国外肉羊品种胚移植妊娠率比对试验

卢继华

（朝阳市朝牧种畜场有限责任公司，辽宁 朝阳 122000）

发展现代肉羊产业，改进经营管理方式，完善产业链条和提升肉羊品牌，对进一步促进农牧业结构优化升级、保护生态、增加农民收入、加快绿色农畜产品生产建设具有战略意义和现实意义。朝阳市种羊场于2012年引进了鲜胚移植技术，其优点为：统一饲养、整齐度高，减少劳动力，有利于市场销售，利于订单农业的发展。本着为国家肉羊核心育种场提供技术资料储备，同时培训改良服务分站技术人员的目的，我场进行了不同年龄不同品种肉羊鲜胚移植妊娠率比对试验。

1 材料与方法

1.1 供体羊 选择遗传素质优秀、繁殖性能良好、营养状况良好、体格健壮、没有疾病的羊作为供体羊。本试验选取了50只不同月龄的白头杜泊羊和50只白头萨福克羊作为供体羊分组并标记：3月龄白头杜泊羊10只，分为第一组；5月龄白头杜泊羊10只，分为第二组；9月龄白头杜泊羊10只，分为第三组；11～23月龄白头杜泊羊20只，分为第四组；11～23月龄白头萨福克羊50只，分为第五组。

1.2 药品及器材 药品：胚胎培养液、冰袋、生理盐水、苯扎氯铵、碘酒、兽用青霉素、黄嘌呤粉、FSH、孕马血清、CIDR、羊用阴道海绵塞、氯前列醇（PG）、黄体酮、麻醉剂（2%安静松）、苏醒灵等。器材：高压灭菌器、20 mL注射器、10 mL注射器、5 mL注射器、1 mL注射器、胚胎移植手术架、手术刀片、医用缝合线、立体显微镜、红胚管、收集方盘、培养玻璃皿、卫生纸、医用小喷壶、有色标记笔、宫颈扩张器、胚胎移植装置、兽用剪刀、兽用手术剪、兽用解剖刀、长止血钳、毛巾夹、持针器、兽用手术锉、兽用缝合针、伤口巾、止血纱布、脱脂棉、脸盆等。

1.3 时间和地点2017年8～10月在朝阳市朝牧种羊场进行。

1.4 超数排卵处理 供体母羊超排采用促卵泡素（FSH）递减注射配合PMSG的方法。在同期发情后第10天开始，连续3 d，2次/d，间隔12 h注射FSH。第1次注射FSH的同时注射PMSG。第5次注射FSH的同时撤栓并肌肉注射PG。第6次注射FSH之前对供体母羊进行试情，对发情的供体母羊颈静脉注射黄体生成素（LH）。

1.5 供体受体羊发情鉴定 受体母羊取出海绵塞后，将公羊放入母羊群中，通过试情方法测试母羊发情情况，每天早晚各1次。挑选发情母羊，登记耳号，标记后分组；供体母羊撤去CIDR栓后采用同样的试情方法进行发情鉴定，挑出发情母羊，记录耳号，同时颈静脉注射促黄体生成素，并在12 h后人工输精。

1.6 子宫角输精 手术前1 d停止喂食，自由饮水，并清洁手术部位。术前采用硬膜外麻醉联合局部浸润麻醉。手术部位皮肤先用2%～4%碘酒消毒，干燥后，用75%酒精棉擦去碘酒。将创巾固定在手术区域并暴露手术区域。使用外科手术刀将皮肤切开4～6 cm切口，沿着肌纤维的方向通过钝性分离剥开肌肉，最后切开腹膜。切口时注意及时止血。操作者将食指和中指从切口插入腹腔中以接触子宫角，用两个手指夹住并将子宫角引导至伤口表面。观察卵巢表面的排卵点和卵泡发育情况并记录。子宫拉出切口，将稀释的高质量精液送入子宫角。在输精前观察卵巢的卵泡发育情况和排卵点情况，以确定输精量是否输精。子宫角一侧通常推入0.2～0.6 mL精液。

1.7 闭合手术 行子宫角受精后，手术部位，特别是出血或凝血部位，用含有青霉素的生理盐水冲洗。凝块清除后，进行缝合。在第一层中，用10～12根丝线缝合腹膜，然后散布少量青霉素。在第二层中，对皮肤和肌肉进行结扎和缝合。缝合过程要注意伤口封闭以避免伤口退化和外翻。缝合针和针之间的距离约为0.5 cm，距离应均匀，所有结打在同一侧。最后，用镊子处理切口中的真空皮肤以对齐伤口边缘，然后切口用5%碘酒消毒。

1.8 胚胎移植 将母羊放在保定架上仰卧保定，切开乳房一侧的腹壁，将子宫角和输卵管拔出切口。如果胚胎来自供体的输卵管，将包含胚胎的细吸管插入受体的输卵管口中，缓慢注入输卵管。从供体子宫角的顶端获得的胚胎，在距离子宫角顶端12 cm处用钝针刺破子宫，然后将连接了细导管的注射器装载胚胎后插入子宫中，轻轻将含有胚胎的注射液推送入子宫，迅速使子宫和输卵管复位，然后缝合腹壁。

1.9 数据处理 使用软件检验分析数据。

2 结果与分析

2.1 不同种类和不同月龄的绵羊冲胚效果

表1 不同品种和不同月龄供体羊冲胚情况统计Table 1 Statistics of embryo flushing in different breeds and ages of donors

冲胚结果表明，使用130～140 IU的促卵泡素，10只3月龄的白头杜泊羊，获得的头均胚胎数为3.8个，可用胚胎数为3.6个。使用145～155 IU促卵泡素处理的10只5月龄的白头杜泊羊平均获得5.5个胚胎，平均可用胚胎数为5.1枚。使用155～160 IU的促卵泡素处理的10只9月龄的白头杜泊羊头均获得胚胎数是6.6个，可用胚胎数5.8个。使用170～180 IU促卵泡素处理的20只11～23月龄的白头杜泊羊，头均获得胚胎数为7.0个，可用胚胎数为6.8。使用160～170 IU促卵泡素处理的50只11～23月龄的白头萨福克羊，头均获得胚胎8.3个，可用胚胎8.1个。统计分析结果显示，与11～23月龄供体相比，3月龄时的头均获得胚胎数可用胚胎数相比，差异显著（P＜0.05）。其他各月龄组之间相比，获得的胚胎数和可用胚胎数均无显著差异（P＞0.05）。11～~23月龄的白头萨福克羊和11～23月龄白头杜泊羊之间，获得的胚胎数和可用胚胎数没有显著差异（P＞0.05）。

2.2 移植结果

表2 不同月龄不同品种鲜胚移植妊娠率统计Table 2 Statistics of pregnancy rates in different ages and breeds

3月龄10只白头杜泊羊共冲出38枚胚胎，可用胚胎为33枚，33枚鲜胚移植33只受体母羊，移植妊娠率为40%。5月龄10只白头杜泊羊共冲出36枚胚胎，可用胚为33枚，33枚鲜胚移植33只受体母羊，移植妊娠率为48%。9月龄10只白头杜泊羊共冲出52枚胚胎，可用胚胎为50枚，45枚鲜胚移植45只受体母羊，移植妊娠率为55%。11～23月龄20只白头杜泊羊共冲出188枚胚胎，可用胚为184枚，184枚鲜胚移植184只受体母羊，移植妊娠率为71%。11～23月龄50只白头萨福克羊共冲出355枚胚胎，可用胚为346枚，346枚鲜胚移植346只受体羊，移植妊娠率为64%。

3 讨论

本试验对于不同月龄的白头杜泊进行冲胚，结果表明，3月龄、5月龄、9月龄和11～23月龄白头杜泊头均冲胚数和可用胚数分别为4.6枚和4.5枚、5.7枚和5.4枚、6.8枚和5.9枚、8.0枚和7.6枚。移植妊娠率分别为40%、48%、55%、71%。进一步统计分析结果表明，3月龄白头杜泊的冲胚数和可用胚数与11～23月龄白头杜泊冲胚数和可用胚数之间存在显著差异（P＜0.05）。不同月龄白头杜泊移植妊娠率差异不显著（P＞0.05）。成年白杜泊冲胚数和可用胚数比3月龄和5月龄杜泊高的原因可能是3月龄和5月龄杜泊均为初产母羊，且生殖系统发育不成熟或处于发育旺盛期，影响其卵泡发育数量及卵母细胞质量。不同年龄阶段母羊对药物的敏感性不同。11～23月龄白头杜泊胚胎移植妊娠率相对较高的主要原因可能是成年母羊的卵巢发育好，冲胚数高，胚胎质量好。成年母畜生殖系统发育成熟，易于胚胎着床。

4 结论

从本试验结果可以得出对于11～23月龄白头杜泊羊和白头萨福克羊使用170～180 IU促卵泡素进行超数排卵效果较好。白头萨福克羊作供体母羊比白头杜泊羊利用价值高，胚胎移植潜力大。对于3月龄白头杜泊羊使用130～140 IU促卵泡素进行超数排卵效果不佳，移植妊娠率相对较低。