昆明地区地贫基因型与红细胞参数变化分析

袁玉 宋宇 唐睿珠 李欢 王云娟 张娟 黄松苓 徐秋月

（1镇雄县人民医院检验科 云南 昭通 657000）

（2昆明医科大学第一附属医院检验科 云南 昆明 650031）

地贫是编码珠蛋白的α或β类珠蛋白基因发生缺失或点突变，使α或β类珠蛋白链缺失或不足所致的遗传性溶血性贫血，多见于东南亚、地中海区域,我国西南、华南一代为高发地区[1]，最常见的是α型和β型两种，α-地贫基因携带率为2%至18%不等，β-地贫基因携带率为1%至9%不等[2-3]，严重地影响了高发地区的出生人口质量。因此早期对广大人群进行地中海贫血筛查能有效地防止地贫患儿的出生，降低人群地贫基因携带率和发病率。云南地区一些基层医院采用操作简单的血常规参数如红细胞计数（RBC）、血红蛋白（Hb）、红细胞平均体积（MCV）、红细胞平均血红蛋白量（MCH）、红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）及红细胞分布宽度（RDW）等作为地贫筛查的方法，但鲜有对红细胞各项参数指标与地贫基因型进行相关性研究。为更好的掌握地贫不同基因型的筛查指标特征，促进地贫的临床筛查及诊断，本研究通过对不同基因类型地中海贫血携带者红细胞参数指标进行回顾性统计分析。

表2 不同基因型地中海贫血红细胞参数比较（±s）

表2 不同基因型地中海贫血红细胞参数比较（±s）

注：与对照组比较, ②P＜0.05。

基因突变类型 例数 RBC Hb MCV MCH MCHC RDW-CV β0 CD41-42(-TCTT) 28 5.75±1.13② 118±21② 66.9±7.4② 20.7±2.7② 308±10② 17.7±2.5②CD17A＞T 26 5.98±1.09② 122±21② 67.1±8.9② 20.8±3.4② 309±17② 17.0±1.8②IVSI-1G＞T 2 5.58±0.18 138±13 78.4±6.5② 24.8±1.5② 316±7 13.6±0.1 β+ IVS2-654 C＞T 19 6.18±1.36② 124±24② 65.8±5.1② 20.2±1.4② 308±11② 17.5±1.4②NT28A＞G 8 5.08±0.80 115±10② 71.7±5.8② 23.0±1.9② 320±6② 16.0±1.3②HB E CD26G＞A 20 5.23±0.88② 135±25 79.3±5.3② 26.1±2.1 326±12 14.9±2.3②东南亚缺失型（α0）αα/-SEA 66 5.89±1.05② 126±20② 71.2±7.9② 21.7±2.2② 307±17② 16.4±2.7②右缺失（α+）αα/-3.7α 23 5.27±0.94② 141±26 84.7±4.9② 26.8±1.9② 316±17② 14.3±2.9②左缺失（α+）αα/-4.2α 5 5.25±0.55 134±5 79.5±4.9② 25.6±2.1② 322±7.4 13.6±0.4非缺失型（α+）αα/αQs 2 5.12±0.47 130±6 78.7±2.5② 25.4±1.1② 323±4 14.4±0.1 αα/αTCS 3 4.50±0.93 123±36② 87.7±5.0 27.3±4.5② 310±41② 17.3±7.5②αα/αWS 1 5.85 162 84.3 27.7 329 12.1对照组 - 2014.75±0.48 141±17 90.0±4.8 29.9±1.4 331±8 12.7±0.8

1.资料与方法

1.1 资料

选取2016年3月—2017年9月昆明医科大学第一附属医院210名地贫基因携带者作为研究对象，年龄1岁～71岁（中位数：30岁），其中男性81例，女性129例。另选取同时期201例健康体检者作为对照组，女性101例，男性100例。

1.2 地中海贫血基因检测

EDTA-K2抗凝全血样本于天隆NP968全自动核酸提取仪提取基因组DNA后，采用用厦门致善生物荧光PCR-熔解曲线法基因检测试剂盒检测α-地中海贫血的缺失型（αα/-SEA，αα/-4.2α，αα/-3.7α）和非缺失型(Hb CS，Hb WS， Hb QS)，β地中海贫血的国内常见的21种突变类型，其中β+/βN10种，β0/βN10种和βE。

1.3 血常规检测

采集EDTA-K2抗凝全血2ml，经SYSMEX-XN2000全自动分析仪检测RBC，Hb，MCV，MCH，MCHC及RDW-CV。本实验室正常参考值为：RBC (3.5～5.5)×1012/L、HB 110～172g/L，MCH 27～35pg，MCV 82～99fl，MCHC 320～362g/L、RDW-CV 8.1～14.5%。

1.4 统计学方法

2.结果

2.1 本次检测210人中，α-地贫100例，β-地贫103例，αβ复合型7例。经过血常规红细胞各项参数分析，α-地贫组、β-地贫组及αβ复合组三组的RBC及RDW-CV明显高于对照组（P＜0.05），Hb、MCV、MCH、MCHC四项指标明显低于对照组（P＜0.05）；β-地贫组MCV、MCHC及MCH低于α-地贫组，αβ复合组MCV低于α-地贫组（P＜0.05）。结果及比较见表1。

表1 不同地中海贫血血细胞参数与正常对照组比较（±s）

表1 不同地中海贫血血细胞参数与正常对照组比较（±s）

注：与对照组比较， ①P＜0.05。

例数 RBC Hb MCV MCH MCHC RDW-CV β-地贫组 105 5.71±1.13① 124±22① 70.0±8.7① 22.0±3.4① 313±14① 16.7±2.3①α-地贫组 100 5.66±1.03① 130±22① 75.5±9.2① 23.3±3.1① 310±17① 15.7±3.0①αβ复合组 7 5.51±0.93① 118±16① 67.8±4.8① 21.5±1.5① 317±11① 16.1±2.2①对照组 2014.75±0.48 141±17 90.0±4.8 29.9±1.4 331±8 12.7±0.8

2.2 按照缺失或突变类型分类分析血常规参数，β-地贫中CD41-42(-TCTT)、CD17A＞T、IVS2-654 C＞T及α-地贫中αα/-SEA基因型 RBC、Hb、MCV、MCH、MCHC及RDW-CV检测结果与对照组相比均有显著差异（P＜0.01）。其中MCV、MCH低于其他基因型， RDW-CV高于其他基因型。见表2。

3.讨论

本次研究中α-地贫组、β-地贫组及αβ复合组三组的RBC及RDW-CV明显高于对照组（P＜0.05），与一些文献报道[4-5]结果并不一致，分析原因可以发现本次研究回顾的基因型主要是杂合子，长期的慢性贫血加之昆明地区的高海拔气候使得红细胞代偿性增高，生成的红细胞数量多但是质量较差；同时由于长期慢性溶血以及红细胞代偿增高，使得网织红细胞、质量差的大小不一的红细胞以及红细胞碎片也增多，导致RDW-CV值较高。

昆明地区α-地中海贫血中基因缺失突变比点突变更为常见，其中αα/-SEA所占比例最高。本次研究中αα/-SEA基因型6项红细胞参数与对照组相比较均发生明显变化，该基因型表现为同一条染色体上的2个α基因都缺失，导致形成血红蛋白的4个α基因中的一条染色体完全不能表达合成珠蛋白链，因此其临床血液学表现较其他几个α-地贫基因型都更严重；αα/-α3.7和αα/-α4.2仅一条染色体上缺失1个α基因，引起该基因功能丧失，另3个α基因正常工作，该条染色体合成的珠蛋白只是产量减少，因此本研究中左/右缺失型地贫血液学表型也相对较轻，有的患者甚至没有表现明显的血液学改变。

一般认为在非缺失型α地贫中αα/αTCS的血液学表现与αα/-SEA相当[6]，本组研究中αα/αTCS组MCHC及RDWCV与αα/-SEA组相当，而该组RBC及Hb则比其它α-地贫基因型组都更为明显降低（P＜0.05）。但由于本次观察αα/αTCS组样本量过少，其血常规参数的改变的结论尚不能确立，需待将来进一步研究讨论。

β-地贫组MCV、MCH及MCHC下降幅度超过α-地贫组，与黄远真等[7]的研究结果相似，其中CD17A＞T、IVS2-654 C＞T、CD41-42(-TCTT)基因型的MCV、MCH降低幅度及RDW-CV高于其他基因型，IVS2-654 C＞T是属于β+型突变，即β-基因的突变引起的是β-链合成的减少，其一般比β0突变的β珠蛋白基因完全不能合成β-链的基因型轻，但本次研究中IVS2-654 C＞T属于例外。βE属于β-突变的一种特殊类型，在张杰[8]等的研究中其在云南省的β-杂合突变中占有重要比例，在临床上无任何贫血症状，血液学可表现为小细胞低色素。

综上所述，MCV、MCH及RDW-CV结果与基因表型有一定的相关性，对于临床医师在进行地贫遗传咨询时有很好的指导意义，对于地贫防控也具有重要意义。