幸娟霞 张麟燕 刘琪 彭军容 罗国霞 施迎春 王村建(通讯作者)
(1重庆市涪陵中心医院医学检验科 重庆 408000)
(2重庆市涪陵中心医院耳鼻喉科 重庆 408000;3重庆市涪陵区疾控中心 重庆 408000)
SysmexXE-2100为普遍使用的血细胞分析仪,具有CBC、CBC+DIFF、RET等通道模式。它与很多血细胞分析仪同样虽不能很正确识别异常细胞,但能提示较可靠的报警信息,检验者可据信息推片复检,核对其准确性。我科对300例仪器提示嗜酸增高样本中发现4例报警信息与镜检结果不一致,最后分析散点图特征,并结合仪器原理和镜下红细胞形态,最终发现疟原虫感染。
1.1.1 仪器和试剂
(1)血细胞分析仪:日本Sysmex XE-2100血细胞分析仪,采用核酸荧光染色技术(DIFF通道)和激光流式分析技术(WBC/BASO通道)双方法检测WBC总数和分类,该仪器用侧向散射光(SSC,细胞内容物复杂程度)和侧向荧光强度(SFL,细胞内RNA和DNA含量)行WBC分类计数。同时在溶血素中加入大分子有机酸,让有机酸特异性结合到EO颗粒上,以增加EO内容物的复杂性,从而达到区分EO的目的[1]。
试剂、校准品、质控品:Sysmex公司原装配套产品。
(2)显微镜Olympus BX41;BASO刘氏染色液。制片按《全国临床检验操作规程》第4版执行[2]。
1.1.2 病例及样本 2016年1月—2017年6月,EO异常的门诊和住院患者300例;其中疟原虫感染者:男4例,45~49岁,平均年龄46.5岁,均为重庆本地人,均有境外工作或居住史,因发热、寒战、畏寒等就诊。
(1)血细胞分析仪检测 用乙二胺四乙酸二钾(EDTA—K2)抗凝真空管,采集2mL静脉血充分混匀,于抽血后1h内用XE-2100上机检测。仪器按期校正,每日室内质控,双水平;运行良好。
(2)镜检 仪器示EO增高或异常报警的样本,制备合格的血涂片,用刘氏染液染色镜检复核。若出现镜检与仪器结果不一致时,观察RBC形态查找疟原虫。
XE-2100检测300例EO增高样本中,4例镜检与仪器不符,占1.3%,查看WBC散点图,发现异常,细看散点图上EO与中性粒细胞间距变小,紧密连接,表现为EO假性增高(疟疾感染者)。
4例疟疾感染者镜检示EO均正常,同时RBC内见疟原虫裂殖体、配子体或滋养体。检测结果见表。
表 4例疟原虫样本血液学检测结果
Sysmex XE-2100血液分析仪功能齐全,应用广泛,能对异常信息提示,在总300例EO增高患者中,4例疟原虫感染样本的仪器信息提示与镜检不一致,其散点图示EO与中性粒细胞间紧密连接,而余296例散点图无明显异常。分析原因可能为:该XE-2100 WBC分类计数原理是利用SSC和SFL,而疟原虫感染的主要发病原因在于红细胞内疟原虫裂解增值,疟原虫感染RBC消化Hb后产生疟色素,为一种双折光晶体,当RBC破裂,疟色素释放出来被WBC所吞噬[3-5],吞噬了疟色素的WBC侧射光强度发生改变,显示在EO散点图区域略左侧,故仪器上此类样本被误认EO增高,造成EO+比值增高假象;而现实正常EO增高与假性EO增高的散点位置有差异,余296例为真性EO增多,显示为正常散点图。
回顾总结,虽然此类疟原虫标本仅占标本总量的1.3%,工作中在仪器报警提示与镜检不符时,不能就轻易认可报警信息而不查找真正原因,应严格认真执行复检流程。其次需要对仪器工作原理掌握,重视各种报警信息含义,才能明确引起异常报警的真正原因。所以在工作中使用SysmexXE-2100时,认识“特征性”的散点图筛检疟原虫有很好的临床价值,但仅用于过筛并不能确认疟原虫类别,需进一步镜下确认。鉴于病例数有限,仍待进一步累积病例,证实感染疟原虫的“特征性”散点图。