2015～2017年四川省凉山彝族自治州第一人民医院临床分离菌耐药性检测分析

陈旭 周文 王琳 李享宸 陈丽

[摘要] 目的 分析四川省涼山彝族自治州第一人民医院（以下简称“我院”）2015～2017年临床分离病原菌及其耐药性变迁。 方法 采用全自动微生物鉴定及药敏系统对我院2015年1月～2017年12月临床标本分离的病原性细菌进行鉴定及药敏试验，所有实验数据用WHONET 5.6软件进行分析。 结果 共分离出病原菌6529株，其中，革兰阴性菌占68.25%，革兰阳性菌占31.75%。革兰阴性菌以大肠埃希菌[1399株（21.43%）]、鲍曼不动杆菌[1017株（15.58%）]、肺炎克雷伯菌[518株（7.93%）]及铜绿假单胞菌[324株（4.96%）]最为常见。革兰阳性菌中前四位细菌分别为金黄色葡萄球菌[782株（11.98%）]、肺炎链球菌[261株（4.00%）]、表皮葡萄球菌[199株（3.05%）]和粪肠球菌[196株（3.00%）]。大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶（ESBL）菌株较往年检出率下降，但肺炎克雷伯ESBL菌株检出率稍有上升。鲍曼不动杆菌对多种抗生素耐药问题严重。未发现耐甲氧西林金黄色葡萄球菌，但2017年分离出20株（14.49%）万古霉素中介耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌。 结论 细菌耐药问题依然严重，合理使用抗菌药物、加强细菌耐药监测、隔离消毒等措施需进一步加强。

[关键词] 临床分离菌；耐药性；抗菌药物

[中图分类号] R446.5 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2018）05（b）-0163-06

Monitoring and analysis of clinical isolates′ drug resistance in the First People's Hospital of Liangshan Yi Autonomous Prefecture， Sichuan Province from 2015 to 2017

CHEN Xu ZHOU Wen WANG Lin LI Xiangchen CHEN Li

Department of Clinical laboratory， First Hospital of Liangshan Yi Autonomous Prefecture， Sicuan Province， Xichang 615000， China

[Abstract] Objective To investigate the clinical isolates and their changes in antimicrobial resistance in the First Hospital of Liangshan Yi Autonomous Prefecture of Sicuan Province （"our hospital" for short） from 2015 to 2017. Methods Automated bacterial identification and drug sensitivity system was used to explore the clinical specimens of microbial pathogens in our hospital from January 2015 to December 2017， and the drug susceptibility to conventional antibiotics was determined. The data was analyzed using WHONET 5.6 software. Results A total of 6529 non-duplicated clinical isolates was collected. Of the isolated germs， Gram-positive and Gram-negative bacteria accounted for 31.75% and 68.25%， respectively. The Gram-negative bacteria were mainly composed of Escherichia coli [1399 （21.43%）]， Acinetobacter baumannii haemolyticus [1017 （15.58%）]， Klebsiella pneumonia [518 （7.93%）] and Pseudomonas aeruginosa [324 （4.96%）]. The most common gram-positive bacteria were Staphylococcus aureus [782 （11.98%）]， Streptococcus pneumoniae [261 （4.00%）]， Staphylococcus epidermidis [199 （3.05%）] and Enterococcus faecium [196 （3.00%）]. The positive rate of extended-spectrum β-lactamase （ESBL） producing Escherichia coli was lower than before， but ESBL producing Klebsiella pneumoniae increased slightly. In addition， resistant multiple antibiotics of Acinetobacter Baumannii haemolyticus was severely. There were no methicillin resistant staphylococcus aureus， but 20 strains （14.49%） methicillin resistant coagulase negative staphylococci were isolated in 2017. Conclusion The problem of antimicrobial resistance is still serious. Measures， such as rational use of antibiotics， monitoring of drug resistance and medical asepsis， should be further strengthened.

[Key words] Clinical isolates； Antimicrobial resistance； Antibiotics

近年来，由于抗菌药物长时间联合使用，细菌耐药性逐年上升引起医院对细菌耐药性监测的重视[1-2]。了解四川省凉山彝族自治州第一人民医院（以下简称“我院”）常见的临床分离菌及耐药性变迁，对临床合理用药有一定的指导意义，也可以给本地区耐药监控提供参考。本研究将我院2015～2017三年的相关资料作统计分析，现报道如下：

1 材料与方法

1.1 研究材料

1.1.1 标本来源 选择我院2015年1月～2017年12月住院及门诊患者送检的各类培养标本。

1.1.2 仪器 美国BD全自动血培养仪、美国德灵MicroScan-WalKAwaY 96 Plus全自动微生物鉴定及药敏测试系统、深圳迈瑞TDR-300B自动微生物分析系统等。

1.1.3 试剂 英国OXOID公司的各种无菌培养基、Miro？鄄Scan 革兰阳性菌鉴定及药敏板、MiroScan革兰阴性菌鉴定及药敏板、深圳迈瑞TDR各类细菌鉴定及药敏板。

1.2 方法

遵照《全国临床检验操作规程》（第4版）[3]相关规定进行细菌培养分离；通过MicroScan-WalKAwaY 96 Plus自动微生物鉴定及药敏测试系统、深圳迈瑞TDR-300B自动微生物分析系统进行鉴定和抗菌药物敏感试验；药敏判断参照历年美国临床和实验室标准化协会（CLSI）文件标准[4]。

1.3 统计学方法

所有数据采用WHO细菌耐药性监测网提供的WHONET 5.6软件进行统计分析。

2 结果

2.1 送检标本分布

2015～2017年我院从送检培养标本中共分离出病原菌6529株。分离菌在各类感染性标本中构成比详见表1。

2.2 病原菌分布

2015～2017年我院共检出病原菌6529株，其中革兰阴性菌占68.25%（4456/6529），革兰阳性菌占31.75%（2073/6529）。常见病原菌分布详见表2。

2.3 葡萄球菌属耐药表型检出率及对常用抗菌药物的耐药性

2015～2017年共检出葡萄球菌属细菌1171株，检出率为17.94%。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的检出率为30.86%，耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的检出率为91.56%。葡萄球菌属中未发现万古霉素和利奈唑胺耐药的菌株，但2017年分离出20株（14.49%）万古霉素中介的MRCNS。见表3～4。

2.4 肠球菌属对常用抗菌药物的耐药性

2015～2017年共检出肠球菌属细菌273株，检出率为4.18%，其中粪肠球菌196株，占71.79%，粪肠球菌77株，占28.21%。见表5。

2.5 常见肠杆菌科细菌对常用抗生素的耐药性及超广谱β-内酰胺酶（ESBL）菌株的分离率

2015～2017年共检出肠杆菌科细菌2614株，占40.04%。其中前4位分别为大肠埃希菌[1399株（53.52%）]、肺炎克雷伯菌518株（19.82%）]、阴沟肠杆菌[199株（7.61%）]、奇异变形杆菌[89株（3.40%）]。常见肠杆菌科细菌对常用抗生素的耐药性详见表6，ESBL菌株的分离率详见表7。

2.6 非发酵菌细菌对常用抗生素的耐药性

2015～2017年共檢出非发酵菌细菌共1546株，占总数23.68%。其中，鲍曼不动杆菌检出1077株，占69.66%，其次为铜绿假单胞菌（324株，检出率20.96%）。非发酵菌细菌对常用抗生素的耐药性详见表8。

3 讨论

结果显示，我院标本来源主要为呼吸道和尿液，占标本总量的65.31%，其中痰液更是占到了49.5%。而无菌体液和血液/骨髓标本占送检标本总量的24.44%，比例偏低。虽与CHINET参与单位送检标本分布大体一致[5]。但在临床诊疗过程中，无菌部位标本采集对感染性疾病的诊断和治疗意义重大，所以有学者提出应鼓励多送检无菌体液标本或者灌洗组织标本，以提高分离株对感染性疾病的临床符合性[6]。

2015～2017年我院共检出细菌6529株，其中革兰阴性菌占68.25%，革兰阳性菌占31.75%，与全国及其他地区相同[5，7]。革兰阴性菌中肠杆菌科细菌占40.04%，主要依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、阴沟肠杆菌和奇异变形杆菌。非发酵菌属细菌共1546株，占总数23.68%，其中，鲍曼不动杆菌检出1077株，占非发酵菌的69.66%，其次为铜绿假单胞菌。细菌分布与四川省其他地区报道结果一致[8]。

金黄色葡萄球菌被全球卫生界确认是医院感染革兰阳性球菌的重要代表菌，该菌引起的感染仅次于大肠埃希菌占第2位[9]。本次统计数据显示，我院三年内MRSA检出率均大于25%，较全国38.4%的检出率低。目前未发现万古霉素耐药MRSA，但2017年检出20株（14.49%）万古霉素中介的MRCNS，这可能与临床万古霉素的使用增多有关，随着耐药菌株的逐步出现，使得金黄色葡萄球菌的治疗更加困难，值得引起高度重视。

耐万古霉素粪肠球菌（VRE）从2015年的1.79%上升到2017的10.29%，两种肠球菌虽然对利奈唑胺耐药率较低，但呈现逐年上升趋势。结果显示，青霉素和氨苄西林对粪肠球菌抗菌活性好，而奎奴普丁/达福普汀对粪肠球菌活性好，与文献报道相似[10-11]。肠球菌具有固有和获得性耐药，其对头孢菌素类、林可酰胺类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类等多种抗菌药物的敏感性低[12-13]。由于临床经验抗菌治疗用药常不能覆盖肠球菌，且粪肠球菌和粪肠球菌对抗菌药物的敏感性存在一定差异，所以有学者建议应及时根据药敏结果针对性抗菌治疗[14]。

革兰阴性菌的细菌耐药性问题日趋严重，临床上对于某些耐药菌感染的治疗方法极为有限[15]。2015～2017年我院产ESBL大肠埃希菌检出率为60.04%，肺炎克雷伯菌ESBL检出率为39.00%， 2016年全国耐药监测资料显示，上述菌株的ESBL检出率分别为45.2%和25.2%，均低于我院检出率。碳青霉烯类抗菌药物是治疗多重耐药肠杆菌引起感染的最有效的药物，但近年来肠杆菌碳青霉烯类耐药株（CRE）检出率呈逐年上升的趋势[16]。研究表明，碳青霉烯类抗生素使用频率是ICU病房内革兰阴性菌耐药的独立危险因素[17-19]。因为长期应用此种抗生素可诱导病原菌产生碳青霉烯酶，水解碳青霉烯类抗生素，产生耐药性。

非发酵菌中，鲍曼不动杆菌占主要地位（69.66%），且对常见抗生素的耐药程度较高。鲍曼不动杆菌是一种非发酵型革兰阴性菌，广泛存在于医院环境中，具有生存能力强、抵抗力强、定植率高、易耐药等特点，已经成为全世界范围内ICU感染的主要致病菌[20-22]。当鲍曼不动杆菌对其他药物耐药或疗效不佳时，多粘菌素B可作为选用药物，但因其肾毒性大，对重症患者特别是肾功能不全患者要密切监测血肌酐、尿素氮水平[23-24]。

我院2015～2017年耐药菌监测与全国范围比较有同有异，细菌耐药问题依然严重。持续监测细菌耐药性变化，对于临床感染性疾病的诊治有重要意义。

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（收稿日期：2018-04-08 本文编辑：苏 畅）