851例新生儿细胞遗传学结果分析＊

李瑞，赵鼎，张耀东

(郑州大学附属儿童医院、河南省儿童医院、郑州儿童医院；河南省儿童遗传代谢性疾病重点实验室，郑州 450018)

染色体病通常伴有发育畸形和智力低下[1]，是儿科遗传性疾病的重要组成部分。染色体异常的胎儿大部分在妊娠2个月内自然流产，但尚有一部分无致命的染色体异常胎儿能足月娩出，其在活产婴儿中的发生率约为0.6%[2]。染色体核型分析和荧光原位杂交技术 （fluorescence in situ hybridization，FISH）是目前诊断染色体病的主要方法。本研究对851例新生儿的染色体核型分析和FISH结果进行归纳总结，以了解新生儿异常染色体的分布情况，为早期发现染色体病提供依据。

1 资料与方法

1.1 对象 2008年1月～2018年3月期间851例临床表现不同程度的反应迟钝、精神发育迟滞或伴器官畸形、特殊面容、肤纹异常等疑似染色体异常症状的新生儿，除常规检查外另进行了外周血染色体核型分析和FISH。样本采集及相关检测均已告知患者，并均签署了知情同意书。本研究经郑州大学附属儿童医院伦理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 G显带染色体核型分析 取患儿外周血培养，常规方法制备染色体计数20个核型，按ISCN标准分析3个核型，嵌合体加倍计数[3]。

1.2.2 FISH FISH对21号和性染色体着丝粒探针，进行标本处理、变性、杂交、杂交后洗脱操作。

1.2.3 荧光显微镜检查 在奥林巴斯BX51荧光显微镜下通过三色滤光块(DAPI/TRITC/FITC)观察杂交信号，FISH 2.0荧光图像分析系统 （俄罗斯VideoTesT）进行图像分析，每份间期核标本计数200个细胞判断阳性结果。

2 结果

851例新生儿中染色体正常（320-550条带阶段未见染色体异常）的631例，占全部受检病例数的74.1%（631/851）。染色体异常220例，占全部受检病例的25.9%（220/851），其中各种类型的21三体综合征178例，占染色体异常核型的80.9%(178/220)。男性患儿105例，女性患儿73例，男女之比约为 1.44：1。标准三体型 167例占 93.8%（167/178），嵌合型 6 例占 3.4%（6/178），易位型 5 例占2.8%（5/178）。易位型5例中，其中G/G易位2例占 40.0%（2/5），D/G 易位 3例占 60.0%（3/5）。 其余异常核型分别涉及到性染色体及多条常染色体共220例，详见表1。

表1 220例患儿染色体异常分布

3 讨论

由于缺乏有效的治疗措施，出生缺陷如今已成为新生儿致死、致残的重要原因之一[4]。本研究检出的染色体异常核型中21-三体综合征有178例，占染色体异常核型的80.9%，本组资料最显著的一个特点是全部21-三体综合征病例中标准三体型占93.8%，嵌合型占3.4%，易位型占2.8%，与文献报道一致[2]。21-三体综合征是新生儿中最常见的染色体异常疾病，严重危害儿童健康，群体发病率为12.3%，占智力障碍病人的10%[5，6]。目前还无法治疗，因此对高风险孕妇开展产前胎儿染色体核型分析非常重要，只有早期诊断，及时终止妊娠，才能减少患儿出生。

本研究检出5p-综合征（猫叫综合征）5例，群体发病率1/50000，在智力低下儿中约占1～1.5%，在小儿染色体病中占1.3%，在常染色体结构异常病儿中居首位。本病的主要临床特征是患儿在婴幼儿期的哭声似小猫的“咪咪”声，有关研究认为是喉部畸形、松弛、柔弱所引起，但也有认为是中枢神经系统器官性或功能性病变引起呼气时喉部漏气所致。大部分患者能活到儿童，少数能活到成年。5p15为本病缺失片段。80%的病例为染色体片段的单纯缺失，10%为不平衡易位引起的，环状染色体或嵌合体则比较少见。大部分病例的染色体畸变是新发生的，呈散发性，但约10～15%患者为携带者的子代[7]。

额外标记小染色体 （small supernumerary marker chromosome，sSMC）是指在人类正常染色体核型 46，XX（女性）或者 46，XY（男性）基础上额外增加的小标记染色体。其在大多数情况下要小于20号染色体，结构可能是倒位重复、环状或者其它微小结构[8]。本文检出额外小染色体1例，新生儿肌张力低，面容异常送检，核型为 47，XY，t(14；18)，+mar。家系调查：其父25岁，其母21岁，从事服务性工作。否认近亲结婚和有害物质、放射性物质接触史。此系第一胎，足月顺产，妊娠期无特殊不适，患儿父母拒绝进行染色体检查，无法查明标记染色体来源。

本研究检出的性染色体异常12例，其中2例47，XXY；4 例 47，XYY；5 例 45，X；1 例 48，XXXY，均建议患儿家属到内分泌科进行咨询。

本院新生儿异常核型检出率25.9%，高于Balkan等[9]报道的16.1%、张璩等[10]报道的16.3%和郑昭科等[11]报道的14.47%。核型异常检出率较高的原因可能为：⑴染色体核型分析和FISH共同检测；⑵临床医生严格执行染色体细胞遗传学检查的指征；⑶与其他学者报道不一致可能与纳入研究的人群、研究时间段、时间跨度不一致有关。

综上所述，常染色体病患者一般均有较严重或明显的先天性多发畸形、智力和生长发育落后，常伴特殊肤纹，即所谓的“三联征”[7]。染色体异常患者下一代出现染色体异常的概率高于正常人群，尤其是平衡易位携带者下一代出现染色体异常的概率高达50%～100%，给家庭和社会造成沉重的经济和精神负担。因此尽早进行细胞遗传学核型检查，检出携带者。