氨溴索注射亚微乳稳定性研究

张会丽，李书平，姜亚玲

（郑州工业应用技术学院药学与化学工程学院，河南 郑州 451150）

盐酸氨溴索为黏痰溶解药，2015年版《中国药典（二部）》［1］收载的剂型有口服溶液、片剂、注射液、胶囊、缓释胶囊、糖浆6种。虽有缓释片上市，但对于不能口服给药的患者无法使用，又存在临床注射剂用量较大且有减少给药次数的需求。鉴于该药无乳剂品种上市，考虑将其制成乳剂以达到缓释作用，而水／油（W／O）型和水／油／水（W／O／W）型乳剂由于注射时的生物相容性问题和储藏不稳定性使得制备和使用的可能性较小。本研究中将盐酸氨溴索制成氨溴索，再用剪切仪及均质仪做成油／水（O／W）型乳剂，以期制成有缓释作用的注射用乳剂［2－4］，并对其稳定性进行研究［1，5－6］。

1 仪器与试药

1.1 仪器

隔水式电热恒温培养箱（上海市跃进医疗器械厂）；YSEI药品稳定性试验箱（重庆市永生实验仪器厂）；AT460型电子天平、AG245型电子天平（瑞士Mettler Toledo仪器公司）；D－79282型高速剪切仪（德国Fluko公司）；M－110L型高压微射流纳米均质机（美国Mfic公司）；TGL－16GB型小型通用离心机（上海安亭科学仪器厂）；Professional Meter PP－50型电位与pH计（德国Sartorius公司）；BI－9000AT型光子相关光谱仪（美国Brookhaven公司）。

1.2 试药

盐酸氨溴索（北京太洋药业有限公司，批号为M130909）；氨溴索亚微乳（自制，规格10 mL，批号分别为 2014112001，2014112002，2014112003）；磷酸二氢钾（天津科密欧化学试剂有限公司，批号为20120512）、氢氧化钠（天津市进丰化工有限公司，批号为20140512）均为分析纯；甲醇（Merck公司，批号为1637030－217）为色谱纯。

2 方法与结果

2.1 影响因素试验

2.1.1 考察项目及测定方法

按最终处方和制备工艺制备3批载药乳剂（编号分别为 001，002，003），氮气流下灌封于 10 mL 安瓿，悬挂式震荡灭菌。分别于 40℃，60℃，（4 500±500）lx光照，冰箱冻融3次后，考察以下项目。

外观：目测，乳剂呈乳白色，倒转后不粘壁，流动性良好，记为（＋），表示乳剂稳定；乳剂混浊、分层、粘壁或析油，记为（－），表示乳剂不稳定。

离心稳定性：取适量乳剂置5 mL离心管中，以4 000 r／min的速率离心15 min，同法评价乳剂稳定性。

pH：用Professional Meter PP－50酸度计测定乳剂的pH，结果应符合规定。

粒径：采用动态激光光散射法测量。

含量测定：采用高效液相色谱法测定氨溴索亚微乳含量［1，7］。采用 LC －10AT 型高效液相色谱仪（含 ANASTAR工作站，日本岛津公司），Diamonsil®C18色谱柱（250 mm ×4.6 mm，5 μm，迪马公司），检测波长 248 nm，柱温 30℃，流速 1.0 mL／min，流动相为 pH ＝7.0的磷酸盐缓冲液 －甲醇（27 ∶73），进样量 20 μL。精密量取乳剂1 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇适量溶解，定容，精密量取1 mL，置10 mL容量瓶中，加甲醇适量溶解，定容；另配制同浓度的氨溴索对照溶液，进样，按外标法计算氨溴索含量。

2.1.2 稳定性考察

高温试验：将氮气流下灌封于10mL安瓿的载药乳剂置40℃或60℃下10 d，分别于第5，10天取样，按稳定性重点考察项目进行检测。结果见表1和图1。可见，温度越高，乳剂的含量和pH下降越大，但粒径几乎无变化，说明乳滴本身对该条件稳定；由于高温会影响药物稳定性，因此，该药乳剂应避免高温贮藏（因篇幅所限，仅附60℃高温下5 d粒径分布图）。

表1 高温试验结果

图1 60℃高温试验5 d粒径分布图

强光照射试验：将氮气流下灌封于10 mL安瓿的载药乳剂置（4 500±500）lx照度的条件下10 d，分别于第5天和第10天取样，按稳定性重点考察项目进行检测。结果见表2。可见，不同光照条件下，乳剂粒径几乎无变化，含量下降不明显，但考虑到光是引起药物降解的主要因素，因此乳剂仍宜避光贮藏。

表2 强光照射试验结果

冻融试验（热循环试验）：美国食品药物管理局（FDA）于1998年6月发布的稳定性指导原则草案提出，对于易发生相分离、黏度减小、沉淀或聚集的药品，需通过热循环试验来验证其运输或使用过程中的稳定性。作为影响因素试验的一部分，应模拟药品在运输与使用过程中可能碰到的温度条件下循环考察上市包装药品的稳定性。将氮气流下灌封于10 mL安瓿的载药乳剂，以－20℃条件下冷冻48 h和40℃条件下放置48 h为1个循环，共循环3次。每完成1个循环，按稳定性重点考察项目进行检测。结果见表3。可见，乳剂在该条件下含量变化不明显，但粒径变化高于60℃时，贮藏乳剂时应避免剧烈的温度变化。

表3 冻融试验结果

2.2 加速试验

按最终处方和制备工艺制备3批载药乳剂（编号分别为 001，002，003），氮气流下灌封于 10 mL 安瓿，悬挂式震荡灭菌。置温度（30±2）℃、相对湿度（65±5）%的条件下6个月，分别于第1，2，3，6个月末取样，按稳定性重点考察项目进行检测。结果见表4。可见，6个月内氨溴索亚微乳pH降低不明显，粒径稍增大，说明乳剂在该试验条件下相对稳定，但考虑到乳剂本身的热力学不稳定性，仍宜冷藏保存。

表4 加速试验结果

2.3 长期留样试验

按最终处方和制备工艺制备3批载药乳剂（编号分别为 001，002，003），氮气流下灌封于 10 mL 安瓿，悬挂式震荡灭菌。置温度（25±2）℃、相对湿度（60±10）%条件下6个月，分别于第1，2，3，6个月末取样，按稳定性重点考察项目进行检测。结果见表5。可见，6个月内氨溴索亚微乳pH降低不明显，粒径稍微增大。

表5 长期留样试验结果

3 讨论

盐酸氨溴索有溶解分泌黏液及促进黏液排出的作用，并能增加呼吸道黏膜浆液腺的分泌，减少黏液腺分泌，从而降低痰液黏度；同时可促进肺表面活性物质的分泌，增加支气管纤毛运动，使痰液易于咳出，达到显著排痰及改善呼吸的作用。肺癌患者由于肿块压迫、侵犯气管，使得支气管狭窄，引流不畅，致使症状迁延不愈，感染不易控制［8］。对于合并阻塞性肺炎的肺癌患者，联合盐酸氨溴索治疗能更好地缓解症状，控制炎症，提高氧合能力，促进病灶吸收，减少抗菌药物的使用时间和住院时间［9］。

在不同影响因素、加速试验和长期试验条件下，乳剂的粒径变化均不明显，说明乳滴本身对该条件稳定。但影响因素试验中，乳剂的pH及氨溴索亚微乳含量略有下降，对含量的影响大小顺序为60℃＞40℃＞冻融＞光照。因此，乳剂在贮存时宜阴凉处避光保存。

由于温度和贮存期间甘油酯和磷脂的水解会产生游离脂肪酸，从而导致乳剂pH下降，故制备乳剂时pH需调至弱碱性。又因在各种条件下，乳剂pH均有下降，故制备乳剂时宜将其pH调至8.5左右。

60℃高温试验结果显示，乳剂的含量和pH值下降较大；加速试验6个月和长期试验6个月结果显示，乳剂中氨溴索亚微乳下降率较小，分别为1.67%和1.29%。由于高温会影响药物稳定性，因此该药乳剂应阴凉处贮藏。