0.6%黄腐酸组可见肝细胞排列整齐，未见异常；6%黄腐酸组肝细胞板排列整齐，肝窦轻度淤血，小叶间胆管扩张，小叶间静脉扩张，局部组织可见灶状淋巴细胞分布。

图4 对照组肝脏切片，100×

图5 0.6%黄腐酸组肝脏切片，100×

图6 6%黄腐酸组肝脏切片，100×

2.5.5 肾脏

采集样品时各组肾脏外观未见异。由图7-图9可知，对照组肾脏皮质、髓质结构正常，肾小球、肾小管排列及形态未见异常，肾间质轻度淤血；0.6%黄腐酸组肾小球，肾小管排列及形态未见异常；6%黄腐酸组肾小管上皮细胞部分脱离基底膜，部分细胞轻度萎缩，肾间质较好。

图7 对照组肾脏切片，100×

图8 0.6%黄腐酸组肾脏切片，200×

图9 6%黄腐酸组肾脏切片，200×

3 小结

3.1 生产性能

黄腐酸组猪生长速度表现优于对照组，饲料转化率有所提高。0.6%黄腐酸组生产性能较对照组表现出较大的增加趋势，增重速度加快，采食量上升，这与之前试验结果一致。6%黄腐酸组肥育减慢，略优于对照组。黄腐酸组猪生产性能均高于对照组但并未达到显著性水平（P＞0.05）。

3.2 血常规指标和血液生化指标

黄腐酸组肌酐高于对照组，但差异不显著，这可能与肾脏功能某些变化有关，然而屠宰后各器官指数并未发生明显变化的趋势。各组其他指标也无显著差异（P＞0.05）。

3.3 组织病理切片结果

黄腐酸组猪的心脏、肝脏均未见病变发生，6%黄腐酸组猪的肝脏出现淋巴细胞浸润，0.6%黄腐酸组并未引起这些变化。虽然6%黄腐酸组对育肥猪的脏器产生轻微变化，但并未影响其正常生长，可以承受该剂量的添加耐受。

4 结论

1）日粮中添加高剂量6%黄腐酸对育肥猪的生产性能有所提高但并未产生显著影响；

2）日粮中添加高剂量6%黄腐酸未对生长育肥猪的血常规和血液生化指标造成不利影响；

3）日粮中添加高剂量6%黄腐酸可能导致生长育肥猪肾脏发生轻微病变，但并不影响猪只正常生长；

4）育肥猪对黄腐酸的耐受剂量可达到6%。