包虫病防控技术研究

一、病原学研究

1. 棘球蚴病。棘球蚴病俗称包虫病，由棘球属绦虫幼虫（中绦期）──棘球蚴（包虫）寄生于人和动物肝、肺等器官所引起的一类重要人兽共患寄生虫病。

2. 病原学。棘球蚴属于绦虫刚圆叶目带科棘球属，棘球属的绦虫种类有细粒棘球绦虫、多房棘球绦虫、少节棘球绦虫、石渠棘球绦虫、加拿大棘球绦虫等。

二、流行病学研究

1.包虫病在全国的流行情况。全国棘球蚴病流行县有368/413个，分布于内蒙古、四川、西藏、甘肃、青海、宁夏、云南、陕西和新疆等9省（自治区），其中115个县为细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病混合流行区。

青海、西藏、甘肃等3省（自治区）的犬粪棘球蚴绦虫抗原阳性率较高；西藏、青海和四川等3省（自治区）的人群棘球蚴病检出率较高；西藏、青海和四川等3省（自治区）的家畜棘球蚴病检出率较高。

在中国流行的虫株（中间宿主体内）里，细粒棘球蚴G1较广泛分布于家畜和人，多房棘球蚴较广泛分布于人和啮齿动物。四川、新疆、黑龙江发现少量G3、G6、G10人体病例；石渠棘球蚴一般分布于青藏高原的啮齿动物。

2012-2016年中国流行区学校儿童棘球蚴病患情况和血清学调查和野生动物棘球蚴病感染情况调查结果都显示，内蒙古、四川、甘肃、青海、宁夏和新疆等地的阳性率和感染检出率较高。

2.包虫病在内蒙古的流行情况。流行区包括东乌珠穆沁旗、化德县、太仆寺旗、新巴尔虎右旗、额尔古纳市等23个市、县、区、旗。1985年唐崇惕等人于内蒙古伦贝尔草原上动物多房棘球蚴感染情况：布氏田鼠和长爪沙鼠的平均感染率分别为2.43%和16.67%。1998-2001年唐崇惕等人于内蒙古伦贝尔草原上动物多房棘球蚴感染情况：布氏田鼠感染率分别为0.92%，其他6种啮齿动物未发现感染情况。

三、防控措施研究

1. 切断病原在犬—家畜之间的传播链：如驱虫和疫苗接种。

2. 禁止随意抛弃荷有包虫的动物脏器和喂犬（注意屠宰检疫、废弃脏器无害化处理等环节）。

四、诊断检测技术的研究与应用

（一）国外研究现状

研究结果表明，利用大肠杆菌生产的基因工程亚单位重组疫苗（GST-EG95+Quil A）对绵羊进行二免后可使免疫动物产生坚强的抵抗棘球蚴感染的保护力（90%以上）。

基因工程EG95亚单位重组抗原疫苗免疫保护作用：已有大量文献报道，基因工程亚单位重组疫苗（EG95）在绵羊和牛进行二免后可使免疫动物产生坚强的抵抗棘球蚴感染的保护力（80%以上）。基因工程亚单位重组疫苗（EG95）已在中国、阿根廷等国家推广使用和评价疫苗效果。

（二）国内包虫病疫苗研制现状

中国农业研究院生物制品工程技术中心引进新西兰专利技术生产动物包虫病基因工程重组抗原疫苗，疫苗产品为白色疏松的冻干苗。疫苗主要组成为细粒棘球绦虫EG95重组抗原和Quil-A佐剂，并取得国家一级新兽药证书。后将此技术转让至重庆澳龙生物制品有限公司。

（三）中国国家包虫病免疫计划

农业部文件（农医发[2014]10号）常见动物疫病免疫推荐方案（试行）规定：首次将包虫病列为免疫病种之一；农业部文件（农医发[2016]10号）国家动物疫病强制免疫计划规定：在包虫病重疫区，由省级畜牧兽医主管部门会同有关部门根据监测情况自主选择免疫的策略；农业部文件（农医发[2017]8号）国家动物疫病强制免疫计划规定：在包虫病流行区对新补栏养只进行包虫病免疫，群体免疫密度应常年保持在90%以上，应免疫动物免疫密度达到100%。

（四）2018年国家包虫病免疫计划

农业部文件（农医发[2018]1号/20180116）发布了针对包虫病的政策：包虫病是国家强制免疫的5种疫病病种之一；在包虫病流行区，对新生羔羊、补栏羊及时进行包虫病免疫；群体密度应常年保持在90%以上，其中应免动物免疫密度达到100%。

五、诊断技术的研究与应用

（一）终末宿主—棘球绦虫感染的诊断

一是死后诊断，即剖检法（抽样调查）；二是生前诊断，包括粪虫卵与节片镜检、槟榔碱泻下法（抽样调查）、粪DNA检测法（PCR、LAMP、RPA、实时荧光PCR）、粪抗原ELISA法等。现国际上仍普遍采用“氢溴酸槟榔碱下泻法”和“剖检法”（金标准）检查犬科动物棘球绦虫感染情况。

1. 氢溴酸槟榔碱下泻法：（1）经口灌喂氢溴酸槟榔碱，肠道痉挛、引起下泄，检查下泄粪便；（2）标准粪便：带肠黏膜冻状下泄物；（3）优点：客观、真实、准确；（4）缺点：环境污染、操作者有一定风险、可能会有10%～20%的犬不下泻。

2. 粪抗原ELISA法（酶联吸附测定）。（1）试剂盒：购置市售商品试剂盒（双抗体夹心法）；（2）优点：操作简便、可批量检测等；（3）敏感性低、目前市面上的试剂盒只针对细粒棘球绦虫（狭义种）、对样品新鲜度要求较高等。

（二）中间宿主—棘球蚴感染的诊断

生前诊断主可依靠影像学方法（B超/x光）；死后诊断主要是剖检法，包括宰后肉眼观察、实验室诊断（PCR、核苷酸序列测定、RFLP-PCR、RPA、RTPCR等）。现普遍采用国际公认的剖检法，对家畜宰后进行棘球蚴感染的调查，该法取得的调查结果为“金标准”；对可疑病灶或包囊、一种宿主可感染多种棘球蚴等、有时无法鉴定；目前对中间宿主患棘球蚴病的生前诊断尚无行之有效的方法；一些血清学方法逐渐应用于生前流行病学和群体感染情况的调查。

细粒棘球绦虫基因型（测序）存在G3和G6基因型，特别是G6基因型的存在应引引起注意：现有的诊断试剂盒可能造成漏检，因为与G1基因型(普通绵羊株差异较大）。

（三）羊棘球蚴病抗体检测测试试剂盒的研制

兰州兽医研究所分离筛选了棘球蚴囊液种极具应用价值的抗原成分，并制备了羊包虫病检测试剂盒。该试剂盒与同类试剂盒的检测敏感性相比较，经试验证明，该试剂盒对剖检及分子生物学鉴定为包虫病的羊血清检测数量为200份，阳性检测的敏感性为83%，远远高于其他试剂盒，检测阴性羊血清840份，阴性准确率为97.2%。

疫苗免疫动物后血清抗体的检测关系到免疫动物是否有免疫保护力，更关系到动物群体免疫抗体水平和密度。在对市售EG95抗体ELISA检测试剂盒的对比实验中，对已知的10份绵羊阴性血清（健康对照羊）检测的结果显示，市售产品中一半会呈现假阳性率过高，而兰州兽医研究所研制的EG95抗体ELISA检测试剂盒的假阳性率仅有4.4%。